• Santé - Protéine, Modification, Post

[Biochimie] Chromatographie Affinité et NaCl

La rétentions est liées à la solubilité de la protéine dans la phase mobile, si on ajoute du NaCl, le soluté sera moins soluble dans la phase mobile donc il sera mieux retenu.  [...] Mais si on n'utilise pas la structure propre de la protéine mais une modification post-traductionnelle, comme une glycosylation pour retenir notre protéine (phase stationnaire concanavaline par exemple), où est l'intérêt de la concentration en sel ici Au niveau de la concanavaline.  [...]

[Immunologie] Recherche de modification de proteine par anticorps

j'ai commencé à comprendre que je devais d'abord immunoprécipiter ma proteine avec un Ac spécifique, mais après je n'arrive pas à voir comment révéler la présence de la modification... je peux faire réagir ma proteine avec un Ac spécifique de ma décoration et migrer ma proteine sur gel puis révéler la présence de mon Ac spécifique à ma décoration ça pose pb qu'il y ai 2 Ac au final il ne peut pas y avoir de réactions croisées.  [...] - palmitoylation/miristoylation/farnésylation/.... la plupart des modification lipidiques peuvent être prédites par analyse de la séquence de la protéine étudiée. Souvent ces modifications peuvent s'observer en western-blot (comme la plupart des modification post-traductionnelles et on utilise des acides gras radioactifs comme l'acide palmitique marqué au tritium.  [...]

[Biochimie] E.coli ...

L'E.coli sécréte mal les protéines il est même souvent nécessaire de casser la bactérie afin de récupérer la protéine(prob de purification et de renaturation...détriment des rendements).  [...] En effet l'E.coli n'effectue pas des modification post-traductionnelles des protéines et en particulier le glycosilation et la carboxylation,..souvent indispensable à l'activité de la protéine.  [...]

ADN et protéines

La forme et la composition de cette poche est essentielle (et spécifique à la protéine). Un seul acide aminé modifié peut faire perdre toute activité à la protéine (par exemple les sites à cystéines actives ou à acides aspartiques...).  [...] Il doit aussi exister des cas plus compliqués où un acide aminé serait un site d'une modification post-traductionnelle nécessaire au fonctionnement de la protéine (glycosylation), mais on rentre dans des détails plus compliqués.  [...]

levure s. POMBE

la molécule d'ADN composite obtenue (vecteur + gène d'intérêt) est ensuite introduite dans une cellule hôte(levure S. Pombe PK90b), qui exécute les instructions qui lui sont fournies par le gène d'intérêt, et réalise les modifications post-traductionnelles dans l'objectif de fabriquer la protéine recherchée(l'hormone peptidique ).  [...] Pour le choix de la levure ici, c'est plutôt simple, tu cherches à obtenir des protéines fonctionnelles chez un humain. une bactérie ne procède pas à toutes les modifications post-traductionnelles que l'on retrouve chez un organisme eucaryote. Et puis l'énoncé t'aide quand meme dans ce sens ou visiblement, la levure Schizo pombe possède une kinase pouvant apporter une modification post-traductionnelle essentielle au fonctionnement de ta protéine.  [...]

[Biologie Cellulaire] poly-ADP-ribosylation de protéines

j'étudie les modifications post-traductionnelles d'une protéine exprimée dans les cellules HeLa. Je n'ai pas vu de phosphorylation de la protéine immunoprécipitatée. Je voudrais voir maintenant si elle est poly-ADP-Ribosylée mais je ne dispose pas d'anticorps anti-PAR.  [...] Je ne suis pas spécialiste mais peut-être que, comme pour les phosphorylations, cette modification post-traductionnelle peut être mise en évidence par un marquage métabolique. Le co-substrat des PARPs est l'ATP. Il est peut-être possible de mettre en évidence la poly-ADP ribosylation de ta protéine purifiée en présence d'une PARP recombinante et d'ATP alpha 32P par autoradiographie.  [...]

[Evolution] Épissage et Origine des Gènes de Développement

Quand on parle de la régulation de l'expression des gènes, on parle de la régulation de la transcription, de la stabilité de l'ARN, de la stabilité de la protéine par modification post traductionnelle. L'epissage alternatif n'est pas evoqué ou de loin. Les transcrits alternatifs permettent dans une cellule d'exprimer certaines choses mais ce seront toujours les mêmes.  [...] Bon mais vous voyez bien que dans votre propre conclusion vous déplacez le rôle de l'epissage alternatif. L'évenement déclanchant c'est la modification des protéines de régulation de l'epissage. Le moteur évolutif ca n'est donc pas l'epissage, même pour vous.  [...]

n glycosylation

Je voulais avoir une précision sur la n glycosylation des protéines qui se déroule dans le reticulum endoplasmique ( pas celle dans le golgi), elle est post traductionnelle Ou co traductionnelle Jai des informations contradictoires dans mon cours.. Quelqu'un pour m'éclairer.  [...] Malgré que l'on considère cela comme une modification post traductionnelle, elle commence pendant la traduction de la protéine selon moi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification Protéines Tag 6His

1) Les protéines se fixent mal aux billes de nickel donnant un rendement très faible, je retrouve la majorité de la protéine dans le surnageant, malgré 4 heures d'incubation. Il est possible qu'elles aient perdu leur Tag, je vais vérifier avec un anticorps cet après midi, mais si tel est le cas à quoi cela peut-il être du.  [...] N'aurais tu pas une modification post traductionnelle de ta protéine ou un clivage d'une region leader par expl Car il est peu probable que ta protéine courte existe dans ton eluat vu les différences d'intensité des bandes et que la bande de bas poid n'est pas du tout visible, alors qu'elle represente quasiement toute les proteines apres élution.  [...]

influence des peptides signaux sur la sécrétion des protéines

Mais je peux donner quelques informations. il s'agit d'un domaine extracellulaire d'un récepteur membranaire. Il y a modification post-traductionnelle (glycosylation surtout). Il y a pas de clivage ou autre de la protéine qui pourrait s'apparenter à un mécanisme comme celui pour l'insuline.  [...] Edit. ce n'est pas un problème de clivage post-translocation. Si c'était le cas, ta protéine apparaitrait dans la fraction insoluble membranaire uniquement, ce qui n'est pas le cas parce qu'une partie importante apparait soluble.  [...]