• Santé - Produit, Sens, ADN

Questions sur la PCR

Merci du renseignement. Sinon je me demandais comment ça se fait que le brin simple d'adn s'hybride avec l'amorce et non pas avec son brin complémentaire produit apres dénaturation. Je pense que c'est parce que l'amorce est bien plus petite et surtout en plus grande quantité mais ce n'est qu'une supposition.  [...] la synthèse ne se produit que dans un sens et pas dans l'autre car l'ADN polymerase synthetise les pb dans le sens 5' - 3', et non l'inverse.  [...]

Un grand pas en avant vers un séquençage ultra-rapide de l'ADN

Ces puces étant particulièrement sensibles, cette technique ne nécessitera pas de grandes quantités d'ADN. Aurélien Bancaud aurait d'ailleurs fait cette découverte un peu par hasard, en voulant ralentir un écoulement de produit dans un ADN avec un champ électrique.  [...] Kezako. comment faire une analyse ADN L'ADN, cette molécule présente dans toutes les cellules vivantes renferme les clés du développement et du fonctionnement d'un organisme. Nous avons actuellement les moyens de la séquencer, pour mieux la comprendre. Unisciel et l'Université de Lille 1 nous expliquent, avec le programme Kézako, comment percer les mystères de cette molécule.  [...]

[Divers] Transmission des caractères acquis durant la reproduction

Au sens littéral, le résultat d'une mutation est un caractère acquis pour la cellule dans laquelle se produit cette mutation. et il est transmis à la descendance de cette cellule (donc de l'individu, s'il s'agit d'une cellule de la lignée germinale). En effet, la constitution de l'ADN est bien un caractère, et le résultat de la mutation n'étant pas, par définition, inné, il est acquis.  [...] Pour qu'un individu porte une mutation (dans toutes ses cellules), tout se joue au ni veau des gamètes qui l'ont produit lui-même, donc dans le corps d'un des parents.  [...]

[Biochimie] Réplication de l'ADN

Il faut comprendre que lorsqu'on dit que l'ADNpol fonctionne toujours de 5' vers 3' c'est que le brin qu'elle créé (c'est a dire le brin transcrit, sens, avancé...) est créé de 5' vers 3' et non comme j'avais mal compris qu'elle se déplace sur le brin parent de 5' vers 3'.  [...] Comme l'amorce d'ARN par la primase (car ADNpol ne peut pas initier une réplication tout seul) est avant l'ADNpol et va dans le même sens de réplication, il est produit de 5' vers 3' et la primase se déplace sur le brin parent de 3'vers5'.  [...]

[Biologie Moléculaire] [virologie et génétique] Virus de l'hépatite C

As-tu essayé de faire une RT-PCR avec une amorce s'hybridant sur la queue polyA et une amorce sens suffisamment loin du 3'UTR (disons 1000-1500 pb en amont) Après tu te rapproches de la région voulue par PCR emboitées ou nested-PCR, qui te permet d'augmenter la spécificité d'amplification du produit voulue.  [...] Pour la dernière nested-PCR, tu peux faire une plus grande avancée vers 3' avec une amorce sens, ainsi tu passe ton produit de PCR en gel d'agarose et tu découpes la bande la plus petite, correspondant à ton produit d'intérêt, et tu n'es pas embêté avec des bandes de tailles proches qui pourraient le contaminer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Connaissez -vous un outil d'analyse d'affinité d'un primer pour une séquence ?

Puisque mon Forward primer (=droit) est complémentaire à la molécule d'ADN template, son hybridation avec cette dernière lance le processus de RCA. Mais l'autre amorce, l'amorce renversée (Reverse primer=gauche) est conçue pour être complémentaire du produit de RCA (ce qui signifie que sa séquence est identique à une partie de la molécule d'ADN template), ainsi cette amorce seule, sans la première, n'est pas censée s'hybrider au template et lancer elle aussi une RCA. La réaction est @ 30°C en isotherme.  [...] Mais j'obtiens bien un produit de RCA (observé contre un controle sans molécule template d'ADN = aucune amplification) avec l'une ou l'autre amorce alors que sans le Forward primer, la réaction n'est pas censée se produire avec le Reverse primer seul.  [...]

Normalisation RT-PCR quantitative

Pour compléter je dirai juste que tu peux également faire ta gamme à partir de produits PCR. Ca se manipule mieux que l'ADNg et pas de clonage nécéssaire.  [...] Si c'est bien ça, tu n'as, en effet, pas besoin de faire de gamme d'ADN génomique ou de produit PCR ou de plasmide. C'est un peu comme en Northern quand tu exposes plus ou moins longtemps le film sensible.  [...]

[évolution] Théorie de l'évolution et Régression des organes inutiles - Page 3

Jamais je n'accepterai cette explication qui n'en est pas une, car dire que cela s'est produit par hasard, revient à ne rien expliquer, car le hasard n'explique rien, si ce n'est le chaos et le désordre. ( certains reconnaîtrons la phrase d'un Hawkins, mais pas exactement dans le même sens ).  [...] Même si nous supposons pour un moment que les protéines, d'une façon ou d'autre, aient été formées accidentellement, cela n'aurait aucun sens, parce que les protéines ne sont, en soi, rien du tout. elles ne peuvent pas se reproduire d'elles même. La synthèse de protéines est seulement possible avec l'information codée dans les molécules d'ADN et d'ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Deux bandes en PCR

Effectivement j'ai négligé l'ADN génomique. Donc non c'est pas la quantité de plasmide. Cependant je maintiens que ça n'est pas deux bandes mais un dédoublement d'une seule bande du fait de la masse d'ADN que vous avez produit. Ca arrive, c'est rien.  [...] Là dessus il y a effectivement une petite remarque à faire. On voit que l'on a la même intensité de bande pour l'ADN produit à partir de l'ADNg et du plasmide. On peut penser ( ) qu'il y a pas mal de plasmide comme matrice pour les PCR. Du coup c'est vrai que l'on a du mal à imaginer que l'on ait mis autant d'ADNg.  [...]

Technique de RACE-PCR?

Pour la RACE en 3', tu va utiliser la queue polyA en 3' d'un ARNm pour hybrider un oligo dT qui va te servir a amorcer la RT-PCR, sur l'ADNc correspondant tu fais ensuite une PCR avec un oligo gene specifique (sens forward) et ton oligo dT. Ensuite, tu clones ton produit PCR, tu le fais sequencer et tu as la position exacte du stop de terminaison.  [...] Mais j'ai un soucis pour la PCR qui vient ensuite. est-ce que la sonde qui sert à l'initier se fixe sur l'oligo dT Elle serait donc forcément poly A, non La sonde ne devrait-elle pas se fixer à l'extrémité 3' de l'ADNc, qui ne contient pas de séquence poly A ou oligo dT Et je ne sais pas ce qu'est le sens forward (je dois vraiment avoir des lacunes... ).  [...]