• Santé - Enzyme, Produit, Forme

[Biochimie] fonctionnement des enzymes

Comble du raffinement, souvent pour les hydrolases, s'il y a trop de produit P dans le milieu, il va s'attacher à l'enzyme et changer sa forme spatiale (Inhibition). Le Substrat ne peut plus former de complexe ES ni réagir. Cela permet donc une régulation du produit P dans le milieu.  [...] Le produit, lorsqu'il est en excès, se fixe à un autre endroit de l'enzyme. Ce faisant, l'enzyme va changer de forme, le site sur lequel le substrat devrait se fixer n'est plus accessible. (dans ma métaphore, le triangle en creux qui est souple devient un triangle déformé dans lequel on ne peut plus placer de triangle à cause du losange qui est venu se placer sur un autre endroit de l'enzyme).  [...]

[Biochimie] transamination

Au cours de la réaction enzymatique Bi-Bi ping pong aucun complexe ternaire n'est formé. Un premier substrat (S1) se fixe sur l'enzyme (E) et entraîne la libération du premier produit (P1). Un deuxième substrat (S2) se fixe et entraîne la libération du deuxième produit (P2).  [...] Avant d'être transformé en produit, le premier substrat laisse des traces (atomes) au niveau du site actif de l'enzyme. celles ci se fixeront sur le second substrat (réaction de transfert). Il y'a donc mise en jeu d'une forme d'enzyme intermédiaire ou enzyme transitoire (E').  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique et pallier de quantité de produit formé ?

Pour moins, s'il y a un pallier pour la quantité de produit formé, c'est qu'il y a de moins en moins de liaisons peptidiques à rompre (action de l'enzyme d'hydrolyse des protéines).  [...] Merci encore pour ta réponse. Admettons que le palier de la courbe B soit lié à l'action de l'inibiteur. Par contre, la courbe A concerne la quantité de produit formé sans présence de benzamidine. Donc, le pallier de cette courbe indique bien qu'il y a de moins en moins de liaisons peptidiques à rompre, non.  [...]

TON de Horseradish peroxidase

Bonjour, a priori si tu regarde par bioluminescence ça va dépendre de la stabilité du produit, et de son ratio d'émission. Je ne suis pas sûr que Pierce et Amersham divulgent la nature exacte de leurs produits.  [...] Dans les conditions optimales tu peux trouver les caractéristiques de l'enzyme, qui permettent de déduire la quantité de produit formé avec ta concentration de substrat. La HRP est assez robuste il me semble, je pense qu'elle n'est aps hyper sensible aux conditions expérimentales, en tampon TRIS ph 8.5 ça doit être proche de l'optimal.  [...]

[Biologie végétale] Activité spécifique du complexe amylasique

L'apha amylase est l'enzyme impliquée dans le phénomène de germination et plus précisément de la dégradation de l'amion en glucose. Il est donc normal de retrouver un forte activité dans une graine en germination, donc c'est possible que tes résultats soient incohérents, tu peux détailler les calculs si tu veux pour qu'on regarde.  [...] UIE = nombre de micromoles de produit formé par minute, ou Unité Internationale d'enzyme.  [...]

[Biochimie] C’est quoi la densité optique je veux mesurer l’activité d’une enzyme

Il m'a dit aussi qu'au fur est à mesure il y aura plus de produit résultant du travail effectué par l'enzyme. Que la densité est calculée à partir d'une cinétique. Sur l'axe des X on a le temps, sur l'axe des Y on a la quantité du produit qui augmente au fur et à mesure que le temps passe.  [...] Il y a effectivement de plus en plus de produit formé par l'enzyme (en partant du principe que tu doses le produit de la réaction) donc la DO augmentera.  [...]

[Biochimie] détermination de l'activité d'une enzyme

Je dois déterminer l'activité d'une enzyme. Le produit formé est des sucres réducteurs qui réagit avec le 3,5-DNS, qui donne du ANS qui absorbe à 530 nm.  [...] £. coefficient d'extinction moléculaire (de la solution qui te donne la coloration et qui te permet de lire l'absorbance), on doit sûrement te la donner si tu dois utiliser cette méthode.   [...]

Rendement de transfection

Le D.O augmente avec la quantité de produit formé, il te permet donc de mesurer ton activité enzymatique. Le DO max te donne le pH optimal de l'enzyme, en utilisant la formule que tu as écrite tu peux avoir l'activité relative de l'enzyme à un pH donné.  [...] Oui c'est bien ça donc plus la solution est jaune plus le D.O est élevé et donc plus la quantité de produit crée est importante. Tout cela est proportionnel à ton activité enzymatique.  [...]

[Biochimie] Marquage enzymatique

Je m'intéresse en ce moment aux techniques cytochimiques et histochimiques, et en particulier aux marquages enzymatiques. J'ai compris qu'on pouvait révéler l'activité d'une enzyme par son produit coloré, observable en microscopie photonique, ou opaque aux électrons, obsevable en microscopie électronique (avec introduction préalable de substrat).  [...] J'ai également lu qu'une deuxième possibilité était de révéler un substrat par son enzyme. seulement, je ne comprends pas en quoi cette deuxième technique diffère de la première...Ne révèle-t-on pas le substrat par le produit coloré qu'il forme avec l'enzyme.  [...]

[Divers] Détection enzymatique

Le principe de la détection d'une activité enzymatique. Et bien sur le principe, c'est simple je dirais. au début t'as un un réactif et qui, avec autre chose, donnera lieu à une réaction et formera un produit. Or, bien souvent, cette réaction met beaucoup de temps avant de se terminer.  [...] Normalement, le substrat devrait diminuer, et la quantité de produit devrait augmenter. Il y a aussi un autre cas de figure, c'est que l'enzyme est encore complexée avec ce constituant. Enfin bref, au final il faudrait que tu aies par exemple dans le cas du produit, des anticorps fluorescents qui florescent quand ils sont en contact du produit, et donc tu comptes le nombre de lumières et après t'as ton nombre de produits, t'as pris soin bien sûr au passage de chronométrer et au final t'as ta vitesse de réaction.  [...]