• Santé - Sonde, ADN, Signal

La longueur des télomères, garante de la viabilité des embryons ?

Cette technique utilise un morceau d'ADN couplé à une molécule fluorescente. Ces deux partenaires constituent la sonde, déposée sur les cellules d'intérêt. Grâce à la complémentarité de séquences, la sonde peut se fixer sur l'ADN cellulaire. A l'aide d'un laser, il est possible de quantifier précisément le signal fluorescent.  [...] plus le signal est fort, plus la quantité d'ADN qui s'est fixé est grande, et donc plus le télomère est long. Il est possible de corréler le signal à une longueur, mesurée en paires de bases (l'unité de l'ADN).  [...]

biologie moléculaire

connaisons que toutes les cellules d'un meme animal contiennent des génomes identiques, dans une expérience, un tissu composé de multiples types cellulaires est fixé et soumis à une hybridation avec une sonde d'ADN spécifique d'un géne particulier. à votre grande surprise, le signal d'hybridation est brin plus fort dans certaines cellules que dans autre, est ce quelqu'un peut me donner une explication détaillée.  [...] si ta sonde n'hybride que les ADN, ca pourrait représenter la différence d'accessibilité des gènes spottés, dans les cellules ou le signal est le plus fort on aurait un gène plus accessible qui suppose une plus forte expression.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme de signal southern

Je suis déséspérée. Voila bien 6 mois que j'essaye d'améliorer le signal de ma sonde ADN marquée pour la révélation de mes southern blot.  [...] J'utilise le kit de marque DIG Oligonucléotide 3'End Labeling de chez Roche, pour marquer une sonde ADN de 18 bases et le signal obtenu lors de mes manips est inutilisable. On voit bien qu'il ya de l'ADN mais ce n'est pas quantifiable.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN.  [...] Ma question est a propos du marquage directe et indirecte dune sonde ADN. Le prof nous a dit que le marquage indirecte est utilise pour amplifer le signal mais je n'ai pas compri pourquoi une necessité d'amplifier le signal.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation ADNc / ADNg : besoin de confirmer !

Jusque là tout vas bien. sur notre ADNg. on a bien deux sites de restrictions adjacents HindIII qui donnent un fragment de 0,3Kb et qui hybrident avec ma sonde H.  [...] D'après moi, cette expérience confirme mon hypothèse de présence d'un intron de 0,8Kb sur le fragment d'ADNg de 1,8Kb NcoI/NcoI. En effet, si on obtient deux bandes radioactives, c'est que notre fragment de 1,8Kb est coupé en deux par l'enzyme HindIII & la sonde N hybride avec ces deux fragments.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

Une sonde est une séquence d'acides nucléiques qui est complémentaire à un brin d'ADN mono-caténaire que tu souhaites marquer. C'est à dire que les bases nucléiques de la sonde et celle de ton ADN d'intérêt sont complémentaires. (par exemple, chaque fois qu'il y aura un C dans ton ADN, il y aura un G dans ta sonde, et inversement...).  [...] Cependant, si tu as marqué la sonde sonde, par exemple à l'aide d'une molécule fluorescente, tu peux alors la visualiser (avec un microscope à fluorescence par exemple). Par ailleurs, étant donné que la sonde est fixée sur ton ADN d'intérêt, le fait de visualiser ta sonde te permet de visualiser ton ADN.  [...]

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN !

Quelle est la différence entre une puce à ADN et sonde à ADN.  [...] Re. Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme avec ma PCR

Je dispose d'ADN dans lequel je dois amplifier un gene particulier. Disons A. Apres plusieurs PCR je n'ai aucun resultat. Alors que quand je transfert cet ADN sur membrane et que je fais une hybridation, j'ai des signaux. Ma sonde est le gene que je cherche mais amplifie avec un control positif.  [...] Si j'ai des signaux apres hybridation,c'est que dans mon ADN il ya une sequence homologue au gene A. Mais pourkoi avec la PCR je n'arrive pas a amplifier. Mon ADN est pur et l'amorce fonctionne bien puisqu'elle amplifie bien avec le control positif.  [...]

Terme en français pour "harvester fluorophore"

Lorsque la sonde n'est pas liée à l'ADN, le quencher bloque l'émission de la fluorescence (proximité des 2 extrémités). Lorsque la sonde se lie à l'ADN sb, les extrémités 5' et 3' s'éloignent, entrainant l'arrêt de l'inhibition. le fluorochrome receveur est excité par la lumière et transmet son énergie par FRET au fluorophore accepteur qui émet de la fluorescence dans une couleur spécifique (autre que celle du receveur).  [...] Il me semble qu'il n'y a que 2 fluorochromes sur la sonde. L'émetteur et le receveur (qui ici est un quencher), ce qui fait que quand la sonde est hybridée, l'émetteur n'est pas quenché donc signal.  [...]

gel shift : hhhheeeeelllp !!!!!!!

je suis en thèse et je travaille sur une proteine dont on voudrait confirmer l'interaction avec un promoteur d'un géne... je dois faire du gel shift mais dans mon labo on ne peut pas utiliser de radioactivité... j'ai vu qu'il existe des kits qui ne necessitent pas de radioactivité, il y en a même un ou il n'y a meme pas besoin de marquer la sonde d'ADN, il suffit de colorer le gel apres migration avec du SYbr green et du Sypro, cela a l'air tres pratique.  [...] g qd même encore une petite question...je sais qu'il faut faire des expériences de compétition sonde chaude/sonde froide pour tester la spécificité de l'interaction ADN/prot... s'il y a des aspécificités, est-ce dû au marquage de la sonde.  [...]