• Santé - Protéine, Substrat, Mélange, Rapport

[Biologie Moléculaire] Lysats réticulocytes???

En fait je me pose cette question car serait il possible si in vivo (chez l'homme par ex) une protéine induisent l'augmentation de la stabilité et que cette augmentation soit également présente lors de la mise en commun des systèmes de lysats de réticulocytes donc un à traduit une prot et l'autre l'autre prot.  [...] Je trouve au final plus de quantité de la protéine supposée substrat dans les fractions initiales où j'avais mélangé mes deux fractions d'ivt que par rapport au contrôle où je mets qu'une seule fraction d'ivt. Que dois je en penser.  [...]

[Biochimie] Confirmation (ou pas) activités enzymatiques

-Après je dois passer en moles/min/mg de protéines dans l'homogénat. Je reprends donc la formule exprimée en moles/min/mL d'homogénat et je divise par la concentration en prot/mL d'homogénat (donnée acquise par dosage de prot).  [...] Pour le point qui me pose problème je n'arrive vraiment pas à être fixé si l'activité de deux mélanges aux mêmes proportions sera différents ou non, et si le fait de prendre une fraction d'un mélange modifie l'activité de la fraction prélevée. J'ai l'impression que si on rapport les activités des deux mélanges /mL elle sera la même mais que les activités brutes c'est à dire les quantités de substrat consommées en un même temps par un litre ou un mL de mélanges ne seront forcément pas égales.  [...]

Généralités sur la protéine Kinase C | Dossier

Quelques cas de sélectivité ont pu être montrés. La protéine MARCKS (myristoylated alanine-rich C-kinase substrate) est un substrat ubiquitaire de la [PKC ] dans toutes les cellules, or elle est phosphorylable par toutes les isoformes à l'exception de la [PKC ] &zeta. (Uberall F. et al., 1997).  [...] La [protéine kinase C ], dans sa conformation activée, peut se lier à ces protéines d'ancrage lui permettant ainsi d'atteindre le substrat approprié. D'autres protéines d'ancrage sont connues. ZIP (zeta-interacting protein) spécifique du domaine régulateur de l'isoforme &zeta.  [...]

[Biochimie] Interaction kinase / substrat

Quel type d'interaction prédomine dans la reconnaissance de ce substrat*par la protéine kinase Quels acides aminés de la séquence seraient alors impliqués*.  [...] Le site actif de la protéine kinase contient plusieurs de ces acides aminés. Pour identifier ceux qui sont impliqués dans l'interaction, vous décidez de les muter par un autre acide aminé. Proposez deux acides aminés (avec leur structure) qui ne pourraient plus interagir, mais qui seraient d'un point de vue structural pas trop différent pour ne pas changer la structure de la protéine kinase.  [...]

Vecteur de clonage, PCR et vecteur d'expression

Je ne voulais pas dire que c'etait specifique d'une enzyme mais qu'on pouvait utiliser l'enzyme comme proteine liée au DB et le substrat lié au AD.  [...] Je pense surtout que tu utilises le mauvait vocabulaire. un substrat est une petite molecule qui est modifiée par l'enzyme. dans quelques cas le substrat peut etre une autre proteine, mais on n'utilise pas le double hybride pour etudier cela.  [...]

[Divers] enzymologie aide

un extret cellulaire contient 200mg de proteine et 20ug de ce extrait catalysent la transformation de 0.95 umol de substrat en 5mn.  [...] la fraction précipité contient 40mg de proteine et 20ug de cette fraction catalysent la transformation de 2.3 umol de substrat en 2 mn.  [...]

[évolution] Théorie de l'évolution et Régression des organes inutiles

Enfin, nous avons la sélection, qui contrairement à la dérive et à la mutation est quelque chose qui peut être plus directionnel. dans une population, les individus possédant les caractères les plus adaptés aux conditions de vie dans lesquels ils sont vont plus se reproduire et mieux survivre, transmettant ainsi leurs caractères de façon plus importante aux générations suivantes (par rapport à ceux possédant des caractères moins adaptés).  [...] Maintenant cette vision des mutations me semble bien reductrices, diminuer l'affinite d'une proteine pour son substrat peut etre assimiler a une destruction, mais cela peut etre aussi vu comme la possibilite de reagir avec une gamme de substrat plus large.  [...]

La méthodologie BRET | Dossier

La GFP est fusionnée à l'autre protéine d'intérêt (protéine B), susceptible d'interagir avec la protéine B. La luciférase est excitée à l'aide d'un substrat qui pénètre dans la cellule (coelenterazine). Si les deux protéines n'interagissent pas, on ne détecte que le signal émis par la luciférase à 480 nm.  [...] Si les deux protéines interagissent, il y a transfert d'énergie entre la luciférase et la GFP et l'on peut mesurer un signal supplémentaire émis par la GFP à 530 nm. Le transfert d'énergie reflète une interaction physique étroite. pour qu'il y ait transfert d'énergie, la distance entre la luciférase et la GFP doit être inférieure à 100 Å.  [...]

[Biochimie] Enzymologie principe du test d'activité

L'étude de l'activité d'une enzyme dépend de l'enzyme étudiée. Tu n'étudieras pas l'activité d'une protéase de la même manière qu'une nucléase ou une enyme d'une voie métabolique.  [...] Pour étudier l'activité d'une protéine tyrosine kinase, tu peux suivre la phosphorylation d'une protéine (qui est sensée être son substrat) en regardant l'incorporation de 32 P en utilisant du [³- 32 P]ATP.  [...]

[Biochimie] svp je veux la correction de ce tp

L'acide chlorogénique et le catéchol présents dans de nombreux tissus végétaux sont des substrats de la polyphénol oxydase.  [...] Précipiter les protéines par addition d'acétone glacée (3 vol d'acétone pour 2 vol d'extrait). Agiter 2 minutes et laisser 1 h à 4°C.  [...]