• Santé - Molécule, ADN, Digestion, Enzymes

[Biologie Moléculaire] La carte de restriction

disons que nous avons une molécule de l'ADN linéaire de 15 kpb la digestion de celui-ci par trois enzymes nous donne quelque chose comme ça.  [...] Moi je suis pas très bien en biologie moléculaire mais je peux dire que cette enzyme a deux site de restictions, 14 et 1.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

Le marqueur de poids moléculaire (appelé souvent ladder) porte bien son nom. c'est un mélange de fragments d'ADN de taille connue.  [...] Un petit effort serait le bienvenu, je pense que c'est à la portée de tout le monde de trouver qu'une molécule circulaire coupée une fois donne 1 fragment linéaire, alors qu'une molécule linéaire coupée une fois donne 2 fragments. Non Et puisque tu as compris la technique, je ne vois pas non plus où tu peux être bloqué.  [...]

Différences d'ADN entre les ètres vivant ?

Mais ne serait ce pas possible de procéder à des digestions enzymatiques sur des gènes spécifiques à l'homme Ainsi lors de l'électrophorèse on verrait si des bandes apparaissent. Si oui c'est un homme si non s'en est pas un.  [...] je pense qu'il y a bien trop de point commun entre les grand singes et l'homme pour pouvoir les identifier uniquement grâce a des digestion enzymatique ou alors il faudrait travailler sur les marqueur micro satellite ou attendre que le barcoding soir au point.  [...]

électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai eu les résultats de la digestion et j'observe dans chaque cas 2 bandes. pour le plasmide non digéré j'ai une bande claire puis une bande foncée. et pour le plasmide digéré, j'ai d'abord la bande foncée puis la bande claire.  [...] Pour le BET c'est bien le cas, je suppose que c'est pareil pour les autres intercalants de l'ADN. Par contre cette relation marche t'elle que pour les fragments linéaires Une bande correspondant a un plasmide surenroulé ne devrait-elle pas être moins intense du au fait que certaines bases de l'ADN soit inaccessible du a la topologie de l'ADN ou alors est-ce négligeable.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique.  [...] et ci-dessous l'électrophorèse obtenue après la digestion enzymatique.  [...]

Lysosome

Effectivement, ce sont bien les têtes hydrophiles qui sont exposées... Et cela justement parce qu'elles sont hydrophiles. En ce qui concerne les enzymes, je ne suis pas sur qu'ils y ait besoin d'une protection particulière sur la membrane pour les en protéger, les enzymes s'attaquent au proétines, pas aux phospholipides. Je me trompe.  [...] Oui je n'ai pas été très clair. La partie hydrophile est due au phosphate et à la molécule à laquelle il est associé (choline, inositol, etc). mais de part l'organisation en couche et la partie hydrophobe du phospholipide, je suppose que les phospholipases contenues dans le lysosome ne peuvent pas agir car ceux sont des enzymes hydrophiles (et d'où la nécéssité de l'émulsion par les sels biliaires lors de la digestion des lipides).  [...]

Les bactéries de nos intestins mangent les médicaments que nous prenons !

Les scientifiques se sont intéressés à la Levodopa (L-dopa), un médicament contre la maladie de Parkinson introduit dans les années 1960 et chargé d'acheminer la dopamine vers le cerveau. Cette molécule est malheureusement digérée par les enzymes produites par le corps lors de la digestion, de telle sorte qu'à peine 1 à 5 % du médicament parvient effectivement au cerveau.  [...] Son équipe vient enfin de comprendre la raison de ce ratage. ce ne sont pas les enzymes digestives humaines qui dévorent la L-dopa, mais celles produites par une bactérie du microbiote, Enterococcus faecalis. Celle-ci produit une enzyme qui transforme la L-dopa en dopamine, exactement comme la digestion.  [...]

[Biologie Moléculaire] le clonage impossible, ou comment se prendre la tete...

J ai donc extrait ma sequence d interet en digerant mon clone moleculaire par Sal1 et EcoR1. Mon insert a une taille de 3200kb, bien visible sur gel d agarose. D ailleurs je purifie celui ci a partir du gel par un systeme de colonne Qiagen classique. En parallele, je digere mon pUC19 (2600kb) par les memes enzymes et le purifie de la meme maniere (j ai egalement fais cette approche sur peGFP-N1 qui contient lui aussi Sal1 et Ecor1).  [...] J'inactive mes enzymes après digestion et ma ligase avant ma transfo. J'ai également testé plusieurs quantités d'ADN pour ma ligation (50, 100 et 300 ng) et mes boîtes restent vierges de colonies.  [...]

[Biologie Moléculaire] Enzymes de restriction sur plasmides- Digestion complète et incomplète

Par exemple, pour un plasmide ayant 3 sites de coupures, le nombre de fragments attendu (théorique) est de 6 si l'on considère tout les fragments possible et imaginable. Mais dans le cas d'une digestion incomplète, comment savoir s'il y aura 1 seul site ou 2 site qui seront impliqué dans la digestion du plasmide.  [...] aussi je cherche a savoir comment trouver la taille du vecteur pSK (environ 2900 pb) abres la double digestion par ces deux mêmes enzymes.  [...]

[Biologie Moléculaire] enzyme de restriction

J'ai un problème avec une digestion d'ADN amplifiés par PCR par l'enzyme de restriction Mnl1, une bande supplémentaire que je n'attendais pas apparaît, alors que ma PCR est spécifique et n'est pas contaminée. Mes réactifs de digestion non plus ne sont pas contaminés, j'ai vérifié avec le blanc de PCR.  [...] Tu as peut-être utilisé l'enzyme dans des conditions imparfaites (erreurs de proportions, de temps ou de durées d'incubation). Pour certaines enzymes au moins, cela entraîne des problèmes de spécificité si bien que l'enzyme reconnait et clive d'autres sites. On parle d'activité STAR.  [...]