• Santé - Protéine, Intérêt, Cellule

[Biochimie] Petite question sur le Western Blot

Une autre cellule traitée avec notre produit contient 1ug de notre protéine A d'interêt mais aussi, 3 ug de protéines B car notre composé a boosté la synthèse d'une protéine B.  [...] Quand je vais déposer mes protéines sur le gel pour le WB, si je dépose 1 ug de matériel de ma première cellule, je déposerai en fait 1 ug de ma protéine A d'interêt.  [...]

Ciblage de cellules de mamifères

Je ne parle pas d'insérer un vecteur dans des cellules en culture. je parle de distribuer une protéine particulière à certaines cellules.  [...] Dans le détail, la protéine d'intérêt est fusionnée à la protéine gag de HIV par l'intermédiaire d'un site protéolytique ce qui permet la libération de la protéine après fusion de la particule avec la cellule d'intérêt. En théorie, le choix des protéines d'enveloppe de la pseudoparticule permettent un adressage à différents types cellulaires.  [...]

fusion transcriptionnelle et traductionnelle

Mais pour la fusion transcriptionnelle, il s'agit de fusionner de fusionner des gènes intervenant dans la région transcrite mais non traduite... ( quelles sont ces régions... ).  [...] à propos d'une fusion traductionnelle, j'imagine qu'on peut l'utiliser pour isoler une protéine d'intérêt ou bien réaliser une fusion entre une protéine d'intérêt et la GFP ( pour visualiser et localiser le chemin emprunté par la protéine dans la cellule ) je me trompe.  [...]

[Biologie Cellulaire] Fusion transcriptionnelle et traductionnelle

Après traduction tu auras ta protéine d'intérêt (celle codée par la séquence codante 1) + une protéine codée par un gène rapporteur, comme la GFP.  [...] Plus le promoteur sera actif dans la cellule plus le gène rapporteur sera transcrit plus il y aura la protéine codée par le gène rapporteur. Pour une quantification on n'utilise pas la GFP mais quelque chose comme la bêta glucuronidase par exemple, j'ai oublié la réaction mais plus tu auras de bêta glucuronidase plus tu auras un précipité bleu que tu pourras doser, renseignant sur l'activité initiale du promoteur de ton gène d'intérêt. c'est la fusion transcriptionnelle.  [...]

Les nanocristaux appliqués à l'étude du vivant

La technique classique consiste à fusionner la GFP avec une protéine d'intérêt et surexprimer cette protéine fusion dans les cellules. En illuminant les cellules avec une source de lumière de longueur d'onde définie, la protéine devient fluorescente et peut être suivie dans la cellule en temps réel.  [...] Outre sa petite taille, un autre avantage du nanocristal est que, dû à sa nature cristalline, il peut être visualisé par microscopie électronique. Ainsi, une même cellule peut être observée en temps réel puis, la localisation fine de la protéine observée, déterminée par microscopie électronique.  [...]

La méthodologie BRET | Dossier

Au cours de l'année 1999, une nouvelle technique, représentant une avancée considérable pour l'étude des interactions protéine-protéine, a été mise au point. la technique de BRET ( Bioluminescence Resonance Energy Transfer).  [...] La GFP est fusionnée à l'autre protéine d'intérêt (protéine B), susceptible d'interagir avec la protéine B. La luciférase est excitée à l'aide d'un substrat qui pénètre dans la cellule (coelenterazine). Si les deux protéines n'interagissent pas, on ne détecte que le signal émis par la luciférase à 480 nm.  [...]

proteine ou cellule stable ???

est ce que quelqun peut me dire ce que ça veut dire une protéine stable ou une cellule stable ou plutôt tel proteine se stabilise.  [...] Pour les lignées cellulaire, je comprends un lignée stable comme une lignée exprimant stablement une protéine d'intérêt. Il faut mettre en opposition les lignées stables au lignées transitoires. Je m'explique, dans le cas d'expression hétérologue d'une protéine dans une cellule eucaryote on peut soit.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage GFP

si tu couples ta protéine d'intéret à la GFP, tu peux la suivre dans la cellule, qd elle se ballade du noyau au cytoplasme par exemple.  [...] Tu n'introduis pas la GFP seule, mais un gène codant une protéine de fusion GFP. Ainsi, ta protéine d'intérêt et la GFP étant lié covalement, en suivant la localisation de la GFP tu suivras la localisation de ta protéine d'intérêt.  [...]

transcription inverse Proteine

Oui l'idée fait un peu rêver, mais sérieusement je ne vois vraiment l'interêt d'une cellule de synthétiser une protéine et de prendre le chemin inverse.  [...] Mais je n'avais pas fait de supposition quand au rôle des protéines éventuellement rétro-traduites et à leur intérêt positif ou négatif pour la cellule.  [...]

Sds

Après, le SDS est un détergent anionique. Il a la capacité à interagir avec les protéines, et de les linéariser. Il commence par les protéines de la surface cellulaire, avant d'induire la lyse de la cellule. Son grand intérêt dans l'électrophorèse est que le SDS est chargé (négativement), et qu'il est capable de se fixer sur les protéines de façon taille dépendante (plus la protéine est grosse, plus il y aura de SDS dessus), tout en masquant la charge native de la protéine.  [...] Le DTT a une action similaire au SDS, si je me souvient bien, mais il est moins brutale, surtout avec les protéines de la membrane cellulaire. Généralement, les personnes qui utilisent du DTT ont besoin de protéines de la membrane cellulaire pas trop dénaturé (pour enchaîner sur un WB, généralement).  [...]