• Santé - Enzyme, Substrat, Dosage

[Immunologie] Protocole ELISA

Les puits sont ensuite rincés. si l'anticorps secondaire n'est pas fixé, il sera éliminé. On ajoute ensuite de l' eau oxygénée, substrat de l'enzyme. Si l'enzyme est présente, l'eau oxygénée sera transformée en deux molécules d'eau et la couleur de la solution sera modifiée. Le dosage se fait par spectrophotométrie.  [...] Pensez vous qu'on puisse réellement faire un dosage colorimétrique avec l'enzyme peroxydase et de l'eau oxygénée en substrat.  [...]

[Biochimie] pH optimal et Stabilité d'une enzyme

je te remercie énormément d'avoir répondu à mes questions et j'en ai d'autres. C'est que la biochimie n'est pas vraiment mon domaine et j'ai parfois des petits casse-têtes. Pour déterminer le pH optimal de mon enzyme, faut-il incuber l'enzyme et le substrat à un pH donné pendant un certain temps et effectuer le dosage.  [...] .. ou incuber l'enzyme seul au pH désiré pendant une certaine période puis, ajouter le substrat par la suite et effectuer immédiatement le dosage.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

- L'unité d'activité enzymatique (UAE). c'est la quantité d'enzyme qui produit la transformation d'une micromole de substrat par minute à 25°C dans les conditions optimale de dosage (pH, T°C,...).  [...] - L'activité enzymatique moléculaire (AEM). c'est le nombre de molécules de substrat transformé par minute et par molécule d'enzyme.  [...]

proteinesdans le culot ou le surnageant

apres je prend le cullot obtenue et je le resuspend dans 1 mL de triton Hcl 100x et puis j'effectue une deuxieme centrifugation a 10000 g pendant 10 min puis je dose les proteines dans le surneagant.   [...] je prend un morceau de foie de poids = 35 mg, je le broie avec un tampon tris contenant le substrat de l'enzyme que je veux doser son activité. Le dosage d'activité se fait par une méthode colorimétrique.  [...]

[Microbiologie] Production ethanol avec Saccharomyces cerevisiae

le dosage est basé sur la réaction catalysée par l'alcool déshydrogénase (dernière enzyme intervenant dans la fermentation alcoolique), oxydo-réductase à NAD qui utilise, ici, l'éthanol comme substrat.  [...] Enfin je crain que votre dosage de l'éthanol ne fonctionne pas car je suis quasi sur que votre milieu de culture absorbe déjà beaucoup à 340nm. Ce genre de dosage doit marcher dans des conditions ou l'alcool est pur ou presque et ou on ajoute l'ADH purifiée elle aussi.  [...]

[Biochimie] Dosage de la phosohatase alcaline d'un sérum

Je fais un laboratoire sur le dosage de la phosphatase alcaline. Le substrat de cette réaction est le para-nitrophényl phosphate qui se fait hydrolyser par l'enzyme en para-nitrophénol qui est de couleur jaune, qui se fait doser par spectrophotométrie.  [...] Dans deux tubes différents nous mettons du substrat alcalin en excès. On les incube 5 mins à 37oC. Ensuite, dans le tube blanc, on ajoute de l'eau et dans le tube test du sérum, qui contient l'enzyme à doser.  [...]

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase.  [...] j'ai besoin énormément d'un protocole de dosage de l'enzyme glycosyltrasferase.  [...]

[Biochimie] dosage enzyme pour quoi utiliser le bain-marie ?

Je pense que pour la préparation du tissu dans le tampon, on dit qu'il faut travailler dans la glace 4C°,c'est pour inactiver l'enzyme(par le froid) et éviter l'augmentation de la température du tissu lors du broyage et de ce fait éviter la dénaturation de l'enzyme, car une enzyme soumise a basse température est inactivé mais elle n'est pas dénaturée (et qui est donc de ce fait détruite comme dans le cas d'une haute température).  [...] On met les solutions préparées au bain-marie (25 C°) certainement pour réactiver l'enzyme inactivé par le froid et de ce fait elle redevient active, ce qui permet d'effectué le dosage.  [...]

[Biochimie] Extrémité 5' ARNm

L'enzyme purifiée a une Vm de 2800 unités par milligramme d'enzyme. Pour cette*enzyme, une unité d'activité est définie comme la quantité d'enzyme qui hydrolyse 10 µmol de pyrophosphate en 15 min à 37°C dans les conditions standard de dosage.  [...] a/ Combien de moles de substrat sont elles hydrolysées par seconde et par milligramme d'enzyme lorsque la concentration en substrat est très supérieure à Km*.  [...]

[Biochimie] Dosage de substrat en point final

1) quelles sont les caractéristiques d'un dosage de substrat en point final.  [...] 2) quel contrôle qualité doit-on faire faire sur le spectro quant on utilise l'expression de la concentration à partir de l'absorbance.   [...]