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[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

On pourrait même imaginer que se sont les virus eux même qui ont inventé les premiers génomes ADN. Pour quelle raison Peut etre pour se protéger des enzymes de restriction ARN-dépendante des cellules.  [...] Les virus utilise couramment des modifications chimiques de leurs acides nucléïque. Par exemple les bactériophages apparenté à T4 modifient leurs cytosines en hydroxymethylcytosine (HMC) pour se protéger des systèmes de restrictions de leurs hôtes. Beaucoup de virus Eucaryotes codent pour des fonctions de méthylation de leurs bases, toujours pour se protéger des enzymes de restriction des cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] ADNc et recombinaison

Bonjour je suis étudiant en médecine et on vient d'étudier l'ADNc la maturation de l'ARN et les enzymes de restriction.  [...] Je compte donc le nombre de bases entre le codon ATG et le codon GAATTC, je trouve 400 mais la réponse donné en correction est 400+300.   [...]

Enzymes de restriction

Bonsoir, lorsque l'on veut étudier les ARN ribosomaux, ou d'autres séquences, pourquoi utilise t-on plusieurs enzymes de restrictions Je sais que chaque enzyme a un site de restriction spécifique mais je n'arrive pas à comprendre l'utilité de cette technique.  [...] J'ai effectué des recherches sur internet mais je ne vois ce que l'on veut nous faire dire... En espérant que ce soit plus clair pour vous, car pour moi, c'est toujours le flou complet.   [...]

Trisomie : la troisième copie du chromosome 21 réduite au silence

Leur premier défi était d'insérer un fragment aussi long (17 kb) dans des cellules issues d'un patient atteint d'une trisomie 21 et mises en culture. Après s'être fait la main sur le chromosome 19, ils ont utilisé des enzymes de restriction particulières, appelées nucléases à doigt de zinc, pour apporter Xist dans le noyau des cellules.  [...] Mais ce n'est pas tout. Car après cette réussite au niveau quantitatif, les auteurs ont voulu vérifier l'efficacité au niveau qualitatif. Leurs observations montrent que le traitement permet de corriger les profils anormaux de croissance et de différenciation cellulaires observés chez les cellules trisomiques.  [...]

[Immunologie] Réarrangement des chaînes lourdes et légères

De l'ADN était isolé de trois sources. des cellules hépatiques, des cellules de lymphome pré-B et des cellules de myélome sécrétrices d'anticorps. Chaque échantillon d'ADN était digéré séparément avec les enzymes de restriction BamHI et EcoRI qui clivent l'ADN des chaînes lourdes et des chaînes légères º de la lignée germinale comme il est indiqué dans la partie (a) de la figure d'accompagnement. Les échantillons digérés étaient.  [...] D'après mes premières observations je dirai que les cellules pré-B correspondent à la piste A puisque que ce sont les seules à avoir un réarrangement au niveau des chaînes légères, correspondant pour moi au deux bandes présentes sur le second southern blot.  [...]

Enzymes de restriction

La méthylation de certaines bases, chez les bactéries, permet, si j'ai bien compris, d'éviter à l'ADN d'être découpé. Et donc pour éviter que son ADN soit découpé, la bactérie méthyle les bases qui correspondent à son (ses) enzymes de restriction... C'est cela.  [...] Les enzymes de restriction n'ont aucune activité sur l'ARN (d'autant que celui-ci est simple brin). Maintenant il existe d'autre enzymes pouvant clouper l'ARN spécifiquement apres certains residus, ou spécifiquement quand l'ARN est sous forme double brin.  [...]

amplification de l'ADN

Dans une cellule, les facteurs de transcription sont des protéines qui se fixent à l'ADN sur des séquences spécifiques (séquences régulatrices), et vont permettrent à leurs gènes cibles de s'exprimer ou non. Ca marche dans les deux sens.  [...] Et oui, il est également possible de faire des couper/coller de bouts d'ADN avec des enzymes de restriction. C'est comme ça qu'on fait des vecteurs pour transfecter des gènes dans des cellules. Mais c'est pas non plus de la PCR et on se sert pas d'amorces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

Me revoilà avec les résultats de mon petit test d'induction en BL21. L'induction (2 heures) semble avoir parfaitement fonctionné et j'obtiens donc ma protéine (exposition du WB à l'ECL à peine 1 seconde suffit). Parfait. Seulement j'ai toujours ces bandes parasites que je trouvais dans les DH5alpha et que j'attribue à de la dégradation.   [...] Y-a-t-il un moyen que je transfecte ca dans des cellules eucaryotyes Je pense que je connais la reponse mais je tente... Ou bien il me faudra sous-cloner ma sequence dans un autre plasmide genre pcDNA3 classique par exemple, n'est-ce pas (si j'arrive a connaitre les enzymes de restriction pour ce faire...).  [...]

mode action enzymes de restriction dans une cellule

Bonjour à tous, mon prof a dit en cours que certains polymorphisme se situaient dans des endroits où les enzymes de restriction coupaient. mais dans une cellule, quel est l'intêret du mode d'action d'une enzyme de restriction.  [...] c'est un moyen de défense pour les bactéries. les enzymes de restriction permettent de dégrader de l'ADN étranger. par exemple, on peut supposer qu'E.coli n'a pas de séquence cible à EcoRI dans son génome (EcoRI est une enzyme provenant d'E coli).  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

Apres on a utiliser les des enzymes de restriction HINd3 et ECOR1, si j'ai bien compris ces enzymes vont decouper l'ADN plasmidique en plusieurs parties, je me trompe.  [...] est ce que les enzymes de restriction vont decouper les plasmides de HRPN, PGAG, etc... de la meme facon Mais je ne pense pas en fait avec ce que vous m'avez expliqué avant, ca depend de la carte de restriction.Elles sont trouvables sur internet ces fameuses cartes Il parait qu'on connait parfaitement E.coli aujourd'hui.  [...]