• Santé - Vecteur, Niveau, Protéine

ubiquitine et protéasome

si apres inhibition du proteasome, le niveau d'expression cellulaire de ta proteine est plus grand, tu pourras passer a l'etape suivant (ubiquitinylee où comment).  [...] Je t explique la manip. Enfait je suis entrain de créer le vecteur de clonage permettant de surexprimer la protéine permettant de capter une autre pour l'envoyer au protéasome. Est ce que tes inhibiteurs peuvent s utiliser sur des cellules S2+.  [...]

recombinaison homologue

mutée au niveau de ce gène. Ce gène sert aussi pour l'intégration du vecteur dans le locus.  [...] vecteur est linéarisé par restriction au niveau de ce gène. YIp5 est un exemple de vecteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression hétérologue de protéine : vecteur baculoviral

Toi commencer à parler comme moi, pas bien, marque toi perdre neurones Bon, sérieusement. E. coli fait des ponts disulfure, mais au niveau du périplasme. Donc, quand tu fais produire des protéines avec des ponts S-S chez coli, tu ajoutes en général un peptide signal (OmpA le plus souvent ou béta-lactamase) pour adresser la protéine.  [...] Non, ce sont les DO que j'obtiens en 36h en milieu ZYP (auto-inducteur). Quand je fais avec du LB, j'iduis à DO environ 2 (50uM d'IPTG final) et je les arrête à environ 4-5 de DO (de toute manière, elle ne monte pas plus haut dans ces conditions). Le truc est que même dans ces conditions, je détecte la protéine en blot mais je ne la vois pas du tout en bleu de Coomassie.  [...]

Probleme d'induction de GST dans bacterie

3. Pour mieux cerner ton problème, tu commences par répéter ton protocole de production en utilisant le vecteur vide au lieu de ta construction. La GST est une protéine très facile à produire donc tu en auras des tonnes si ton protocole est correct. Rend toi au 4 si tu as beaucoup de GST, sinon rend toi au 7.  [...] 7. Si tu n'arrives pas à produire la GST seule, c'est ton protocole de production qui a un problème. Essaie un autre protocole avec le vecteur vide d'abord puis une fois que ça marchera tu essaieras avec ta protéine de fusion.  [...]

Créer une protéine taguée NLS

J'ai ma séquence codant ma protéine dans un vecteur A. je suis capable de la sortir.  [...] Quelqu'un connait-il un vecteur avec un tag NLS dans lequel je pourrai rentrer la séquence codant ma protéine Puis-je acheter directement le TAG.  [...]

L'épidémie de chikungunya bien installée aux Antilles

Le chikungunya est une maladie le plus souvent bénigne mais qui occasionne une très grande fatigue et de fortes douleurs, en particulier au niveau des articulations, d'où une posture courbée qui a donné son nom à cette pathologie. Le meilleur moyen de se protéger est d'éviter le risque de contact avec le moustique vecteur et d'éliminer ce dont la femelle a besoin pour pondre. de l'eau stagnante. Idé Graphics.  [...] C'est vers ces moustiques que se focalise la prévention. Dans les régions concernées, il faut faire la chasse aux eaux stagnantes, même les plus modestes, comme des pots de fleurs ou des vieux pneus. Il en faut très peu pour qu'une femelle viennent y pondre ses oeufs, libérant ensuite une nuées d' insectes porteurs du virus.   [...]

Protéine de fusion recombinante dimérique, besoin d'aide.

- Pour faire une protéine dimérique, comment on peut opérer Je pensais qu'on pouvait par exemple prendre deux plasmides et ajouter à la fin des deux gènes d'intérêt la thioredoxine.  [...] C'est un vecteur d'expression pour la proinsuline et l'écotine. Et dans l'énoncé, il est noté que l'écotine est une protéine dimérique. Du coup, je pensais qu'il fallait faire deux plasmides. Un avec la proinsuline et l'écotine et un autre juste avec l'écotine.  [...]

Questions en immunologie , vaccination

ensuite utiliser ce vecteur dans la vaccination en l'injectant dans l'organisme. mais la protéine formé est toujours pathogène, si on injecte le vecteur, on provoquera la maladie SVP une explication. Je n'ai pas bien compris ces méthodes.  [...] La réponse immunitaire se met donc en place de façon efficace. A l'inverse, si on met un microorganisme tué ou un antigène isolé (juste une protéine par exemple), il n'y a pas cette activation donc la réponse risque d'être insuffisante.  [...]

[Génétique] Transfection

je voudrais savoir si les cellules transfectées transitoirement par un vecteur codant la proteine de fusion c-Myc-GFP expriment toujours la proteine c-Myc endogène.  [...] La fusion à la GFP permet juste de suivre t'as prot d'interet (myc). Donc la myc s'exprime mais l'expression ou le suivis (tout depend du but de la fusion) est rapporté par la GFP.   [...]

[Biologie Moléculaire] Protéine de fusion

Dans le cadre de mon travail de thèse j'étudie l'expression d'une protéine. Pour commencer j'ai donc cloner le cDNA dans un vecteur d'expression pCDNA3 afin de le transfecter dans des HEK. Malheureusement il n'existe qu'un seul type d'anticorps contre cette protéine et le seul qui existe ne fonctionne absolument pas.  [...] C'est malheureusement relativement chpre et donc cela ne passera pas auprès de mon chef. Petite question. la protéine de fusion peut être attachée aussi bien en 5' qu'en 3' ou uniquement en 3'.  [...]