• Santé - Facteur, Expression, Enzymes, Phase

[Biologie Moléculaire] Facteurs de transcription

1) Je ne comprends pas comment un facteur de transcription peut activer l'expression d'un gène de manière spécifique. Par exemple le facteur E2F n'active que l'expression de gènes codant pour les enzymes de la phase S et pas celui du gène (ou des gènes, bref) codant pour la myosine.  [...] 2) Les facteurs généraux de transcription (les TFIIX) si j'ai bien compris sont toujours présents lors de l'initiation de la transcription de n'importe quel gène alors que les facteurs de transcription spécifiques n'agissent que sur les gènes dont ils sont spécifiques (par exemple E2F sur les gènes codant les enzymes de la phase S), est-ce bien ça.  [...]

Facteur sigma

L'ARN polymérase procaryote est composée d'une enzyme-cSur (E) et d'une sous-unité sigma. Chez Escherichia coli, il existe 7 facteurs sigma qui permettent la reconnaissance spécifique d'une classe de promoteurs. Le facteur sigma70, protéine indispensable, contrôle l'expression de la majorité des gènes au cours de la phase de croissance.  [...] L'entrée en phase stationnaire ainsi que certaines conditions de stress permettent l'induction du facteur sigmaS qui contrôle alors l'expression de nombreux gènes impliqués dans des fonctions comme la résistance aux stress, la réparation de l'ADN ou la virulence.  [...]

[Divers] procréation

Normalement dans les deux cas tu dois observer un développement des canaux de wolff et dans un seul des cas une régréssion des canaux de muller.   [...] La protéine TDF est en fait un facteur de transcription. elle régule l'expression de nombreux gènes, dont celui qui permet la synthèse d'enzymes nécessaires à la fabrication de testostérone.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage orienté, design d'amorces

pour pGEX 5X 1, après la GST tu as le site de cleavage avec le facteur Xa et après avant le stop BamHI... XhoI... NotI. il faut donc cloner ton géné d'intérêt avec ou sans l'atg de départ (ça ne change rien) entre ces enzymes et avec ou sans stop puisque de toutes façons il reste un stop derrière. Bien vérifier que tout est en phase.  [...] ..). Car le sous-clonage (vecteur de propagation ) permet d'avoir une grosse quantité de son insert, propre, et avec les extrémités adéquates pour ensuite refaire un clonage mais dans le vecteur d'expression de la future protéine recombinante.  [...]

cortisol :glycogènogenese vs glycogénolyse

ben si, cela stimule la néoglucogénèse plutôt... Faire quand meme attention entre. facteur stimulant l'activité ou l'expression d'une enzyme et facteur stimulant une voie toute entière.  [...] Stimuler la glycogene synthase ne signifie pas forcément que le cortisol possède un rôle hypoglycémiant. Il ne fait que stimuler et soutenir l'activité de l'enzyme pour le glucose qui est déja présent dans la cellule, et cela, lorsque le cortisol est à un taux basal.  [...]

Nouvelle stratégie pour la thérapie génique

L'équipe a injecté dans des souris modèles de l' hémophilie le gène codant pour le facteur de coagulation IX lié a une site attB. Au même moment certaines souris ont aussi reçu une injection de l'enzyme intégrase. Après une semaine les souris ayant reçu le traitement à l' intégrase ont montré une expression 12 fois plus importante du facteur IX, que les souris non traitées.  [...] Démontrant ainsi que l'intégrase avait bien permis l'intégration et l'expression du transgène dans les chromosomes de la souris.  [...]

au secours ... cycline, Rb et e2F cycle cellulaire...

Ok, alors...Le complexe cdK2/Cycline E est impliqué dans la transition G1/S et a pour cible la protéine Rb. Rb est effectivement un piegeur de E2F. si Rb est phosphorillé par cdK2/Cycline E, alors il y a relarguage de E2F qui va, comme tu l'as dit, active la réplication de l'ADN (car E2F va activer l'expression d'une polymérase).  [...] p53 induit le blocage du cycle cellulaire en induisant l'expression de p21 (inhibiteur de CyE/cdk2). Donc p21 activé, inhibition de CyE/cdk2, pas de phosphrylation de Rb donc Rb reste attaché à E2F et donc E2F ne peut pas jouer son rôle de facteur de transcription. Au final, la cellule est bloquée en phase G1.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression ectopique

j'ai besoin de votre aide afin de savoir comment réalise-t-on une expression ectopique sur un facteur de transcription dans le cadre d'une différenciation.  [...] On peut tout simplement transfecter un plasmide codant le facteur de transcription. Reste à savoir si l'expression du facteur de transcription doit être stable dans le temps. Si c'est le cas, alors il faut sélectionner les cellules ayant intégré le plasmide à leur génome. transfection stable.  [...]

Comment les cellules arrivent à s'adapter?

Pas forcément si on imagine un facteur de transcription dont l'expression est régulée par rétrocontrôle positif (ex. le facteur de transcription joue son rôle et en même temps active sa propre expression). Bien sûr ça n'est qu'une hypothèse.  [...] Mais de toute facon tu as parfaitement raison dans le sens où lorsque j'enlevais les anticancéreux de mon milieu, l'expression de la pompe diminuait progressivement ce qui démontre bien une certaine inertie du système d'expression mais qui n'est pas infinie, donc l'hypothèse des facteurs de transcription reste, selon moi, valable.  [...]

Normalisation RT-PCR quantitative

Le problème, c'est que tes 2 échantillons ne sont pas probablement tout à fait à la même concentration. Pour corriger ce facteur, on réalise souvent une 2e PCR avec un gène de contrôle dont l'expression est censée ne pas varier entre les 2 conditions. Dans ce cas, tu vas comparer l'écart de cycle entre le Ct de ton gène-cible et le Ct de ton gène de contrôle dans chacun des 2 échantillons.  [...] Petite info. comme l'unité de mesure de la PCRq est logarithmique, toute différence d'expression inférieure à un facteur 2 (i.e. une différence d' 1 Ct) est non significative.  [...]