• Santé - Plasmide, Molécules, Bactéries

amplification dans un plasmide

je m'interrsse à la transgenèse et j'ai lu qu'une des étapes pour fabriquer un OGM était l'amplification du plasmide chez l'E.coli.  [...] Lorsqu'on insert une molecule de plasmide chez coli, la bactérie va rpliquer le plasmide jusqu'a avoir 50 à 100 molécules par bactéries.  [...]

[Divers] Plasmide et bactérie

Vous disposerez au depart de 3ml de culture bacterienne ayant poussé toute la nuit, cela represente 3.10^9 bacteries. En admettant qu'apres le TP vous ayez purifié 1microgramme d'un plasmide de 3000 pb, calculez le nombre de molecules de plasmide conte,u dans une bacterie.  [...] Si c'est le point de départ. il faut que tu calcules le nombre total de plasmides. Pour ça, il faut que tu connaisse le nombre total de bases, que tu diviseras par le nombre de bases du plasmide.  [...]

utilisation des résistances aux antibiotiques

Pourquoi n est il pas preferable d'inserer des genes codant pour la synthese de molecules de type fluorescentes ou phosphorescentes pour reperer les bacteries exprimant le plasmide (et donc le gene cible). Ainsi, on eviterai de donner aux bacteries les armes pour contrecarre nos seuls armes.  [...] Le fait est qu'on ne va pas repérer les bactéries qui ont intégré le plasmide, on veut les sélectionner spécifiquement et les isoler.  [...]

[Microbiologie] bacterie resistantes

- Au cours des divisions cellulaires, le plasmide peut ne pas être transmis à certaines bactéries filles, il y aura donc apparition de bactéries non résistantes.  [...] - Lorsqu'on insère un plasmide dans des bactéries, certaines bactéries du lot n'insèrent pas le plasmide et restent donc non résistantes.  [...]

[Microbiologie] Culture bactérienne troublante

En fait le plasmide ne comprend pas tout le canal chlore, il ne contient que le promoteur de CFTR, associé à une firefly luciferase. Par conséquent les bactéries ne synthétisent rien de mauvais en théorie.  [...] Je viens de relire ton message et comme je ne sais plus qui le mentionnait auparavant, il se peut que la machinerie cellulaire de la bactérie lise le plasmide et synthétise des molécules qui lui serait nocives vu que les constructions sont artificielles en général.  [...]

[Biologie Moléculaire] Le plasmide a t'il l'insert?

Donc vérifier que tes bactéries sans plasmide sont bien sensibles aux deux antibios, et d'abord faire pousser les bactéries transformées sur strept, puis repiquer les colonies en les identifiant sur ampicilline, puis tester par miniprep celles qui ne poussent pas sur ampicilline.  [...] C'est l'insert qui porte le gène de résistance à la néomycine. Donc, si j'ai des colonies sur LB+strepto+néo, c'est que mon plasmide est recombiné et est dans les bactéries.  [...]

OGM (l'identification du/des gènes intéressant(s))

je m'interesse aux OGM et j'aimerai savoir comment concretement les scientifiques procèdent pour,une fois qu'ils ont identifié pour une fct° d'un être vivant la ou les protéines qui sont à l'origine de cette fonction (quand je parle de fonction c'est par exemple le fait qu'une bactérie puisse produire une protéine insecticide, ici ce sera sa fonction intéressante), ils retrouvent le gène qui est à l'origine de cette protéine.  [...] Pour le vérifier on l'insère dans un plasmide bactérien et on transforme des bactéries. En cultivant ces bactéries sur un milieu permettant de différencier celles qui produisent notre molécule d'intérêt et celles qui ne la produisent pas, on récupérer les bactéries contenant le gène codant pour la synthèse de cette molécule.  [...]

PCR et vecteur de clonage

Les vecteurs de clonage permettent d'obtenir un vecteur (plasmide, phagemide, cosmide etc...) quand on parle d'amplification de l'ADN, c'est alors que tu as une molécule qui va se répliquer dans la bacterie (comme les chromosomes) ceci va permettre d'obtenir un grand nombre de copie du plasmide.  [...] Donc il doit etre possible de calculer l'amplification en aprtant du postulat (faux) qu'une seule molecule transforme une bacterie. tu connais le nombre de plasmide par cellule, et le nombre de cellules dans une culture de 5ml alors cela te donne un nombre de molecules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Selection de bactéries par Antibiotiques lors du clonage d'ADN

Ma question est la suivante. la selection à la base de la tetracycline ne va-t-elle pas tuer les bactéries ayant incorporé le plasmide qui porte l'ADN dont on a besoin.  [...] *Bref, le contexte est le suivant. on veut cloner un gène de l'ADN humain, pour ceci on utilise les plasmides des bactéries d'E.Coli qui contiennent entre autres des gènes de résistance à la tetracycline et l'ampicilline, grâce aux enzymes de restriction on peut incorporer le gène humain qu'on veut cloner dans le plasmide à un emplacement entre les séquences du gène qui code pour la résistance à la tetracycline.  [...]

[Génétique] vecteur de plasmide

Je passe juste pour compléter ce qu'a dit caro56, si tu fais ça tu sélectionne bien les bactérie qui ont intégré le plasmide recombinant mais le problème c'est que dans ce plasmide tu ne sais pas si ton gène a été correctement intégré. Car en fait tu peux avoir des bactéries avec un plasmide recombinant sans ton insert.  [...] - des colonies bleues ce qui signifie que tu as des bactéries qui ont intégré le plasmide mais pas l'insert puis que celle-ci a pu synthétiser de la B-galactosidase.  [...]