• Santé - Techniques, ADN, Fragments

Mutagénèse insertionelle : gene-trapping

Dans quelques jours j'ai une présentation à faire sur les souris KO et donc je vais parler des techniques de mutation par insertion de fragments d'ADN exogènes dans un gène d'intérêt dans les cellules ES.  [...] Mais quand on utilise un vecteur plasmidique, comment peut se faire l'intégration Car pour les transfections stables classiques, on flanque notre séquence à insérer par des séquences homologues et le tour est joué, mais là, il n'y en a pas, et il ne peut pas y en avoir, donc.   [...]

[Biologie Moléculaire] Casser de l'ADN

Bonjour, je cherche differentes techniques pour casser un fragment d'ADN qui fait environ 1000 pdb en petits fragments de 20 pdb. Merci pour votre aide.  [...] en fait je voudrais casser l'ADN pour pouvoir ensuite l'analyser en spectrometrie de masse. L'idéal serait d'arriver à 20 pdb mais je pense que ma limite est 50-60 pdb. Je vais quand même essayer les techniques dont vous m'avez parlé.  [...]

[Biochimie] Bande inconnu sur gel d'agarose

C'est simplement de gros paquets d'ADN fragmentés (en beaux morceaux) qui rentrent dans le gel et vous font une bande. Vous avez mis combien de microgrammes dans le gel.  [...] En effet, tu as de longs fragments d'ADN qui migrent tous de la même façon. Dans l'absolu, ces fragments n'ont pas tous la même taille, mais puisque ils sont tous très long, ton gel n'est pas assez résolutif pour les séparer. Lorsque l'on veut séparer de longs fragments d'ADN, on a recours à des techniques d'électrophorèse en champ pulsé.  [...]

La PCR fragments d’adn

Mais lorsque que l'on dit que la police s'intéresse à l'adn Non codant, logiquement ce sont les des fragments d'adn Non codant qu'ils utilisent pour la méthode de la pcr (en suit l'electrophorèse).. sinon a quoi cela servirait de dire qu'ils s'intéressent uniquement à ce type d'adn.  [...] Et si on n'a pas de suspect Si on veut authentifier un individu à partir de traces de salives qu'il a laissées sur la scène de crime Il faut obligatoirement passer par un suspect Si le tueur est fiché au FAEG n'y a t'il pas de moyens techniques qui permettent de dire à partir de la migration des fragments de l'adn Prélevé de la Scène de crime que cela correspond à un tel individu par exemple.  [...]

replication

La primase synthétise des amorces d'ARN ( fragments d'Okasaki ). L'ADN pol 3 utilise ses fragments pour synthétiser l'ADN (ces fragments lui fournissent l'extrémité 5') et la pol 1 éliminera ces fragments et les remplacera par de l'ADN. Enfin, ces fragments d'ADN (qui remplacent les fragments d'Okasaki) seront lié au reste du brin par une ligase.  [...] Les fragments d'Okazaki sont l'ADN synthétisé à partir des armoces ARN. C'est après le passage de l'ADN-pol-1 qu'en effet la ligase va relier les fragments pour les unifier en un seul brin d'ADN. Les fragments d'Okazaki sont mixtes. ils contiennent encore l'amorce ARN mais surtout la séquence d'ADN complémentaire nouvellement synthétisé par complémentarité.  [...]

synthèse d'une amorce

En fait les entreprises qui synthétisent les amorces d'ADN le font par synthèse chimique. Si un jour tu as la chance d'avoir des cours de synthèse chimique (indispensable pour un biochimiste je trouve) tu verras que quand on synthétise une molécule en ajoutant des groupements, on peut faire des protections et déprotections.  [...] Après il ya une technique pour synthétiser les longs fragments d'ADN mais je te l'explique pas car tu voulais savoir les amorces, pas les longs fragments. Fais moi signe si tu veux que j'explique ça aussi.  [...]

Empreinte génétique : l'ADN | Dossier

Cette réaction permet d'amplifier spécifiquement (grâce à des morceaux d'ADN placés de part et d'autre de la séquence STR) les régions STR. Puisqu'elles n'ont pas la même taille, les fragments d'ADN amplifiés auront donc des tailles variables d'un individu à l'autre.  [...] Techniquement, trois ou quatre des STR sont colorés à l'aide de quatre fluorescences différentes. Les fragments d'ADN sont séparés selon leur taille et la fluorescence est lue par un laser. L' ordinateur lié au laser va alors produire des courbes dont les pics représentent les fragments d'ADN amplifiés et donc le polymorphisme, spécifique à chaque individu, et c'est cela qui est comparé grâce aux fichiers des empreintes génétiques (en France, le FNAEG ou fichier national automatisé des empreintes génétiques) ou à d'éventuels suspects qui ont subi des prélèvements buccaux (de salive).  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 12

coco, (si tu ne sais vraiment pas ce que c'est) le peignage moléculaire de l'adn est en gros une technique permettant d'obtenir des fragments linéaires et parallèles d'adn pour faciliter leur étude. On fixe l'un des bouts sur une lame spéciale puis l'on retire le liquide.  [...] En fait ce que tu vas voir (si ça fonctionne parce que c'est quand même relativement lourd et complexe comme technique), c'est. au centre un GAP noir (le tout début de la réplication dans lequel il n'y avait pas de marqueur rouge ou vert), ensuite tu vas voir 2 traits verts de part et d'autre du GAP (car la réplication est la plupart du temps bidirectionelle), puis 1 traits rouge derrière chaque traits verts ce qui correspondra au segment d'ADN répliqués pendant l'incubation avec le chloro DU marqué en rouge.  [...]

TPE sur l'ADN aide pour l'électrophorèse :)

L'électrophorèse consiste a faire migrer des fragments d'ADN dans un gel grace à un champs électrique. L'ADN étant chargé négativement les molécules vont se déplacer vers la cathode. Comme le gel, consiste en un maillage, les grandes molécules sont plus retenues que les petites.  [...] arrêtez moi si je me trompe mais il me semble qu'il faut généralement amplifier par PCR l'ADN (ou plutôt les fragments) avant de la soumettre a une électrophorèse non ou alors c'est uniquement le cas pour l'arn.  [...]

applications de la PCR

La detection de fragments d'ADN par PCR est certes tres utile et novateur (enfin 20 ans quand meme) mais ne represente qu'une infime partie de ce que cette technique permet.  [...] Mais en provoquer, non je ne vois pas. Etant donné que la PCR sert à amplifier un fragment d'ADN, il s'agit simplement d'obtenir à la fin une quantité beaucoup plus grande de l'ADN initial, donc par définition (et en dehors des amplifications parasites et des contaminations), on aura exactement le même ADN qu'au départ.  [...]