• Santé - Interactions, Anticorps, Membrane

Définition | Western blot - Immunoblot | Futura Santé

Image d'une membrane de western blot. Les bandes foncées correspondent aux protéines qui ont interagi avec les anticorps marqués utilisés. JWSchmidt, Wikimedia Commons, cc by sa 3.0.  [...] blocage de la membrane. cette étape est indispensable pour limiter les interactions non spécifiques ultérieures entre les anticorps et la membrane. Le blocage est réalisé dans une solution de protéines concentrées.  [...]

[Biochimie] dot plot et overlay

Dans le but d'étudier les interactions entre 2 protéines, je voudrais faire un dot plot pour immobiliser ma première protéine sur la membrane de nitrocellulose, par la suite je voudrais faire un overlay ou j'incube ma membrane de nitrocellulose dans la solution de la deuxième protéine et je révèle les interactions par l'anticorps de la deuxième protéine.  [...] En faite, comme j'en ai que peu des deux protéines je suis obligée de commencer par le dot plot et l'overlay pour voir les interactions possibles et par la suite je passerai a l'IP. J'ignore la quantité exacte de protéines que je dois déposer.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunoprécipitation

Alors ma question c'est, pourquoi on fait l'immunoprécipitation qui est une méthode beaucoup plus longue et où on peut avoir des interférences avec des chaînes légères (peut être parce que seule protéines est présente sur la membrane) et peut être aussi parce que avec une électrophorèse sur les protéines totales il peut y avoir des interactions aspécifiques protéine-anticorps.  [...] Ensuite, on crosslink souvent les anticorps sur les billes. Faire un SDS PAGE permet de vérifier l'efficience du crosslinking avant de faire autre chose. Dans ce cas là je suis d'accord que le WB n'aide en rien.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expliquer le Blocking buffer

en immunohisto, je ne sais pas. Par contre, en western blot, on utilise un blocking buffer pour saturer la membrane. Ce buffer est souvent du lait ou de la BSA ou une sauce commerciale... Le principe est qu'il contient des protéines. Les anticorps étant eux même des protéines, ils pourraient se fixer non spécifiquement sur la membrane et faire du bruit de fond lors de la révélation.  [...] En saturant la membrane avec des protéines non spécifiques, il y a moins d'AC qui va s'y fixer car les interactions protéine/membrane non spécifiques doivent être plus fréquentes que les interactions protéine/protéine non spécifiques.  [...]

[Biologie Cellulaire] cadherines

Je souhaiterai savoir pourquoi la présence d'anticorps anti cadherines rompt le tissu embryonnaireSelon moi les cellules sont censées adhérer entre elles, donc je vois mal comment l'anticorps peut réussir a se fixer sur les cadherines.  [...] parce que certains types d'anticorps peuvent se fixer sur des sites d'intéraction de protéines et ainsi perturber leur fonction. Il faut comprendre que les interactions entre protéines sont souvent assez labiles, et qu'une fois l'anticorps fixé il a le dessus sur d'autres types d'intéractions.  [...]

Membrane cellulaire °_O

Svp quelles sont les interactions qui stabilisent la membrane plasmique et quelle propriété fondamentales de la membrane assurent-elles.  [...] je pense que la repnse de ma question et les interactions non covalentes proteine-lipdes ce qui donne a la membrane d etre lache et alrs d etre fluide, mais je sui pas sur.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéines membranaires et membrane plasmique

QUELLES interactions stabilisent la membrane plasmique quelle proprieté fondamentale de la membrane assurent elles.  [...] Ces interactions permettent il me semble la stabilité mais également la fluidité de la membrane (ce sont des liaisons faibles, permettant une dynamique de l'édifice). Cela autorise notamment l'insertion de protéine dans la membrane (par exemple celles qui ont des hélices alpha hydrophobes, comme la connexine).  [...]

Les anticorps, protéines du groupe des immunoglobulines | Dossier

Les anticorps sont la forme sécrétée de l' immunoglobuline de membrane d'un lymphocyte B, et on les retrouve dans le sérum et les humeurs. Chaque anticorps est capable de se fixer spécifiquement à l' antigène qui a déclenché sa production.  [...] Le complexe antigène-anticorps est obtenu par complémentarité spatiale entre le paratope de l'anticorps (région chargée de la reconnaissance) et l'épitope de l'antigène par l'intermédiaire de liaisons faibles, et il est réversible. Les liaisons faibles en jeu sont des liaisons hydrogène, des interactions électrostatiques, des liaisons de Van der Waals ou encore des interactions hydrophobes (pour moitié des liaisons).  [...]

Différences test d'ouchterlony et test ELISA

Je pense confondre un petit peu ces deux tests immunologiques et je ne trouve pas réellement de réponse à mes questions sur le net.   [...] le premier est un test qui permet d'étudier des interactions anticorps-antigène de façon qualitative, à bas débit. L'elisa est une méthode de dosage (quantitatif et qualitatif) qui permet de quantifier ou détecter des anticorps, antigènes ou d'autres substances capables d'interagir avec des anticorps.  [...]

[Biologie Cellulaire] protéins extrinsèques et intrinsèques

Ces protéines transmembranaires peuvent avoir un ou plusieurs passages au travers de la membrane (ces passages étant constitués d'hélices alpha) et sont généralement adaptées à la transmission de signaux. Les protéines extrinsèques, elles, n'ont peu ou pas d'interactions avec le coeur hydrophobe de la membrane.  [...] Elles se localisent donc du côté interne ou du côté externe de la membrane grâce aux interactions qu'elles établissent avec les têtes plaires des phospholipides de la membrance. Elles peuvent être ancrées par des association covalente avec un acide gras.  [...]