• Santé - Lactose, Beta, Bactérie, ADN, Synthèse

phage M13 et transformation bactérienne

Enfin il me semble qu'on utilise des bactéries spéciales possédant un épisome F' contenant une résistance à la tétracycline pour son maintient. Est ce que ces bactéries possèdent aussi un opéron lactose ne synthétisant qu'une partie de la beta galactosidase de manière à ce qu'il y ai un gène marqueur.  [...] dans ce cas est ce que le phage M13 possède lui aussi un opéron lactose par exemple codant uniquement pour le peptide alpha qui serait complémentaire de la partie de la beta galactosidase synthétisée par la bactérie et dans le cas où notre ADN d'intérêt aurait été inséré on aurai plus de synthèse de la beta galactosidase.  [...]

Criblage

Dans la synthèse de l'insuline in vitro par exemple, on effectue un criblage des colonies blanches obtenues après ensemencement sur un milieu contenant le lactose. On rechercher les bactéries ayant un plasmide contenant le gène recherché mais le fait que ces colonies soient blanches, cela veut dire pas d'expression du gène de la beta-galactosidase et donc insertion du gène d'intérêt non.  [...] Au fait, je parlerais plutôt de sélection plutôt que criblage. Criblage ça implique une recherche d'une nouvelle molécule (séquence d'ADN, ADNc, protéines,...).  [...]

[Microbiologie] bacterie OMPG +??

N'est-ce pas plutôt utile pour détecter la présence de la béta-Gal chez les bactérie lactose - Les lactose + la possèdent forcément non.  [...] Par contre, si sur le milieu Hajna-Kligler on a une bactérie qui est lactose (-) et glucose (+), il est nécessaire de vérifier tout de meme si la bactérie possède tout de meme l'enzyme.-D.  [...]

mutants constitutifs d'E.Coli

il me faut une explication pour cette question. l'apparition de mutants constitutifs d'E.Coli pour la synthèse de (beta)B-galactosidase peut résulter de mutations sur quelles parties de l'opéron lactose.  [...] je pose cette question car ça m'a été posé dans un examen l'année derniére et je l'avais raté,par conséquent,j'ai eu le module biologie moléculaire ajourné,donccccccccc,svppppppp ppppp.   [...]

[Génétique] Help! tp génétique, analyse clonage

Un dernier point le semble un peu sombre. l'IPTG permet d'induire la production de beta galactosidase (quand LacZ est fonctionnel), qui utilisera le X-gal, dans le cas de LacZ fonctionnel. Mais alors, pourquoi n'utilise-t-on pas tout bêtement directement du lactose, dans un milieu supplémenté en X-gal, pour induire la production de beta galactosidase Est-ce que c'est parce que l'enzyme préférerait alors utiliser seulement le lactose, et pas le X-gal, et donc on ne pourrait voir aucune différence entre les bactéries.  [...] Mais alors, pourquoi n'utilise-t-on pas tout bêtement directement du lactose, dans un milieu supplémenté en X-gal, pour induire la production de beta galactosidase Est-ce que c'est parce que l'enzyme préférerait alors utiliser seulement le lactose, et pas le X-gal, et donc on ne pourrait voir aucune différence entre les bactéries.  [...]

[Biologie Cellulaire] Dégradation du lactose par les bactéries

(J'ai fait un test ONPG, qui est négatif, et je voudrais être certaine de pouvoir éliminer la possibilité que la bactérie soit lactose +).  [...] Pareil que les autres, à ma connaissance, y en a pas mais ça veut pas dire que ça n'existe pas. J'ai eu le problème avec du cellobiose, une bactérie que j'étudie le dégrade mais par une voie peu courante. Donc le test classique demeure négatif, même si celui ci peut être utilisé dans certaines géloses de culture.  [...]

paroi Gram-

La bactérie a besoin de 2enzymes pour utiliser le LACTOSE une perméase. la beta galactosideperméase qui permet le transport du lactose de l'espace périplasmique vers le cytoplasme et la bétegalactosidase qui permet de couper le lactose.  [...] Moi je pense que pour permettre la pénétration du lactose dans la bactérie a travers de la menbrane plasmique il faut qu'elle posséde une enzyme qui est une polymérase qui va permettre au lactose de rentrer dans le cytoplasme de la cellule.Pour qu' ensuite elle puisse l utiliser.  [...]

Metabolisme protidique

j'ai eu une discussion il y a peu avec mon professeur sur l'utilisation des glucides par les bactéries, j'en suis venu a lui demander, lors de la culture d'un bactérie non-exigeante, lorsque le milieu contient 2 types différents de glucides. admettons, du lactose en grande quantité et du glucose en faible quantité, la bactérie va t'elle privilégier la consommation du glucose (une ose simple ) mais en plus faible quantité (pour ensuite s'attaquer au lactose) ou bien commencer par consommer directement le diholoside (le lactose) qui est present en plus grande quantité.  [...] . Donc même si le lactose est présent, tant qu'il y a du glucose l'operon ne sera pas induit car la synthèse des trois enzymes est coûteuse en énergie et serait donc inutile.  [...]

[Microbiologie] Opéron lactose, Molécules mystéres.

Un inducteur de l'opéron Lactose entrant dans la bactérie par diffusion passive, ou autre mais en aucun cas par la lactose perméase (IPTG ).  [...] Je connais bien la réaction de l'ONPG, mais je ne savais pas que celui ci, qui à la base est surtout utilisé comme substrat chromogène, pouvait servir d'inducteur. Pourtant sa structure s'éloigne beaucoup de l'allolactose, peut-il réellement se fixer sur le répresseur de l'opéron lactose, et ainsi induire la synthèse de Béta-gal.  [...]

operon

On utilise une bactérie déficiente pour un gène codant la beta galactosidase, ce gène étant grand c'est un petit fragment en n-terminal qui est tronqué dans la bactérie, la version fonctionnelle est dans le plasmide.  [...] La synthèse de la beta gal peut être induite par l'IPTG (isopropylthiogalactoside), en effet l'IPTG est un inducteur de l'opéron lactose. L'IPTG permet la complémentation alpha intra allélique d'une forme déficiente de la beta galactosidase, il induit donc la production de beta gal.  [...]