• Santé - Mesure, Activité, Substrat

[Biochimie] Expérience!!!!!

Quel expérience pouriez vous faire pour montrer que les enzymes sont détruite par une température de plus de 50°C.   [...] tu mesure son activite pour son substrat a sa temperature optimal. puis tu chauffe a 50°C et tu l'as remet a sa temperature et tu mesure son activite avec son substrat. si l'enzyme est detruite alors il n'yaura une faible activite et si ce n'est pas le cas, elle aura une activite normal.  [...]

[Biologie Cellulaire] Mesure de l'activité d'exocytose de la HRP chez l'amibe (Niveau L2)

Lors d'un TP de biologie cellulaire nous avons mesuré l'activité d'ENDOCYTOSE de la HRP par l'amibe en faisant un suivi spectrométrique de la HRP des cellules d'amibe préalablement lavés, centrifugés, lysés en y ajoutant le substrat de la HRP. le TMB.  [...] Par ailleurs il nous ai demandé de schématiser clairement comment ferions nous pour mesurer l'activité d'exocytose de la HRP chez l'amibe.  [...]

cinétiques atypiques

lorsque je mesure l'activité enzymatique d'un substrat avec des enzymes recombinantes j'obtiens ceci.  [...] donc forcément l'équation de MM ne convient pas. J'ai essayé avec une équation (inhibiteur non compétitif) comme conseillé pour les inhibitions par excès de substrat. Mais j'obtiens des valeurs abhérantes de km et vm (même si j'ai un R correct).  [...]

[Biochimie] Enzymologie et KM

En effet il est dit que si Km est élevé la réction nécessitera des concentrations importantes de substrat pour atteindre vmax, ok, mais quand [S] est importante est-ce qu'il n'y a pas un max de sites saturés, donc une grande activité enz.  [...] Le KM mesure l'affinité de l'enzyme pour son substrat. Donc quand le KM est faible, il faut peu de substrat pour avoir une forte activité catabolique, et inversement quand ton KM est fort.  [...]

[Biochimie] enzymologie activité spécifique

on mesure l'activité de 1 mg de cette enzyme en présence de 6.10^(-2) moles/L de substrat. La vitesse trouvée est égale à 38,5 10^(-3) nmoles/sec.  [...] Concernant les activité enzymatique totales et spécifique, c'est juste une question de volume. Tu mesures une activité spécifique a partir d'un prélevement de 1 ml d'une solution contenant 1 litre. Ton activité spécifique vaudra X et ton activité total 1000 X.  [...]

[Biochimie] enzymes et substrat biolux

la GFP c'est encore autre chose. Elle n'a pas d'activité enzymatique contrairement a la ßgal ou luciferase. C'est simplement une protéine fluorescente, c'est à dire qu'elle émet des photons lorsqu'on l'excite a une longueur d'onde particulière. Elle n'utilise pas de substrat au sens chimique.  [...] Il m'est arrivé de mesurer l'activité beta-galactosidase avec un luminomètre. Dans ce cas là, le substrat employé ne doit pas être du X-Gal comme il est coutume d'employer pour des tests de sous-clonage, mais un substrat luminescent.  [...]

[biochimie] activité spécifique d'un enzyme selon la concentration

L'activité spécifique mesure le nombre de moles converties par unité de masse d'enzymes(en mg). Faut bien garder en tête qu'une concentration d'une seule enzyme participe à cette activité.  [...] On rapporte l'activité d'une enzyme spécifique sur une quantité d'enzymes totale. Ca veut dire que tu as d'autres protéines dans ton échantillon qui ne participent pas à l'activité dont tu mesures car elles ont une autre action, agissent sur un autre substrat etc..).  [...]

Enzymologie

J'aimerai savoir quel(s) paramètre(s) nous permet de dire qu'une enzyme est plus efficace qu'une autre pour un même substrat sachant que je n'ai étudié que la Kcat = constante catalytique et la perfection cinétique Kcat/Km (par contre je sais que Km correspond à l'affinité, mais j'ai du mal à comprendre ce à quoi correspond la Kcat et le Kcat/Km).  [...] De plus, je voudrai savoir comment mesure t'on une activité enzymatique et si la vitesse initiale dépend de la concentration en enzyme mais aussi de la concentration en substrat.  [...]

[Biologie Moléculaire] Phosphor-screens

En fait, on voudrait mesurer l'activité des MAP kinase via la phosphorylation de son substrat, à savoir l'histone H1 dans mon cas, à l'aide du phosphate radioactif.  [...] Pour ce faire on fait réagir la MAP Kinase avec H1 en présence de phosphate radioactif, on stoppe la réaction, on effectue une électrophorèse dont les gels sont ensuite exposés aux fameux phosphor-screens. Ensuite il est littéralement écrit. The phosphor-images of gels (screens) were captured and the kinase activity was quantified using an FX phosphor image analysis system.  [...]

Calcule d'activité spécifique à partir absorbance

Voila j'aimerais savoir comment calculer une activité spécifique de mon enzyme (trypsine) à partir d'une absorbance à 280 nm (fixé pour savoir quantité de protéines dans échantillons) et à 410 nm (la pente del a mesure de l'hydrolyse de mon subtrat par mon échantillon de trypsine en fonction du temps).  [...] j'aimerais savoir en gros comment à partir de mesures d'absorbance (trypsine qui hydrolyse un substrat au cours du temps=. absorbance augmente) je peux calculer l'activité spécifique de mon enzyme.  [...]