• Santé - Total, Cellules, échantillon

Hippocampe et MACS

Je travaille actuellement sur les cellules souches nerveuses (CSN). Afin de mettre au point la technique d'isolement de ces cellules et avant de passer sur des résections de glioblastomes humains, des exérèses d'hippocampe murin seront utilisées dans un premier temps.  [...] Mon problème est le suivant. il existe plusieurs kits MACS qui diffèrent par le nombre total maximal de cellules qu'ils peuvent traiter par échantillon (2x10 8 et 2x10 9 ). Ce kit étant relativement onéreux, j'aurais voulu savoir si quelqu'un connaissait le nombre total approximatif de cellules (tous types confondus) présentes dans une exérèse d'hippocampe MURIN, et ce afin de commander le kit le plus approprié à la situation.  [...]

[Biologie Cellulaire] Compter le nombe de plaquette & globules

Chez Beckman, leurs cytomètres utilisent un liquide de gaine qui circule dans le sens inverse du passage des cellules dans la cellule photosensible (flow-cell)... En fonction de la quantité du liquide de gaine, tu fais varier le diamètre de passage et donc le nombre d'évènements comptés par le cytomètre.  [...] Si tu fais passer une solution de billes calibrées en nombre, ça te permet de compter les évènements et donc de dénombrer les cellules de ton échantillon. Mais il n'est pas recommandé de faire passer du sang total dans un cytomètre (trop d'evenements), tu sépare les différents types de cellules avant.  [...]

[Génétique] Quelques notions de génétique

Je dois présenter jeudi (..) un article de Nature Medicine qui utilise beaucoup de notions de génétique avec lesquelles je ne suis pas du tout familière, aussi je me demandais si une âme charitable qui passait par là serait prête à m'aider.   [...] - Tout d'abord les VAF (variant allele fractions). si j'ai bien compris, il s'agit du pourcentage de l'allèle variant sur x région d'intérêt sur le total des allèles détectés dans un échantillon, tout type de cellules mélangé.  [...]

Le système immunitaire des femmes plus jeune que celui des hommes

Les auteurs, dirigés par Katsuiku Hirokawa, ont recruté 356 hommes et femmes japonais, âgés de 20 à 90 ans, à qui ils ont prélevé un échantillon de sang afin d'analyser les concentrations cellulaires. On le sait, le nombre total de globules blancs, les cellules de l' immunité, décroît au cours de la vie chez les deux sexes. On appelle cela l'immunosénescence.  [...] Mais au cours de la vie, leur taux diminue plus vite chez les hommes, si bien que l'avance masculine se trouve peu à peu comblée. D'autre part, à une échelle encore plus précise, les femmes font toujours mieux. les quantités de lymphocytes T CD4+ (médiateurs de la réponse immunitaire) et de cellules Natural Killer ou NK (destructrices de cellules malades) augmentent avec le temps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Q-CPCR encore !

Mais ma question est la suivante, après les résultats de Q-PCR, je trouve par exemple dans l'échantillon 1 le gène A exprimé 2 fois plus que l'autre, faut-il alors que je normalise par la quantité d'ARN total initiale ou cela n'est pas représentatif de l'expression.  [...] Donc en fait l'idéal serait que j'ai une idée du nombre de cellules présent dans mon échantillon pour pouvoir ramener ma quantité d'ARN total à un nombre de cellules pour vraiment voir ce phénomène de dilution.  [...]

Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

Je veux évaluer l'apoptose et la mort cellulaire de mes cellules suite à différents traitements, le nombre de cellules vivantes sera donc différent d'un échantillon à un autre.  [...] Donc il vaut mieux que je compte mes cellules dans chaque échantillon pour être sûre d'en avoir assez/pas trop pour chaque expérience.  [...]

[Immunologie] Conservation d'un échantillon de sang total avant centrifugation en vue de sérologie

Conservation d'un échantillon de sang total avant centrifugation en vue de sérologie.  [...] - Sachant que je compte faire les prélèvements sur tubes secs, combien de temps au minimum je dois laisser l'échantillon sanguin au repos avant de centrifuger afin d'obtenir un sérum de bonne qualité.  [...]

[Divers] Microorganismes et COT

J'aurais aimé savoir si quelqu'un pouvait me donner des relations existant entre la présence de microorganismes et la mesure de COT. J'avoue ne pas bien comprendre comment peut nous renseigner cette mesure sur les µorg.   [...] carbone organique total ou C.O.T.. dans un échantillon donné, désigne le total du carbone contenu ayant une origine organique (donc y compris le carbone des os, des tests ou des coquilles), les lipides, protéines, glucides, et les polluants industriels,  [...]

[Biochimie] Transfert western blot raté

Je souhaite induire une protéine à partir d'un système procaryote (en E.coli) grâce à l'IPTG. J'ai donc fait des tests d'inductions sur des petits volumes de culture (5ml). J'ai lysé mes bactéries puis déposé la fraction totale sur gel SDS-PAGE. Après coloration j'ai pu déterminer que ma protéine d'intérêt était induite (taille estimée 74 kDa).  [...] Sinon, la conductivité électrique methanol est meilleure que celle de l'ethanol. En général on préfère remplacer le methanol par de l'ethanol, mais pour les transferts, c'est pas forcément la meilleure idée. Ceci dit je ne pense pas que cela joue à ce point, et puisque vous avez déjà eu de bons résultats.   [...]

[Immunologie] Réarrangement des chaînes lourdes et légères

De l'ADN était isolé de trois sources. des cellules hépatiques, des cellules de lymphome pré-B et des cellules de myélome sécrétrices d'anticorps. Chaque échantillon d'ADN était digéré séparément avec les enzymes de restriction BamHI et EcoRI qui clivent l'ADN des chaînes lourdes et des chaînes légères º de la lignée germinale comme il est indiqué dans la partie (a) de la figure d'accompagnement. Les échantillons digérés étaient.  [...] radiomarquée avec les digestats d'EcoRI (blot #2). Les profils des blots sont décrits dans la partie (b) de la figure. En vous appuyant sur ces informations, quel échantillon d'ADN (appelé A, B ou C) était isolé (a) des cellules du foie, (b) des cellules de lymphome pré-B et (c) des plasmocytes sécréteurs d'IgM. Expliquez vos attributions.  [...]