• Santé - étape, Clonage, Vecteur

[Biochimie] principe

bonjour j'aimerais savoir le principe de chaque étape du clonage par le vecteur pGEM.  [...] Ben non, là je ne vois même pas quoi dire devant cette question sortie de nul part. Renseignez vous un peu et revenez quand vous aurez quelque chose de précis à demander.   [...]

[Biologie Moléculaire] Contruction d'un fragment d'ADN à partir de produits PCR

mais j'ai un doute. je me demandais si je pouvais liguer mes trois fragments en même temps sans passer par une étape de clonage, c'est à dire que la ligation ne se fasse pas par un vecteur.  [...] A mon avis tu pars dans la mauvaise direction. Ton probleme ressemble plus a une contamination qu'a une mauvaise amplification. Pour moi le probleme vient de annealing de tes produits PCR. Si tu n'a pas a la base un bon pool de produit a amplifier, la taq va amplifier tout et n'importe quoi (surtout n'importe quoi d'ailleurs).   [...]

[Biologie Moléculaire] Ligation

Moi ce que je fais dans ce genre de cas, c'est que je passe par une etape de sous clonage dans un vecteur type pBC (resistance chloramphenicol) je ressort l'insert par les enzymes et je clone dans mon vecteur final (resistant ampi). Les differences de resistances m'empeche d'avoir des problemes de contamination d'un vecteur par un autre.  [...] j'ai eu le meme probleme il n'y a pas longtemps avec un insert de 7 kb (oui 7000 pb.). Je suis passé par un vecteur de sous clonage type TOPO TA cloning et je l'ai ressorti et cloné nickel. C'etait donc bien un probleme de digestion de mes fragments au départ (malgré les nucléotides supplémentaires rajoutés lors du design en 5').  [...]

[Biologie Moléculaire] vecteur de clonage et le vecteur d'expression

[Biologie Moléculaire] vecteur de clonage et le vecteur d'expression.  [...] Vecteur de clonage. Destiné à isoler physiquement un fragment d'ADN et à amplifier le nombre.  [...]

[Biotechnologie] vecteur de clonage et vecteur d'expression

[Biotechnologie] vecteur de clonage et vecteur d'expression.  [...] Pourriez-vous m'expliquer la différence entre un vecteur de clonage et un vecteur d'expression.  [...]

[Biotechnologie] Vecteur d'expression.

Décrivez les étapes (méthode de clonage, nature des amorces, condition d'hybridation, type de vecteur, gène rapporteur etc...) qui vous permettraient de préparer.  [...] un vecteur d'expression comportant 2 régions régulatrices, un promoteur P (200b) et une région amplificatrice E1 (600b) issues de 2 gènes différents. Les extrémités 5' et 3' de P et E1 sont franches et ne peuvent pas être coupées par une enzyme de restriction.  [...]

vecteur de clonage et d'expression

Y a-il une différence entre vecteur d'expression et vecteur de clonage.  [...] Un vecteur de clonage permet uniquement le transport et la multiplication de l'ADN inséré dans une cellule hôte.  [...]

transgenèse

est ce que c'est un vecteur avec des caracteristiques particulières ou est ce que l'on appele vecteur binaire tous les vecteurs de transfert et les caractéristiques varient d'un vecteur à l'autre.  [...] Ben j'ai répondu pourtant. C'est un vecteur, donc un système porteur d'une séquence d'adn destinée à être transférée dans un autre organisme. Mais ce même vecteur peut-être utilisé pour le clonage, c'est-à-dire qu'il est capable de se répliquer dans une bactérie E.  [...]

Questions sur les éléments d'un vecteur de clonage

J'ai quelques questions concernant les différents éléments d'un vecteur de clonage type plasmide.  [...] -Une fois la transfection effectuée, on doit sélectionner les bactéries ayant bien reçus ce plasmide sur milieu avec antibiotique. Encore une fois, ce fameux codon stop empêche selon moi la transcription du gène de résistance et donc ne permet pas aux bactéries de devenir résistantes.   [...]

vecteurs

bonjour,quelqu'un pourriat il m'indiquer la différence entre un vecteur d'expression et un vecteur de clonage merci beaucoup.  [...] un vecteur de clonage a pour fonction d'amplifier un bout d'ADN (codant pour un gene la plupart du temps), ca correspond typiquement a un plasmide qui possede les sequences necessaires de selection et de replication.  [...]