• Santé - Origine, Réplication, Cellules

[Biologie Moléculaire] siRNA, shRNA ??

Bien sûr mais la pression de sélection ne permet que de sélectionner les plasmides intégrés et les plasmides épisomaux répliqués. Dans ce dernier cas, il leur faut une origine de réplication exploitable par la cellule transfectée, comme par exemple un plasmide contenant l'origine de SV40 avec les cellules COS-7 qui possèdent l'antigène T nécessaire pour répliquer les plasmides contenant cette origine.  [...] Oui je rejoins LXR sur ce point, en dehors du cas bien particulier des vecteurs épisomaux, la pression de sélection va permettre de selectionner les cellules qui ont intégré le plasmide, sinon celui-ci est perdu au fur et à mesure des divisions cellulaires.  [...]

le cancer tue, certes mais comment - Page 2

Il avait aussi été dit sur une autre discussion que les cellules cancéreuses sont donc en plus. C'est une cellule qui, parce que son ADN est modifié, est à l'origine d'une réplication chaotique de cellules du même genre, mais, finalement, c'est uniquement du surplus.  [...] Quand bien même le cancer était complètement généralisé, le nombre [approximatif] de cellules saines est le même. Du coup, si on trouve un traitement adapté (capable de supprimer parfaitement les cellules cancéreuses sans rien endommager autour), il est tout à fait possible de soigner un cancer complètement quelque soit le degré de généralisation.  [...]

[Biotechnologie] Clonage Eucaryote

Voilà, j'ai ecrit que pour la production de protéines dans des cellules de mammifères, il fallait utiliser un plasmide contenant un site polyA, une origine de réplication virale ainsi qu'un promoteur de type viral.  [...] Oui mais pour utiliser un plasmide dans une cellule de mammifères, faut il alors qu'il y a ait une origine de réplication de type virale ainsi qu'un promoteur type viral.  [...]

[Biologie Moléculaire] Colonies de bactéries

Je suis actuellement entrain d'effectuer une modification de BAC par recombinaison homologue dans la bactérie DH10B. Je viens de transformer mes bactéries qui contiennent le BAC avec le plasmide contenant la séquence que je veux insérer dans ce BAC. Après l'electroporation, mes bactéries ont poussées sur un milieu contenant des antibiotiques appropriés montrant que certaines ont bien intégrer le plasmide et que celui ci a du s'intégrer dans le BAC (le plasmide contient une origine de réplication qui ne lui permet pas de se répliquer de façon autonome dans ce type de bactéries).  [...] Malheureusement il me semble (à confirmer) que les BAC possèdent une origine de réplication OriS qui maintient le nombre de copies à 1 par cellules.  [...]

L'âge de l'homme a une influence sur le risque de fausse-couche

Les spermatozoïdes aussi semblent subir les effets du vieillissement. La réplication du matériel génétique des cellules spermatiques à l'origine des spermatozoïdes peut connaître des erreurs. Comme la formation des spermatozoïdes se fait en permanence depuis la puberté, les erreurs s'accumulent progressivement avec l'âge.  [...] On constate que les spermatozoïdes, au fur et à mesure que l'homme vieillit, perdent de leur mobilité et contiennent effectivement davantage d' anomalies chromosomiques ou génétiques. Ces anomalies, si elles sont portées par le spermatozoïde qui fécondera l' ovule, peuvent induire des anomalies chromosomiques dans l'embryon, dont on sait qu'elles sont à l'origine de la moitié des fausses couches spontanées.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation de plasmide, chloramphenicol

3. Et puis autre question, j'ai egalement lu que l'origine de replication colE1 pourrait necessiter un cofacteur bacterien tres instable. Cultiver des bacteries avec ce plasmides en presence de chloramphenicol ne devrait donc pas permettre d'augmenter le nombre de copie par cellules, puisque si la synthese de proteine est inhibee, le facteur en question n'est pas renouvele, donc le plasmide n'est pas replique.  [...] Par ailleurs, j'ai egalement lu que certains facteurs bacteriens sont responsables de controle du nombre de copies de plasmides par cellules en reprimant l'origine de replication colE1 (c'est ce qui fait la difference entre les plasmides high et low copy, si j'ai bien compris).  [...]

monde ARN avant ADN

Pour ma part, j'ai proposé que les protéines du système de réplication ancestral avaient été remplacées chez les bactéries par un nouveau système d'origine virale (Forterre, 1999). Cette hypothèse se base sur l'existence de nombreuses protéines de réplication virales formant des familles non homologues de leurs analogues cellulaires.  [...] L'hypothèse du transfert d'un mécanisme de réplication de l'ADN d'origine viral vers des cellules a été reprise par Villareal et De Philippis (J. Virol. 2000, 74, p221) qui ont proposé une origine virale pour l'ADN polymérase d des cellules eucaryotes. Effectivement, cet ADN polymérase branche avec tout un groupe de polymérases virales dans une phylogénie des ADN polymérases de la famille B (Filée et al.  [...]

Carte plasmide pcDNA 3.1

Je sais que les ori servent à initier la réplication, mais je croyais qu'un plasmide se répliquait d'un seul coup et toujours à partir du même endroit, donc pourquoi il y a 3 ori différentes (SV40ori, pUCori, f1ori) Et SV40pA qu'est ce que c'est.  [...] SV40ori sert d'origine de réplication dans certaines cellules eucaryotes, c'est-à-dire que si on l'insert dans E.coli il ne va pas s'exprimer Mais si le plasmide doit se répliquer dans une bactérie la réplication va commencer à pUCori ou f1ori Je ne comprends pas pourquoi il y a plusieurs origines.  [...]

[Biologie Moléculaire] Initiation de la réplication de l'ADN

Je souhaite savoir à quel endroit les protéines initiatrices qui induisent une torsion supplémentaire sur l'ADN et permettent la dénaturation partielle de l'ADN afin que les hélicases arrivent se fixent.   [...] Est-ce que les origines sont définies différemment entre les cellules eucaryotes et procaryotes (Je sais que les cellules procaryotes ne possèdent qu'une seule origine de réplication alors que les eucaryotes en possèdent énormément).  [...]

[Biologie Moléculaire] Décision de replication de l'ADN

Il existe une séquence origine de réplication assez conservée chez les Procaryotes, on sait assez bien la reconnaître et donc on peut savoir que la réplication bactérienne débutera à cet endroit et pas ailleurs. Les études concernant la réplication chez les Eucaryotes ont été pas mal menées chez S. cerevisiae.  [...] Il y a deux cas possibles. soit le plasmide contient une origine de réplication reconnue par la machinerie de la Levure et dans ce cas on aura une prolifération des cellules l'ayant, soit le plasmide n'en contient pas et les cellules ne survivront pas.  [...]