• Santé - Question, Amorces, ADN

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

Il y a certaines choses qui me paraissent peu claires dans cette partie. Quand il est écrit elle retire les bases dans le sens 5'3' les bases dont il est question sont bien celles de l'amorce d'ADN (réplication terminée) Car d'après ce que je sais si cette enzyme a une fonction exonucléase 5'3' c'est qu'elle permet de dégrader les amorces d'ARN et de les rendre en amorces d'ADN, le champ d'action de cette enzyme est donc avant la réplication puisque les amorces après la réplication ne sont plus d'ARN mais d'ADN.  [...] En plus clair la dernière question correspond au fait que dans la synthèse d'ADN chez les procaryotes l'exonucléase 5'3' n'a que la fonction de dégrader les amorces d'ARN et c'est l'ADN pol I qui les synthétisent en amorces d'ADN (d'après mon cours), donc ce que je voudrais savoir si en fait ma pensée est juste.  [...]

[Biologie Moléculaire] Différences entre les types de Taq ?

une autre question SVP comment je peux interpréter le gel d'électrophorèse losque la PCR n'a pas marcher c a dire quant je dis qu'il s'agit d'un excès d'amorces ou d'ADN ou mgcl2.  [...] Concernant ta question sur le MgCl2, la concentration est en relation avec le Tm et la force de liaison entre les différentes molécules d'ADN présentes dans ton tube.  [...]

[Biologie Moléculaire] Bandes d'ADN non amplifié??

J'ai effectué une PCR certaines amorces ont été révélées incompatibles chez certaines souches, cependant seul quelques souches montrent après analyse sur gel des amplifiats des bandes correspondant à l'ADN (vérifié par la taille correspondant à celle de l'ADN mis au départ), ma question est pourquoi cette bandes n'apparait pas chez les autres souches.  [...] Merci d'abord pour ta réponse, c'est vrai que l'amorce est incompatible, c'est une possibilité, c'était une RAPD, il s'agit d'ADN total extrait, et le problème c que d'autres souches sont négatives sans monter cette bande d'ADN.  [...]

[Biochimie] Rt-pcr

j'ai plusieurs question concernant la RT-PCR. Est ce que la RT et la PCR ce font dans le même tube. Sur un genome procaryote constutuer d'ORF, faut il utiliser deux amorces spécifique de la region que l'ont souahite amplifier Ces amorces sont elles les meme pour la RT que pour la PCR La PCR peut elle se faire avec juste le cDNA synthétiser ou bien il faut faire les 2 brins d'ADN.  [...] Merci de vos reponse car la je galére un peu sur ma publication.   [...]

[Microbiologie] Viabilité d'une bactérie et ARN

Toujours dans le même domaine j'ai une petite question. pour amplifier un ARNm, est-ce qu'on peut utiliser les mêmes amorces que celles utilisées pour amplifier l'ADN correspondant. Je pense que oui, mais j'aimerais avoir confirmation.  [...] En ce qui concerne les amorces en effet ce sont les memes qui sont utilisées pour amplifier l'ARNm et l'ADN. si tu es chez un eukaryote, alors tu les choisis de part et d'autre d'un intron, comme ca en fonction de la taille tu es certain de ne regarder que l'ARNm (a cause de l'épissage).  [...]

réplication d'ADN

Je ne comprend pas ta question, parle tu des éliminations des amorces ARN Si c'est le cas toujours la même chose. polymérase et tu rajoute une ligase pour relier le nouveau bout d'ADN synthétiser à l'éxtremité 5' du suivant. Tu peut chercher des schémas sur internet ce sera plus facile à comprendre pour toi.  [...] La synthèse ne se déroule que dans un sens 5'-. 3'.L'ADN polymérase ne revient pas en arrière elle est recruté après celle qui a formé les brin néo synthétiser. Il y a juste une ADN ligase qui intervient pour fixer le 3' final au 5' du bout suivants. Je n'ai pas le droit de divulguer les schéma mon cours désolée, mais peut-être que quelqu'un d'autre qui est dans une autre filière le fera sur le forum. Bonne soirée.  [...]

[Microbiologie] banque génomique

triction Eco RI, Eco RV et Pst I. le plasmide ou vecteur d'expression (pBlueScript) a été également traité par les mêmes enzymes. lig+transformation+criblage par pcr. je suis arrivée au séquençage. mon encadreur qui a vu la sé-.   [...] quence obtenue m'a informé que j'ai effectué une erreur lors de la digestion enzymatique. Je ne suis pas d'accord avec elle parce que je me suis dit que les amorces que j'ai pris sont spécifiqUES DU Gène Mm14 de la souche en question, mais je me suis dit que c'est en rapport avec le clone recombinant que j'ai obtenu (ADN digéré par Eco RV).  [...]

Amorces-Replication-Trnscripton

Bonsoir, petite question assez simple. pourquoi alors que lors de la replication il y a nécessité d'une amorce ribonucléotidique (d'ailleurs pourquoi n'est-elle pas desxyribonucleotidique) alors que lors de la transcription la situation est presque la meme puisque l'on a nos 2 brins d'adn qui n'ont pas d'extremités 3'OH libre non plus et là il n'y a pas besoin d'amorce.  [...] autre question en pensant à la replication. comment alors que l'ADN pol delta polymérise sans arréter peut il revenir sur ses pas pour sythetiser le brin complementaire suite au passage des RNAses H et MF1 qui ont supprimées les amorces.  [...]

[Génétique] ARN ou ADN amorce

Je t'avoue que je ne m'étais jamais posé cette question. Si l'amorce est ARN, effectivement on se retrouve avec un amplicon hybride. Néanmoins, la taille de la séquence amplifiée est quand même généralement très supérieure à celle des amorces, donc on est majoritairement en présence d'ADN.  [...] Chacune des amorces utilisées est intégrée dès le départ dans son brin néoformé respectif (ça tu peux l'observer sur n'importe quel schéma classique représentant une PCR), et il n'y a pas de ligation (je ne vois pas trop ce que tu demandes sur ce point ).  [...]

Question biomoléculaire: Replication de l'ADN: amorce ARN

Il n'y a pas de transcriptase inverse à ma connaissance du coup pour ta dernière question je vais mettre pour l'un et l'autre comment sont remplacer les amorces par de l'ADN.  [...] Les amorces d'ARN sont fabriqués par une primase (=DnaG) puis dégrader par l'ADN pol I (c'est son activité nucléase qui lui permet) et remplacé par celle ci par son activité polymérase.  [...]