• Santé - Expression, Système, Cellules, Intérêt

[Biologie Moléculaire] Transduction lentivirale

Bonsoir tout le monde. J'ai fait une transduction lentivirale sur des lymphocytes T CD8+ dans le but d'augmenter l'expression d'un gène (système CRISPR). Une validation a d'abord été faite sur des cellules HEK qui n'expriment pas le gène de base et ça avait bien marché.  [...] Je crois que je n'ai pas été clair. En fait je veux augmenter l'expression du gène en utilisant le système CRISPRa délivré dans mes cellules d'intérêt (des lymphocytes T CD8) par une transduction lentivirale.  [...]

[Biologie Moléculaire] Eteindre expression d'un gène dans un organe/tissus bien précis

Est ce que quelqu'un sait comment on peut faire pour éteindre l'expression d'un gène dans un organe bien précis. Car on a un exercice ou on fait la transformation par agrobacterium d'un gene. Ce gène a un impact positif sur le méristeme floral de la plante mais a un impact négatif sur le systeme racinaire.  [...] Je tiens à préciser que je n'ai pas de connaissances spécifiques en plantes, mais je pense à cette option. un transgène dont le promoteur est spécifique du système racinaire et dont le transcrit est complémentaire à l'ARNm de ton gène cible. Avec le mécanisme d'interférence à l'ARN, tu éteins l'expression de ton gène d'intérêt dans les cellules voulues.  [...]

ARN double-brins

Dicer reconait l'ARN double brin et le clive en fragment d'environ 22 nucleotides. Ces fragments d'ARN vont etre reconnus par un autre complexe moleculaire, le RISC (RNA-induced silencing complex) qui lui est responsable de la degradation du messager. De ce que je crois savoir, PKR est une RNA-dependent kinase et un systeme de defense non specifique, c'est a dire que cette enzyme est responsable de l'arret de traduction general lorsque des ARN double brins sont presents ce qui a laisser croire que le gene silencing chez les mammiferes seraient impossibles.  [...] bein oui l'intérêt du système c'est qu'il s'autoamplifie sinon on aurait du mal à avoir des inhibitions d'expression qui perdure pendant plus de 3 jours.  [...]

La technique des ARN interférents pour soigner les maladies oculaires

L' interférence par ARN est un phénomène naturel découvert récemment par lequel la présence d'un ARN double brin d'un gène entraîne la dégradation spécifique, rapide et efficace de l'ARN messager correspondant. Le mécanisme d'action du RNAi et sa fonction biologique ne sont pas encore bien connus.  [...] Il est possible que le RNAi représente un système de protection du génome contre les acides nucléiques indésirables, ou un mécanisme sophistiqué impliqué dans le contrôle de l'expression des gènes. Dans les laboratoires de recherche, cette technique est utilisée pour inhiber spécifiquement l'expression d'un gène d'intérêt.  [...]

Grippe : production de souches vaccinales et essais cliniques | Dossier

par la production d'une hémagglutinine recombinante dans un système d'expression de type baculovirus (Nwe, He et al. 2006 51 ) dans lequel un baculovirus génétiquement modifié pour l'expression de HA est introduit et propagé dans des cellules d' insectes en culture.  [...] L'immunogénicité et la tolérance d'un vaccin exprimant l'hémagglutinine recombinante H5, générée par un système d'expression baculovirus à partir d'un isolat humain, de la souche A/Hong Kong/156/97 (H5N1) ont été testées chez 147 adultes sains. une immunité protectrice est atteinte uniquement dans 50 % des cas, pour les dosages les plus élevés d'hémagglutinine (90 &mu.  [...]

Animaux transgéniques

Une petite question à propos de l'expression conditionnelle de gènes chez les souris transgéniques. comment fonctionne le système Cre_ Lox, son intérêt dans le knock out knock in.  [...] La cre (recombinase) est placée sous le controle d'un promoteur qui code pour un gène s'exprimant soit à un certain moment, soit selon une localisation précise, soit les deux (il existe certains raffinements, ex. système CreER T2 ).  [...]

Des cellules souches victimes de rejets immunitaires gênants

En revanche, si des tératomes sont aussi observés chez les souris ayant reçu les cellules souches pluripotentes induites obtenues à partir de fibroblastes reprogrammés (par utilisation d'un vecteur rétroviral ou par épisome), ils sont quant à eux attaqués et rapidement détruits par le système immunitaire, en particulier par l'action de nombreux lymphocytes T.  [...] Ceci peut s'expliquer par les fortes différences d'expression génique observées entre les cellules souches pluripotentes induites et les cellules souches embryonnaires. Parmi les gènes retrouvés dérégulés, Zg16 et Hormad1 sont fortement exprimés et pourraient être à l'origine de la non-tolérance du système immunitaire.  [...]

Aide article : Système d'expression protéique hautement régulé, modulé et à haut niveau (PBAD)

Pour les cellules humaines, le système le plus utilisé actuellement est le système Flip-In T-Rex de Thermo Fisher. Ce système permet une expression uniforme, précisément contrôlée, avec un temps d'activation faible et pas ou peu de fuites transcriptionnelles en absence d'induction.  [...] Je ne connais pas les taux d'expression que l'ont peut atteindre avec ce système, ça n'intéresse pas grand monde d'ailleurs. On se dirige plutôt vers une expression proche des niveaux endogènes que l'inverse ces derniers temps.  [...]

Cancer et système immunitaire | Dossier

Figure 27. Échappement de la réponse immunitaire par les cellules cancéreuses. Les cellules cancéreuses peuvent supprimer l'expression du CMH ou être peu immunogènes pour devenir invisibles vis-à-vis du système immunitaire. Elles peuvent aussi créer un microenvironnement tumoral immunosuppresseur qui inhibe l'immunité antitumorale. Grégory Ségala.  [...] Une tumeur est hétérogène puisqu'elle est composée de plusieurs populations de cellules cancéreuses. Certaines cellules cancéreuses peuvent être peu immunogènes, c'est-à-dire qu'elles ont une faible capacité à activer le système immunitaire car elles présentent peu ou pas d'antigènes du non-soi à leur surface.  [...]

Une arme étonnante contre le mélanome : la dangereuse salmonelle

C'est là qu'intervient Salmonella typhimurium, une des bactéries responsables de la salmonellose (maladie entraînant des diarrhées et des fièvres parfois mortelles). En effet, des recherches menées à l' Istituto Europeo di Oncologia (IEO) à Milan montrent que l'injection de salmonelles dans des souris atteintes de mélanome rétablit l'adhésion et la communication des cellules cancéreuses grâce à l'augmentation de l'expression des Cx43.  [...] Quel est le mécanisme entrant en jeu L'expression des Cx43 permet aux mélanocytes de rétablir un lien avec les cellules dendritiques. Celles-ci appartiennent au système immunitaire et se comportent comme des cellules présentatrices d' antigènes. Bien qu'habituellement les antigènes exposés à leur surface proviennent de leur propre cytoplasme, certains antigènes peuvent provenir de cellules voisines via les jonctions communicantes.  [...]