• Santé - Extraction, ADN, Classique

rDNA ou rRNA?

Et quand on fait la classique extraction d'ADN à partir de cellules vgales broyées, dans l'ethanol, l'amas floconeux plusoumoins chevelu c'est un mélange n'est-ce pas.  [...] Pour la classique extraction, l'amas floconneux est bien un melange des ADN totaux. D'ailleurs c'est marrant les extractions fait maison, avec que des produits que l'on trouve chez Mr tout le monde. Pour la fete de la science il y avait pas mal d'endroit ou ils faisaient ca.  [...]

[Biologie Moléculaire] Effet de coloration MGG sur l'extraction d'ADN à partir des frottis colorés

Je suis entraine d'extraire d'éventuel ADN parasitaire à partir de frottis coloré au MGG (may grunwald Giemsa), et j'ai constaté que lorsque j'extrais à partir d'une lame non colorée j'obtiens de l'ADN, mais quand la lame est colorée au MGG je n'ai rien, ni ADN de l'hôte ni celui du parasite (pas de bande sur mon gel contôle).  [...] à noter. j'utilise la méthode classique d'extraction (phénol-chloroforme) et bien sure je fais une étape de purification d'ADN quand ma lame est colorée.  [...]

[Biochimie] TPE sur l'ADN

- l'extraction totale d'ADN. C'est celle que l'on effectue, par exemple, sur des prélèvements de sang ou des cellules de l'épithélium buccal).  [...] - le deuxième type d'extraction est l'extraction différentielle. il s'agit ici de séparer de l'ADN provenant de deux fractions différentes. Exemple le plus courant. mélange de cellules épithéliales (fraction féminine) et de spermatozoïdes (fraction masculine) que l'on peut retrouver sur des prélèvements de type préservatifs, écouvillons vaginaux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN ( ADN simple brin)

je sollicite votre aide, je suis entrain de mettre en place une technique d'extraction qui au final me donne de l'ADN simple brin... j'aimerai faire une purification sur colonne de silice, malheureusement j'ai l'impression que mon ADN n'est pas élué il reste accroché à la silice, car après avoir fait plusieurs real time en comparant ma technique avec une technique classique sur colonne de type Qiagen, les Cp sont très différent j'obtiens un Cp de l'ordre de 13 pour Qiagen et d'environ 20 pour ma technique.  [...] je pense que j'ai pas donné assez d'informations, ma technique d'extraction est différente de celle de Qiagen ( protéinase K, sels chaotropique...), en tout point, sauf que j'utilise les différentes solutions ( AW1,AW2) de la compagnie Quiagen pour les différents lavages, et je dépose mon extrait( non purifié, extraction de type alcool et sels) sur une colonne de silice pour purifier, on utilise la solution de Qiagen le AE pour l'élution.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

Tout dépend pour quoi tu veux réaliser une extraction d'ADN. Je vais essayer de l'expliquer dans le cadre d'une extraction d'ADN pour les bactéries.  [...] - Pour cela, il faut utiliser du phenol pH8 ou 4 (je ne sais plus... l'un est utilisé pour l'extraction d'ARN et l'autre pour l'extraction d'ADN).  [...]

[Biologie Moléculaire] protocole extraction ARN (pas de kit, ni trizol)

Essaye un protocole d'extraction d'ADN classique, lyse avec un détergeant, puis précipitation a l'alcool. Si tu manipules proprement alors tu auras de l'ADN et de l'ARN.  [...] J'ai fait des extractions d'ARN dans ma jeunesse avec du phénol Chloroforme-alcool isoamylique mélange 1/1 et ça marchait très bien. Problème c'est long, assez lourd et les quantités récupérées sont certes impressionnantes mais pas reproductibles.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Pour l'éthanol, au labo, on en a deux sortes. L'éthanol 100% classique (en fait 99%), que l'on utilise pour les tampons etc... Et l'éthanol ultra pure (99,999% certifié) pour les manips les plus précieuses (précipitation de l'ADN par exemple). Et je confirme que le méthanol est de moins en moins utilisé, à cause des coups de son élimination (toxique, donc pas dans l'évier.).  [...] Le plus long est l'étape d'extraction de l'ADN, car il faut un temps d'attente d'une nuit (environ 16h). Puis l'extraction en elle même n'est pas spécialement longue (2-3h). Dans mon ancien labo, on préférait que l'ADN se re-suspendre après purification sur la nuit également, à 4°C, mais cela n'est pas obligatoire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN de cellules eucaryotes, lyse

le phénol et le chlorophorme permettent de solubiliser d'une part les protéines et les lipides d'autre part, cela fait partie de l'extration à part entière ou bien ces produits interviennent-ils également dans la lyse des cellules.   [...] pour la suite du protocole d'extraction d'ADN, on utilise le phénol et le chlorophorme à partir de notre lysat cellulaire c'est bien ça ou bien doit-on préalablement centrifuger pour éliminer l'eau.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse en gel d'agarose pGFP

J'ai réalisé sur un plasmide pGFP une extraction classique puis un traitement à la Rnase et parallèlement une digestion avec BamHI.  [...] Pour la piste après le marqueur de taille, c'est l'extraction avec kit, (+Rnase) je m'attendais à avoir plusieurs fragments d'une intensité supérieure à la méthode classique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique.  [...] Je les ai légender après en fait et pour le deuxième le professeur dit que les bandes juste en haut qui sont très claires sont de différentes tailles mais il a rien dit de plus, théoriquement nous devrions avoir une deuxieme bande en bas mais je suppose aussi qu'il n'y avait pas assez d'ADN.  [...]