• Santé - Fixation, Protéines, Membrane

Définition | Western blot - Immunoblot | Futura Santé

des échantillons protéiques sont déposés sur un gel d'électrophorèse et sont séparés en fonction de leur poids moléculaire. Pour cela, un courant électrique est appliqué dans le gel. Plus les protéines ont une taille importante, moins elles migrent vite.  [...] une fois que les protéines ont migré, elles sont transférées sur une membrane qui peut être composée de nitrocellulose ou de polyfluorure de vinylidène (PVDF). La fixation des protéines à la membrane se fait grâce à des interactions hydrophobes et ioniques entre la membrane et les protéines.  [...]

[Biochimie] Western blot

Un facteur qui peut également jouer est la balance éthanol/SDS. Le SDS aide tes protéines à sortir du gel mais diminue leur fixation à la membrane. à l'inverse l'éthanol aide à la fixation mais empêche les protéines de sortir du gel. Tu peux donc essayer peut être d'augmenter la quantité de SDS et de baisser un peu l'éthanol.  [...] très intéressante cette discussion. Effectivement, est-ce qu'il serait possible d'avoir la référence de la publication sur l'utilisation du tampon de transfert pour les grosses protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] Binding tests sur enzyme

Je sais qu'il est possible de faire un test d'activité (mesure de l'activité de l'enzyme en présence des molécules inhibitrices) mais j'ai l'impression que ce test est difficile à mettre en place et assez coûteux (pour tester des milliers de molécules). Je sais qu'il est cependant nécessaire pour définir certains paramètres (donc à utiliser sur les molécules qui ont passés les tests de binding).   [...] Un test de binding sur cellule entière ou sur membrane isolée, c'est des étapes et des étapes (lavage, fixation...), des soucis de reproductibilité avec des lots de cellules qui vont produire plus ou moins de protéines, des soucis de sensibilité avec beaucoup de non-spé lié a l'absorption des molécules aux membranes.  [...]

[Immunologie] Besoin d'une restitution organisée de connaissance

definition. proteine immunoglobuline circulante du milieu interieur constitué d'une partie constante et d'une partie variable.  [...] les cellules cibles sont principalement des cellules immunitaires hagocytes et lt4.elles possedent des proteines membranaires cd4 qui permettent la fixation puis l'enrtrée du virus.  [...]

[Biologie Cellulaire] Emerine

- La lamine est une protéine qui est en contact avec la membre nucléaire interne. Elle est en contact grâce à un farnesyl de la membrane nucléaire interne (la membre d'un noyau possède des lipides ) et un acide aminé de la lamine. la cystéine. Elle possède aussi une séquence NLS de reconnaissance.  [...] Cependant, après je parle d'émerine, c'est une protéine de la membrane nucléaire interne ou pas Je ne suis pas sur, mais elle sert elle aussi de fixation à la lamine sur la MNI.  [...]

[Biologie Cellulaire] pbs et pbs tween

Dans le cas d'un marquage cytochimique, un lavage (supérieur à 5min) avec du PDS+tween va permettre de faire de petits trous dans la membrane cellulaire. Ainsi, tes composants pour la réactions pourront entrer plus facilement (je rappelle que tu ne peux absolument pas faire rentrer un atnicorps dans une cellule sans la perméabiliser).  [...] merci pour vos réponse j'ai pu en faire une petite déduction plus ou moins cohérente, je ne pense pas que le tween sert ici pour rendre la membrane poreuse vus que j'utilise ensuite de la proteinase K pour cela. je pense que ca doit être pour enlevé la PAF et limité les fixation non specifique.  [...]

[Divers] Système nerveux

Non ce n'est pas la même chose. Dire qu'il y a un changement de polarité signifie que la membrane est déjà polarisée avant sauf qu'après fixation du neurotransmetteur transitoirement le côté - - - - devient + + + + et inversement.  [...] Dans ce cas là, il s'agit de déplacements de charges à travers une membrane, les ions avant et après leurs déplacement sont les mêmes, leur degré d'oxydation n'a pas changé. Donc je ne vois pas où ces potentiels interviennent.  [...]

Hybridations plasmides et sondes

oui j'entendais plus propre dans la mesure ou on ne fait pas tremper les bactérie dans un milieu agressif et qui dégrade les membranes c'est tout. Et il me semble que la quantité intégrable dans un phage est assez restreinte du fait de la taille maximum d'encapsidation.  [...] Oui exactement, tu fais ca via un velour (buvard). Generalement, tu place ton velour sur l'appareil de replication, tu appliques sur ta boite d'origine, tu passes ensuite vers ta membrane, et avec le meme velour tu finis sur une boite de petri neuve. Utiliser le meme velour pour toutes repliques te permet de controler la qualite de ta replication.  [...]

Au secours la RMN va finir par m'achever...

Je suis en pleine période de révisions, exams obligent et j'ai beaucoup de mal à trouver des renseignements sur la technique RMN STD pour l'étude de la structure des protéines, qui consiste à saturer un signal pour mettre en évidence la fixation d'un ligand et sur quel site il se fixe (transfert d'irradiation et tout le blabla.  [...] Non par contre, on ne peut pas identifier le site de fixation sur la protéines. pour celà il faut passer en cristallographie par exemple.  [...]

peptide signal et ribosomes libres

Pour en revenir à ces protéines mitochondriales, elles sont transportées par une hsp 70 (je crois) qui utilise le cytosquelette pour rejoindre l'organite.Le chapperon hsp 70 utilise en fait les zones de rapprochements des 2 membranes mitochondriales pour insérer la protéine dans la lumière.  [...] En ce qui concerne le protéasome (prix Nobel de chimie 2004), il se trouve dans le cytoplasme et les protéines sont reconnues par fixation de l'ubiquitine. l'ubiquitine sert donc de signal de reconnaissance au protéasome pour dégrader la protéine. C'est un nouveau modèle de dégradation des protéines qui, apparemment, expliquerait cette dégradation beaucoup mieux que le modèle des lysosomes qui devient alors obsolète.  [...]