• Santé - Restrictions, Enzyme, Fragments, ADN

[Biologie Moléculaire] l'hybridation ADN/ADN "les différent méthodes???"

Salut, il y a one méthode qui s'appelle MLST (multi locus sequence typing) qui pourrait peut etre t'aider. Je ne l'ai jamais utilisé personellement mais je connais des gens qui s'en sont servis pour différencié deux souches de streptocoques (une porcine et une humaine).   [...] Il y a aussi la technique du RFLP. il s'agit de comparer des profils de restrictions par une enzyme à faible fréquence de coupures suivi d'une électrophorèse particulière car il s'agit de distinguer de très gros fragments d'ADN génomiques (électrophorèse en champ pulsé).  [...]

[Biologie Moléculaire] enzyme de restriction pourquoi elle ne clive pas tout les ADNs ?

j'ai une question pourquoi les enzymes de restrictions ne clive pas tout les ADNs par exemple HindIII ne clive pas l'ADN d'une cellule du foie humaine alors que pour l'ADN de phage lambda elle le clive en libérant plusieurs fragments comment ce la ce fait il.  [...] Tu sais que les enzymes de restriction ne clivent que si elles reconnaissent un site spécifique. S'il n'y a pas coupure, cela peut être à cause de deux raisons.  [...]

Enzymes de restriction

Bonsoir, lorsque l'on veut étudier les ARN ribosomaux, ou d'autres séquences, pourquoi utilise t-on plusieurs enzymes de restrictions Je sais que chaque enzyme a un site de restriction spécifique mais je n'arrive pas à comprendre l'utilité de cette technique.  [...] On étudie l'ADN 16s par PCR, puis électrophorèses des fragments d'ADN obtenus grâce aux enzymes. On a alors les résultats de l'électrophorèse (pour une bactérie) avec différentes enzymes de restrictions. Puis on nous demande l'intérêt de la technique puis pourquoi il est intéressant d'en utiliser plusieurs.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marqueurs dominants et codominants

l'enzyme de restriction coupe au niveu du site de restriction et doit générer 2 fragments de restrictions pour le homozygotes et les hétérozygotes.  [...] on sait qu'une sonde s'hybride avec le fragment d'ADN possédant une séquence complémentaire à la sienne, par établissement des ponts hydrogène. (dans le cas des RFLP par exemple) comment est ce que certains allèles sont visible et d'autre non.  [...]

[Génétique] Rflp

1) -. sur le chromosome, un frgament de restriction est-ce bien un fragment entre deux sites de restrictions ( la ou les enzymes de restrictions peuvent couper l 'adn ).  [...] Le principe est alors de digérer l'ADN, afin d'obtenir des fragments puis de les faire migrer. Si il y a une différence, elle se manifestera par la modification de la longueur d'un fragment, ou bien un fragment supplémentaire, ou bien un en moins, en tout cas une modification du profil de restriction.  [...]

TP biochimie: introduction aux méthodes utilisées en génie génétique

Après pour la carte plasmidique si tu sais par quelle enzyme tu fragmentes tes séquences je penses que tu peux retrouver la taille des fragments. Car si la carte plasmidique est comme une carte de génome généralement tu as des sites de restrictions dessus.  [...] Donc à partir de là tu peux calculer les différents fragments obtenus après clivage de l'enzyme. De plus tu as des fragments de taille différente notamment un ADN linéarisé je pense que c'est peut-être aussi pour voir quel taille d'ADN exogène est capable d'incorporer une bactérie transformante.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Pour les enzymes de restrictions, on sait qu'elles sont les séquences qu'elles reconnaissent. Pas forcément celle qu'elle coupe. Il y a une petite nuance, mais qui existe, certaine enzyme de restriction étant capable de couper l'ADN à plusieurs dizaines paires de bases de leur lieu de reconnaissance.  [...] Généralement, lorsque l'on utilise une enzyme de restriction commune, on ne parle pas d'où elle coupe (car elle peut aussi des fois ce tromper) mais à quelle fréquences elle coupe en moyenne. Tout les 200pb Ou toute les 4000pb C'est surtout ceci qui est regardé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Identification d'un gène déterminé

j'imagine qu'il faut découpé ce gène dans la bactérie 1, à l'aide d'enzyme de restriction, puis dans le PCR ajoutez ajouté des. ddatp, ddttp, ddctp, ddgtp fluorescent afin de pouvoir avoir une séquence de ce gène contenue dans la bactérie 2, si la bactérie 2 à ce gène.  [...] On veut vérifier si cette séquence se trouve dans ADN 2 donc, il faut que cette séquence soit le primer de l'ADN 2 lors du PCR à l'aide d'enzyme de restriction on va découper ce qu'il y'a autour pour n'avoir que la séquence ( je ne sais pas si il existe des enzymes de restrictions qui peuvent découper cette suite, mais là ce n'est qu'un exemple).  [...]

[Evolution] Utilité des virus ?

Il y a une utilité de chaque être vivant dans un système symbiotique ou dans un écosystème, où dans ce dernier on a les prédateurs qui limitent la prolifération des proies, les proies qui servent à nourrir les prédateurs...Les virus sont des parasites stricts puisqu'ils détournent la machinerie de la cellule à leur profit.   [...] Il explique que durant le monde à ARN par définition les virus et leur hôtes avaient un génomes à ARN, les hôtes de ces virus avaient sélectionné des mécanismes de défense permettant de reconnaitre le génomes virale ( enzyme de restrictions...) L'apparition d'un génome à ADN chez un virus aurait alors été un avantage sélectif extraordinaire qui aurait été sélectionné puis par la suite les hôtes aurait récupérer l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mutagénèse dirigée qui ne fonctionne pas

L'idée maintenant c'est d'amplifier un fragment plus court (environ 3Kb) compris entre deux sites de restriction uniques (mais toujours autour de la zone qui m'intéresse bien entendue). Donc pour cela je design 2 paires d'oligos et réalise 3 PCR successives.  [...] La plus part des enzymes de restrictions ont besoin de quelques bases de part et d'autre du site pour se fixer a l'ADN si ton site est exactement a l'extremité de l'ADN beaucoup d'enzyme ne couperont pas du tout. ca va etre super galere.  [...]