• Santé - Protéine, Western, Démonstration

[Biologie Cellulaire] poly-ADP-ribosylation de protéines

L'anticorps anti-PAR est une bonne alternative même si cela reste une démonstration indirecte de la PAR de ta protéine. Dans ce cas, je ferais une IP anti-ta protéine suivie d'un western blot anti-PAR pour démontrer qu'elle est PARée.  [...] Comment souhaites-tu inhiber les PARP Inhibiteur ou siRNA Dans ce cas, une condition sans inhibiteur/siRNA et une avec inhibiteur/siRNA avec IP anti-ta protéine et western blot anti-PAR et la démonstration sera correcte, je trouve, au niveau fonctionnel. Peut-être que dans les publications cela leur suffit comme manip, mais il serait plus rassurant d'ajouter un marquage métabolique et/ou une spectrométrie de masse dans la mesure du possible (collaboration avec une plate-forme ou un labo intéressé...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Gènes homéotiques - Page 2

D'apres les auteurs, il n'y avait que des suspicions mais pas de demonstration claire (il y a 2 ans de cela). Ils ont fait exprimer chez la levure une proteine transmembranaire recombinante ciblee dans le reticulum endoplasmique (qui est continue avec la membrane nucleaire) avec l'idee que cette proteine va a un moment passer dans le noyau et une partie de la proteine va faire face a l'interieur du noyau.  [...] Et en effet qu'est ce qui régule le cycle cellulaire... je pensais que c'était la concentrations en certaines molécules, protéines sans doute (les cyclines), qui au delà d'un certain seuil étaient responsables de la division cellulaire... mais alors seul le temps entre en jeu.  [...]

Protocole

Si tu as une augmentation de LHS phosphorylée en western blot tu dois aussi t'assurer que ce n'est pas dû au fait que tu aurais pris plus de protéines d'une condition à une autre, comment ferais-tu pour le vérifier.  [...] De plus en western blot tu peux avoir plus de LHS phosphorylée mais ça ne suffit pas pour avoir une bonne démonstration. Il faut montrer que cette plus grande quantité de LHS phosphorylée est due à une plus grande activité de la LHS et non pas à une plus grande expression de la LHS.  [...]

Le gène de l'odeur de la terre

Un an après avoir fini le séquençage de son génome avec l'aide du Wellcome Trust Sanger Centre de Cambridge, et pour faciliter son étude, les scientifiques du JIC ont développé un mécanisme d'inactivation des gènes chez cette bactérie en utilisant la bibliothèque de cosmides utilisée pour le séquençage.   [...] L'identification du gène, sco6073 (cyc2), responsable de l'odeur de la terre n'est qu'une application de cette technique et la démonstration de son efficacité pour identifier la fonction et le fonctionnement des quelques 8 000 genes de la bactérie Cyc2 code pour une proteine dotée de deux domaines de synthèse des sesquiterpenes.  [...]

Cancer : une réaction en chaîne à l'origine des tumeurs

On sait que la protéine p53, impliquée dans la moitié des tumeurs, est régulée par un autre polypeptide, Mdm2. Dans cette réaction en chaîne s, la protéine kinase ATM joue un rôle essentiel, comme le démontrent des chercheurs de l'Inserm. Ces travaux pourraient aboutir sur une piste thérapeutique prometteuse.  [...] Pour réaliser cette démonstration, les chercheurs ont remonté la cascade d'événements qui déclenchent l'activation de p53. L'activation de Mdm2 est due à sa phosphorylation par la protéine kinase ATM, elle-même activée en cas de stress cellulaire. Cette phosphorylation de Mdm2 est cruciale pour passer d'un état de régulateur négatif à régulateur positif de p53 et favoriser ainsi son interaction avec l'ARNm de p53 pour induire sa traduction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Phosphorylation sur tyrosine => dégradation par protéasome???

... Pour moi, in vivo, il peut y avoir beaucoup de problème de faux positifs aussi (séquence consensus de phosphorylations commune à plusieurs kinases en particulier). Le mieux resterais une démonstration par siRNA, avec absence de la phosphorylation dans ce cas.  [...] La démonstration qu'une protéine est phosphorylée, doit s'appuyer sur un ensemble de manipes qui vont dans le même sens. Ces manipes doivent être réalisées dans des systèmes différents avec des techniques et des tactiques d'approches différentes de sorte qu'en regroupant l'ensemble des résultats on puisse affirmer que la protéine en question est phosphorylée, mais ceci est valable pour n'importe quelle question scientifique.  [...]

monde ARN avant ADN

La démonstration que l'étape clé de la formation de la liaison peptidique au cours de la biosynthèse des protéines est réalisée par catalyse de l'ARN sans intervention quelconque d'un acide aminé confirme l'existence probable d'un monde d'ARN ancestral de même que la découverte des mimivirus à ADN, macrovirus possédant des gènes communs à tous les organismes des trois branches du vivant, eucaryotes, bactéries et archées et qui pourraient être les descendants d'un monde viral ancestral.  [...] 2) La démonstration que l'étape clé de la formation de la liaison peptidique au cours de la biosynthèse des protéines est réalisée par catalyse de l'ARN sans intervention quelconque d'un acide aminé confirme l'existence probable d'un monde d'ARN ancestral, référence à la découverte annoncée en 2000 que le ribosome est un ribozyme.  [...]

Du noir au blanc, ou comment changer la couleur du pelage de souris

Dans ce nouveau travail publié dans Cell Report, les scientifiques de l' Inserm et du CNRS ont tenté de comprendre comment les mélanocytes fonctionnaient de manière normale pour cerner ensuite leur implication précise dans le cancer. Ils ont pour cela supprimé tour à tour l'expression de la protéine B-Raf, puis celle d'une protéine de la même famille, C-Raf, chez des souris au pelage noir (idéal pour bien voir les changements de pigmentation ).  [...] Pour Alain Eychène, il s'agit de la première démonstration in vivo du rôle des protéines Raf dans l'autorenouvellement de cellules souches normales.  [...]

[Divers] phenylcetonurie

expliquer comment la diversite des proteines permet de comprendre l'implication de ces molecules dans la realisation des phenotypes aux echelles moleculaire cellulaire et macroscopique.vous appuierez votre demonstration sur l'exemple de la phenylcetonurie.  [...] D'abbord il faut que tu cherches les définitions exactes des termes scientifiques du sujet. phénotype, molécules, protéines... Il est cruciale de bien comprendre l'énoncé de ton exposé afin de coller le plus possible au sujet.  [...]

la dangerosité des téléphones portables

Après avoir chercher parmi 580 proteines présentes dans la peau, il on trouvé deux protéines altérées, une ayant augmenté de 89% et l'autre ayant baissé de 32% et cela sans augmentation de la température locale.  [...] Si maintenant l'idée est de faire un lien entre les protéines altérées et les cellules, cela supposerait une modification de l'ADN...or le lien est évidemment impossible à prouver à partir de cette démonstration.  [...]