• Santé - Filtration, Avantage, Tampon, Concentration

[Biotechnologie] Gel filtration

Meme apres cette premiere etape de purification au cobalt la purete de ta proteine n'est pas absolue, c'est pourquoi on ajoute generalement d autres etapes, comme colonne echangeuse d ion et generalement on fini par une gel filtration pour ajouter un degree de purification (en fonction de la taille), tu vois egalement si ta proteine est monodisperse ou agregee.  [...] La gel filtration a aussi l avantage de pouvoir utiliser le tampon que l'on veut en fin de purification differente concentration en NaCl (tres utile apres une echangeuse d ion), et dans ton cas, meme apres dialyse c'est une facon d etre sur de ne plus avoir d imidazole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Eléctrophorèse

Le PAGE SDS dénature les protéines en rompant les liaisons hydrogène, donc si on obtient deux bandes à 50000 et 30000 cela signifie que la protéine est multimérique et contient au moins 2 sous-unités de ce poids moléculaire là.   [...] Je m'explique, oilà ma théorie et si elle est fausse, alors tout mon raisonnement est faux. si on prend le cas de l'hémoglobine, constituée de 4 chaînes de globine. 2 alpha et deux bêta, identiques 2 à 2. Si on fait une electrophorèse Page SDS, alors, on devrait obtenir 2 bandes.   [...]

dégradation de protéine recombinante

j'en ai déduis qu'il s'agit de formes de dégradation de la prot recombinante ou bien de prot contaminantes mais je sais pas trop comment les éliminer. je sais que l'on peut modofier les conditions de purif comme la concentration en imidazole du tampon de lavage.  [...] Si tu fais une gel filtration, c'est simple, tu concentres ta protéine autant que tu peux (dans un volume inférieur à 100 µl de preference). Tu fais ensuite circuler dans la colonne ton tampon A, tu injectes la protéine et les protéines se séparent toutes seules en fonction de la taille (les plus grosses d'abord, les plus petites après), il n'y a plus qu'a recuperer les fractions et trouver dans lesquelles se trouve la protéine.  [...]

[Biotechnologie] [sels] dans un tampon

Bonjour tout le monde, je possede dans une manip un tampon de lavage pour une chromato d'affinité sur du cobalt, et je saisis pas la forte concentration en sels (1000mM).  [...] J'en profite pour poser une autre question =) dans un tampon de gel filtration, je dis mettre du TCEP, et je n'ai aucune info quand a son utilité.  [...]

Absorbtion d'eau démineralisée

Bon.....quand j'aurais 5 minutes, je m'amuserai à calculer tout ça en prenant des concentrations nulles en ions pour l'eau distillée. Ca ne refletera certainement pas la réalité au plus proche de ce qu'elle est mais au moins ça nous donnera une petite idée.  [...] Bien sur, si c'est injecté, ça fait des dégâts. Mais par voie orale... 1L... hum. Quand on connait l'amplitude dilution/concentration des urines par les reins, et son débit de filtration.  [...]

[Biochimie] purification protéine alcaline

je dois effectuer une chromatographie gel filtration pour purifier une protéase alcaline,donc après équilibration de la colonne avec du tampon phosphate(pH7,6) je dois déposer l'échantillon,mais après pour récupérer les fractions à doser je ne sais comment faire.  [...]

Biochimie Sds

Voilà, dans un exo, on étudie une protéine par gel filtration dans un tampon aqueux à pH=7 qui présente un poids moléculaire apparent de 160 000 daltons.On soumet cette protéine à une électrophorèse sur gel en présence de SDS.La révélation montre 2 bandes correspondant à des poids moléculaires apparents de 50 000 et 30 000.  [...] Dans l'absolu vu les données initialement postées, ça me semble juste un exercice de compréhension globale d'une électrophorèse de type SDS-PAGE. Le but ici est de séparer les différentes sous unités par le poids moléculaire. C'est l'avantage du SDS qui confère une charge négative à chaque sous-unité et qui permet de les dissocier lors de l'electrophorèse uniquement en fonction de leur poids.  [...]

[Physiologie] définition et utilisation de la clearance rénale.

Je sais qu'on la mesure grâce à l'injection dans le sang d'un substance librement filtrée mais non réabsorbée. en l'occurence un petit polysaccharide. l'inuline. Ensuite on mesure sa concentration dans l'urine définitive, c'est ça Si oui alors cette mesure varit en fonction de la réabsorption de l'eau aucours de la formation des urines.  [...] Clairance ou filtration glomérulaire= [concentration urinaire de ta substance l'inuline par exemple]*le débit urinaire/[concentration plasmatique d'inuline].  [...]

Physiologie rénale

La clairance en général est la mesure de la vitesse à laquelle un produit disparait de l'organisme = coefficient d'épuration plasmatique. Au niveau du rein, elle reflète l'état de son fonctionnement ( pour être précis, l'état de la filtration glomérulaire), en étudiant le rapport entre le débit urinaire par minute, d'une substance, et sa concentration dans le plasma.  [...] Pour le rein on utilise la créatinine, substance azotée qui est un produit de dégradation du travail musculaire, et on calcule le nombre de ml de plasma que le rein peut épurer totalement en une minute.   [...]

Quelle est la différence entre eau de source et eau minérale ?

Les eaux de source sont naturellement propres à la consommation humaine. Les seuls traitements autorisés sont des traitements d'aération, de décantation et de filtration, qui permettent de jouer sur leur teneur en gaz et de réduire la concentration d'éléments instables, naturellement présents dans ces eaux, comme le fer ou le fluor.  [...] L'eau dite minérale est en fait une eau de source qui contient, dans des quantités qui peuvent être relativement importantes, des éléments, minéraux et oligoéléments, qui ont un effet sur la santé de ceux qui la boivent. En France, une eau ne peut porter l'appellation de minérale que si elle est reconnue comme étant bénéfique pour la santé par l'Académie de médecine.   [...]