• Santé - Volume, Protéines, étapes

[Biochimie] Dosage des protéines

ok d accord, mais comment peux tu expliquer le fait que j obtient une augmentation en quantités de protéines aprés précipition est ce la méthode de lowry qui ne convient pas.  [...] Si vous considérez les chiffres absolus qui sortent du spectro, ce n'est pas une quantité, c'est une concentration qu'il faut rapporter au volume de protéines à chaque étapes. Normalement le nombre total devrait diminuer, si il augmente c'est que vous avez un souci dans la conduite de vos manip.  [...]

[Biochimie] Pepsine

1. Etape intraluminale. les prot. sont catabolisées en AA et peptides. Les enzymes protéoliptiques, synthétisés par les formes exocrines de l'appareil digestif, sous la forme de proenzymes (ou zymogènes) inactifs sont.  [...] Ensuite j'ai fait quelques recherches sur internet pour aboutir au fait que la pepsine hydrolisait bien... mais quoi les liaisons peptidiques, les protéïnes, ou bien.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN

Globalement tu as les réponses a tes question. L'etape dans la glace permet de préserver (en theorie) tes ARN de la degradation.  [...] Après ces étapes on fait une centrifugation à 3000 tours, Les ARN sont dans le surnagent (de volume V) c'est pourquoi on le récupère. Mais on y ajoute un volume V d'éthanol à 95%, es ce pour faire précipité les ARN dans le culot je pense que oui puisqu'on le récupère.  [...]

repliement des protéines

qui peut me citer les étapes du repliement des protéines dans le REG. et aussi la différence entre les protéines luminales et membranaires. et merci infiniment pour vos réponses.  [...] Encore de la flemmardesse. C'est d'abord un ajout de sucre et après selon le repliement la protéine continue ou pas ( via les protéines 'cal' comme la calnexine ). Si elle est mal repliée elle recommence un cycle d'arborisation et si elle est vraiment mal foutue elle est ubiquinitée et détruite.  [...]

[Biochimie] Dégradation de protéines dans l'urée 8M

Je purifie ensuite mes protéines en les passant sur une colonne à nickel (mes protéines possèdent des queues polyhistidine), toutes les étapes jusqu'à l'élution se font en urée 8M.  [...] Ce protocole a fonctionné pour 2 protéines mais pour la 3eme un problème survient dans la purification. La protéine se charge correctement sur la colonne (je n'ai presque rien qui ne s'accroche pas), elle résiste aux lavages et au moment de l'élution je me retrouve avec une bande beaucoup plus basse, comme si la protéine avait été tronquée ou digérée.  [...]

[Bioinformatique] Analyse d'un transcriptome pour déterminer les protéines sécrétées

Nous avons séquencé le transcriptome de glande salivaire d'une espèce d'insecte. J'aimerais déterminer quelles protéines sont codées par ces transcrits et si ces protéines sont secrétées. Voici les différentes étapes que je compte faire pour mon analyse.  [...] -. j'obtiens deux résultats les transcrits qui ont matchés contre la banque nr (protéines potentielles) et ceux qui n'ont pas matchés.  [...]

[Biologie Moléculaire] Binding tests sur enzyme

J'ai aussi pensé à utiliser les tests de binding classiques mais il faut que les protéines soient membranaires. J'ai donc cherché comment amener mon enzyme à la membrane (création d'une protéine chimère), mais je ne trouve rien. Il doit pourtant exister un vecteur avec une séquence signal et une suite d'acides aminés aliphatiques permettant l'expression membranaire de mon enzyme.  [...] Un test de binding sur cellule entière ou sur membrane isolée, c'est des étapes et des étapes (lavage, fixation...), des soucis de reproductibilité avec des lots de cellules qui vont produire plus ou moins de protéines, des soucis de sensibilité avec beaucoup de non-spé lié a l'absorption des molécules aux membranes.  [...]

[Biochimie] Modifications post traductionnelles et électrophorèse !

Non pas à ma connaissance. Pour mes protéines après migration à 80V dans le stacking et 130V dans le separating, je transfère en liquide pendant 1h30 à intensité fixe 350 mA, puis les autres étapes sont inchangées par rapport à d'autres westerns sur d'autres protéines.  [...] Oui mais ça reste toujours une question de taille et non de masse, la masse découlant de la taille de la protéine. Le critère permettant la séparation des protéines est la taille, plus exactement comme disent les biophysiciens le volume hydrodynamique de la protéine qui va déterminer sa vitesse de migration au travers des mailles du gel.  [...]

extraction des protéines par le Tris-HCl

Je suis à la recherche du rôle de la concentration du solvant Tris-HCl dans l'extraction des protéines dans le coeur de dinde (un tissu ) j'ai fait une manipulation d'extraction par le Tris-HCl 1M / 2M et 3M et j'ai trouvé les résultats suivantes.  [...] pour appuyer la réponse de vpharmaco. l'extraction de protéines est un truc relativement variable dans la quantité obtenue même avec le même tissu de départ. Avec une mesure par condition et de tels résultats on ne peut absolument rien conclure.  [...]

[Biochimie] Synthèse des protéines

Pour ma part je resterai plus dans la biochimie. Tu peut tout simplement amener le sujet en parlent de l'interet des proteines dans les cellules (canaux de transport manbranaire, enzyme...) et pour amener le sujet, mais d'ou viennent les proteines... Voila comment moi je mis prendrai.  [...] Personnellement vu la question j'aurais tendance à présenter d'emblée les protéines comme éléments finaux de l'expression du génome, les responsables des phénotypes. Pour moi les fonctions protéiques précises ne sont que des exemples ici.  [...]