• Santé - Enzymes, Restriction, Fragment, ADN

[Biologie Moléculaire] Enzymes de restriction VS fragment d'ADN

J'ai une petite question concernant le mode de fonctionnement d'une enzyme de restriction lors de la digestion d'un fragment d'ADN.  [...] Combien de paires de bases nécessite une enzyme de restriction de part et d'autre de son site de reconnaissance afin qu'elle puisse opérer la coupure du fragment dans les meilleures conditions.  [...]

[Biotechnologie] Construction plasmidique

Premièrement je digère un fragment d'ADN génomique avec les enzymes de restriction afin de récupérer le gène à intégrer.  [...] Tu récupère ton gène à intégrer dans ton plasmide en l'amplifiant par PCR, c'est ensuite que tu digére t'es amplifiants en utilisant les mêmes enzymes de restriction que tu utilise pour digérer ton plasmide.  [...]

[Génétique] Thérapie génique: synthétiser le gène correcteur

Et le nombre et la taille des fragments d'ADN obtenus avec une enzymes de restriction dépendent du nombre de fois où la séquence reconnue par l'enzyme est répétée au sein de la molécule d'ADN. Et donc le choix d'une enzyme de restriction dépend de la taille des fragments que l'on désire.  [...] Merci beaucoup. J'ai une autre question. Comment fait-on pour insérer le fragment d'adn obtenu par les enzymes de restriction dans le vecteur.  [...]

clonage/enzyme en dehors du site multiple de clonage

Bonjour à tous, je vous sollicite pour une petite question. Lors d'un TP, j'ai inséré un fragment d'ADN dans un plasmide et derrière, pour vérifier la ligation, j'ai digéré le plasmide avec les 2 enzymes de restriction utilisé à la base et après migration sur gel il se trouve que au lieu d'avoir 2 fragments attendus (un fragment correspondant à mon plasmide et un fragment correspondant à mon insert) je n'ai qu'une seule bande.  [...] Il se peut que ton MCS ait été enlevé au cours du clonage (c'est normalement peu probable si tu as bien designé ton clonage). Il se peut également que le plasmide de départ soit muté et ne possède pas certains sites de restriction (également assez peu probable).  [...]

[bio mol] pUC et LacZ

- si ton insert se trouve dans un fragment d'ADN bordé de sites reconnus par les mêmes enzymes, tu vas pouvoir isoler ce fragment de ton ADN de départ (par restriction) et le coller (ligaturer) dans ton vecteur.  [...] S'il n'y avait qu'un seul site de clonage, tu aurais une grosse contrainte sur ton ADN de départ et donc presque jamais la possibilité de le découper pour en isoler ton fragment d'intérêt (ou alors, tu aurais à l'amplifier avec de amorces portant le site de restrictions, ce qui est plus lent et peut génerer des erreurs).  [...]

Définition | Clonage | Futura Santé

Le terme de clonage désigne aussi une méthode de multiplication in vitro d'un gène ou d'un fragment d' ADN. Le clonage cellulaire, souvent utilisé dans la recherche médicale, permet de multiplier une cellule en de nombreux exemplaires. Pour cloner un gène, les scientifiques utilisent des enzymes de restriction qui découpent l'ADN en des endroits précis.  [...] Les clones qui portent des copies de fragments du génome forment une banque génomique. Les phages, des virus qui infectent les bactéries, servent aussi de vecteurs pour la construction de ces banques. Une banque génomique, bactérienne ou phagique, couvre tout le génome d'un organisme.  [...]

[Génétique] Rflp

1) -. sur le chromosome, un frgament de restriction est-ce bien un fragment entre deux sites de restrictions ( la ou les enzymes de restrictions peuvent couper l 'adn ).  [...] 2) un fragment de restriction peut être n'importe quel morceau d'ADN, qu'il soit codant ou non codant. La présence de sites n'a absolument rien a voir avec la fonction de l'ADN.  [...]

microbiologie (sens anti-sens)

.) qui va coupé a des site bien précis, on aura plusieurs fragment d'ADN, on met les fragment dans un gel d'agarose par exemple et on laisse les fragment migré(cartographie de restriction)===. au final au aura la taille (base) de chaque fragment.  [...] on a deux plasmide, on va transplanter pour chacun un fragment d'ADN, on partique l'experience avec des Enzyme de restriction et ensuite on place les fragment dans un gel et on laisse migré(cartographie de restriction).  [...]

[Biologie Moléculaire] inverse PCR

La RT-PCR est une technique utilisant la reverse transcriptase qui est une enzyme provenant des rétrovirus. Cette enzyme permet de transformer l'ARN en ADNcomplémentaire. La RT-PCR est donc une technique de PCR classique sur un ADNc obtenu à partir d'un ARNm.  [...] Inverse PCR. technique qui utilise des enzymes de restriction et des ligases afin de pouvoir réaliser une PCR sur un fragment d'ADN dont la séquence est en grande partie inconnue.  [...]

[Biologie Moléculaire] RFLP: génie génétique et diagnostiques

1)comment est ce possible J'ai cru comprendre que l'heterozygote a 3 fragments.les deux fragments(correspondant aux personnes saines) et un autre plus longs(site de restriction modifie,celui du muté).  [...] C'est pas un fragment d'adn en plus c'est qu'entre 2 allèle la séquence n'est pas la meme donc les enzymes de restriction ne les digère pas de la meme maniere.  [...]