• Santé - Protocole, Différent, Cellules

[Biologie Cellulaire] Immunomarquage sur cellules vivantes

J'ai transfecté des cellules COS avec les deux sous-unités du récepteur GABAB, dont l'une possède un tag GFP et l'autre un tag HA. Je voudrais observer mes cellules en vidéo-microscopie, l'intérêt est donc qu'elles soient vivantes. Il faut donc que je réalise un immunomarquage pour que le tag HA soit visible en fluo.  [...] Savez vous si le protocole est différent à cause du fait que les cellules soient vivantes.  [...]

[Biologie Cellulaire] cultures cellulaires primaires

Ensuite, un schéma de protocole de culture, ce n'est pas assez précis. Cela dépend encore des cellules, certaines sont adhérentes d'autres surnageantes par exemple et pour chacun de ces cas le protocole sera différent.  [...] C'est à dire que oui, j'en fais tous les jours de la culture primaire de cellules humaines. Après, le protocole de culture ne varie pas par rapport à la culture de lignées.  [...]

[Biochimie] extraction protéines membranaires à partir de tissu cérébral congelé (pour étude de co-IPP)

Le NP40 est trop un détergent trop doux pour moi si tu veux détruire tes membranes. Je travaille sur des cellules en culture donc mon protocole sera légèrement différent, mais si j'étais toi j'essaierais tampon un tampon de lyse 1% NP40 et 1% SDS (il y d'autre composant mais je n'ai pas la liste sous les yeux, je pourrais te dire ça plus tard si tu y tiens).  [...] Merci de ta réponse. ok je veux bien le protocole quand tu l'auras =) EN reveanche je travaille sur des petites zones de cerveau congelé (1 à 2 mg en tube Eppendorf 1,7 mL), donc je ne pense pas avoir besoin de soniquer, qu'en penses -tu sinon, as-tu un protocole de coIPP j'en ai déjà mais j'aimerais en tester plusieurs, donc je mets toutes les chances de mon côté.  [...]

Mal de dos : des cellules souches pour réparer un disque intervertébral

Comment alors les remplacer par des cellules fonctionnelles Les chercheurs se sont intéressés au tissu adipeux qui constitue un grand réservoir de cellules souches capables de se différencier dans une vaste gamme de types cellulaires. Encore fallait-il trouver le bon protocole pour réussir à ce que des cellules souches du tissu adipeux puissent se transformer en cellules du noyau pulpeux.  [...] Ce dispositif est celui qui se rapproche le plus d'une transplantation intradiscale chez l'Homme. Nous avons démontré que le protocole que nous appliquons à ces cellules était suffisant pour qu'elles conservent leur activité sécrétoire spécifique et leur phénotype spécialisé une fois réinjectées in vivo.  [...]

[Biochimie] TP: Cellules chlorophyliennes

Salut, voici l'intitulé de mon TP. Pour suivre le développement de cellules d'Euglénes (algues unicellulaires), on les mets en culture, dans des millieux différents et on les expose au méme éclairement pendant 5jours.  [...] 1)Concevez un protocole pour montrer que les cellules chlorophyliennes n'ont besoin que de molécules minérales (et d'eau). Présentez la composition de vos différents tubes a essai dans un tableau.  [...]

Transfection cellules Jurk 4

Je souhaiterai transfecter des cellules Jurk 4 avec différentes constructions dans le vecteur PXM139. Si possible par electroporation. Est-ce possible Si oui, quelqu'un pourrait-il me fournir un protocole.  [...] Si vous avez un électroporateur, normalement ils fournissent un liste de protocoles préinstalés dans la machine, ou alors des séquences électriques à respecter pour chaque lignée cellulaire.  [...]

[Biologie moléculaire] Protocole électroporation cellules mammifères

[Biologie moléculaire] Protocole électroporation cellules mammifères.  [...] Je suis à la recherche d'un protocole efficace d'électroporation de cellules de mammifères (plus particulièrement des cellules de type murine C2C12).  [...]

[Biotechnologie] Culture cellulaire animale

Nous sommes trois merveilleux étudiants et nous sommes à la recherche d'un protocole pour tester les effets potentiels anti-cancéreux d'un phytomolécule sur une lignée de cellules cancéreuses animales. En somme, il ne nous faut que la technique d'exposition du produit ainsi que la concentration.  [...] Alors voila le probleme. le travail a faire est theorique, il ne faut qu'adapter un protocole deja existant a notre problematique. Nous avons un extrait de plante (california poppy), cependant on sait deja que cette plante n'a aucun effet anti cancereux. Les cellules utilisées sont celles qu'on veut, ca na pas bcp d'importance ( nous avons choisi des cellules cancereuses pulmonaires).  [...]

[Microbiologie] Protocole Comptage nombre de cellules de Saccharomyces cerevisiae

Protocole Comptage nombre de cellules de Saccharomyces cerevisiae.  [...] Je travaille dans une usine de production d'éthanol à partir de mélasse en utilisant la levure S. cerevisiae. Le mout (mélange d'eau et de mélasse) qu'on utilise est assez concentré (entre 8 et 12% de Brix). Et je voudrais commencer à faire le comptage du nombre de cellules de levure à differentes phases de la production mais je ne sais pas comment procéder.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage à l'iodure de propidium pour suivi du cycle cellulaire

Je voudrais réaliser des expériences de cycle cellulaire, mais il existe trop de protocoles différents. J'ai vraiment besoin d'aide, mais surtout d'éclaircissements.  [...] - J'ai déjà fait un test avec la drogue qui m'intéresse, sachant qu'à la dose max que j'utilise, à t=24h, en TMRM j'ai 100% d'apoptose, mais en PI j'ai 30% uniquement. Je me doute bien qu'on doit observer moins de cellules apoptotiques dans le cas du marquage au PI (même si je ne sais pas trop pourquoi), mais de là à avoir une si grande différence, je pense que mon protocole n'est pas au point.  [...]