• Santé - Restrictions, Modifications, But, ADN, Bactérie

Système de restriction modification (RM) Bactérie - Phage

On m'explique que le système RM a deux fonctions restrictions et modifications et que ce système a pour but de couper l'ADN phagique qui est injecté dans une bactérie. Jusque là ca va j'ai compris. =).  [...] La bactérie effectue des méthylations spécifiques sur son propre ADN pour se protéger de son système de défense faisant intervenir l'endonucléase. Je pense que l'ADN exogène (celui d'un phage par exemple) possède déjà des méthylations (avant d'intégrer la bactérie) mais qui ne correspondent pas au modèle de méthylation de la bactérie.  [...]

Enzymes de restriction

Toutefois, comme rien n'est simple dans la relation hote/parasiste, certains phages codent eux même pour des systèmes restrictions/modifications (RM) afin d'empecher toutes infections secondaires par d'autres phages quand ils ont primo-infecté une bactérie.  [...] Ici on parle un peu du même système qu'avant, mais au niveau du phage. Lorqu'un phage infecte une bactérie, il veut éviter qu'un autre phage infecte cette meme bactérie (coinfection) pour cela il utilise le système de restriction/modification. Ainsi l'ADN du deuxième phage entré sera clivé s'il n'a pas les bonnes modifications.  [...]

[Génétique] Question qui me tracasse beaucoup ( information génétique )

L'ADN recombinant le but est de prendre un gène (ou une version-. allèle) et de le multiplier afin de pouvoir dans un second temps travailler dessus (séquencage par exemple). Donc à l'aide d'enzymes de restrictions qui reconnaisses certains sites (suite de nucléotides) on va couper le plasmide afin d'insérer notre gène.  [...] Il faudra bien choisir les enzymes de restrictions selon le plasmide mais également leurs séquences (par rapport à notre gène) car on va l'insérer grâce à la complémentarité des bases.  [...]

[Biologie Moléculaire] clonage pCR sequnsage

je ne sais pas quand est ce on utilise les enzymes de restrictions sur la totalité de l adn pour obtnir des fragements quand va cloner dans un vcteur (bacteri par exmpl) et quand est ce que on cherche un seul fragements d adn pour le clonr et comment on procede pour le chrcher.  [...] on dit qu on utilise la PCR dans le clonag dans qu el niveau et on multiplie quoi on sit que le promotur du vecteur va faire la multiplication t l 'expression d tous l adn rcombinant donc a quoi sert la PCR et l sequensage quand st que on l utilise avant ou aprs clonage.  [...]

[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

Les virus utilise couramment des modifications chimiques de leurs acides nucléïque. Par exemple les bactériophages apparenté à T4 modifient leurs cytosines en hydroxymethylcytosine (HMC) pour se protéger des systèmes de restrictions de leurs hôtes. Beaucoup de virus Eucaryotes codent pour des fonctions de méthylation de leurs bases, toujours pour se protéger des enzymes de restriction des cellules.  [...] Non, en fait, les systèmes de restriction/modification existent chez les Bactéries, les Archéobactéries et chez plein d'élément génétiques mobiles types virus ou plasmides. On en a pas encore trouvé, a ma connaissance, chez les Eucaryotes (mais ca pourrait changer).  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

Bonjour, merci. Oui bien entendu je sais ce qu'est une enzyme de restriction. Une enzyme de restriction reconnait un site de restriction généralement palindromique sur l'ADN une fois reconnu elle clive. Alors j'utilise un ADN de phage lambda c'est de l'ADN circulaire il me semble mais qu'elle est le rapport avec la migration et oui je sais aussi c'est quoi l'électrophorèse sur gel d'agarose c'est la migration de fragments d'ADN ( dans mon cas) du fait qu'on exerce un champs électrique l'ADN étant chargé négativement va migré du coté positive au niveau de la matrice d'agarose les fragments les plus courts migreront plus vite et plus rapidement mais sa m'aide pas pour l'analyse car on a des bandes linéaire et non pas circulaire.  [...] Et ensuite en comparant les profils de restrictions de chaque enzyme et des combinaisons de plusieurs enzyme tu peux déduire comment les sites de restrictions se trouvent les uns par rapport aux autres sur ton ADN de phage du départ.  [...]

Pharmacovigilance : une nouvelle liste des médicaments surveillés

Depuis le mois de janvier, douze autres ont été soumis à une réévaluation de la relation bénéfice/risque qui a conduit à plusieurs décisions de sécurité sanitaire. Multaq, Vastarel, Trivastal, Nexen, Ferrisat, furantoïne, Hexaquine, Protelos, Alli et Xenical.   [...] L'Afssaps précise également que douze médicaments psychotropes ont été soumis à un plan spécifique de surveillance. Cette procédure a entraîné pour certains des restrictions d'utilisation ou des modifications de présentation.  [...]

TPE sur l'ADN aide pour l'électrophorèse :)

Tu utilises des enzymes de restrictions (endo ou exonucléases) qui vont te faire pleins de petits bouts d'ADN. Tu vas faire migrer ces fragments d'adn sur membrane (électrophorèse) et tu vas avoir ce qu'on appelle un profil de migration électrophorétique.  [...] D'ailleurs nous nous sommes entrainées à le faire sur des protéines mais le rendu est le même, dans le cas du principe je veux dire. Les seules 10 minutes que nous avons ne nous permettent pas de faire de PCR d'ailleurs je suis absolument sûre que notre lycée n'est pas équipé du matériel, nous allons en expliquer le principe bien sûr et se concentrer sur l'électrophorèse puisqu'il s'agit de la partie cruciale de l'identification.   [...]

[Biologie Moléculaire] Comment séquencer un génome inconnu ?

J'ai pensé pour séquencer d'extraire l'ADN de l'organisme puis de digérer celui-ci avec des enzymes de restrictions. J'obtiens ainsi différents fragments dont les quelques nucléotides aux extrémités sont connus grâce aux sites de restrictions. Est-il possible alors d'y hybrider de façon spécifiques des sondes pour permettre un séquençage avec la méthode de Sanger par exemple (car les sondes sont plutôt longue par rapport aux sites de restriction non ).  [...] De nos jours, on ferait du séquençage haut débit. fragmentation de l'ADN et ajout d'adaptateurs connus aux extrémités pour faire en parallèle des millions de reads qui peuvent être alignés entre eux par chevauchement (contigs).  [...]

[Biochimie] Vecteur d'expression pour une proteine recombinante

- Et il faut au moins 2 sites de restrictions situés entre un promoteur et un terminateur permettant ainsi d'inserer l'ADN recombinant.  [...] Pour ta dernière question, il faut bien sur faire sauter le stop de la stathmine. Il y a plusieurs options. soit tu as un site de restriction bien placé, soit tu places la GFP après et tu modifie le codon stop en mutagénèse dirigée. Truc capital. les ADN codants pour ces deux protéines doivent être insérées dans le vecteur EN PHASE.  [...]