• Santé - Enzyme, Intérêt, Réaction

[Biochimie] lactate, lactodéshydrogénase

Alors ton problème c'est le nom de l'enzyme. En fait il(ou elle) s'appelle comme ça parcequ'elle a été mis(e) en évidence expérimentalement dans le sens inverse. Et on a gardé le nom de la réaction inverse pour compliquer un peu la bioch.  [...] A part ça, la réaction inverse n'a aucun intérêt pour la cellule physiologiquement. Mais l'enzyme marche effectivement dans les deux sens. C'est pour ça que je disais qu'expérimentalement, on a découvert l'enzyme par la réaction de déshydrogénation d'où le nom qui te posait problème.  [...]

[Biologie Moléculaire] turnover overall ?

je dois observer une courbe de formation d'un produit en fonction du temps, et on me dit que celà a été étudié par quench-flow et que la vitesse de formation est de 1er ordre.   [...] le turn over de ton enzyme équivaut au nombre de fois par seconde que ton enzyme d'intérêt effectue la réaction étudiée.  [...]

[Biochimie] dosage enzyme pour quoi utiliser le bain-marie ?

On met les solutions préparées au bain-marie (25 C°) certainement pour réactiver l'enzyme inactivé par le froid et de ce fait elle redevient active, ce qui permet d'effectué le dosage.  [...] Soit on veut empêcher que l'enzyme soit active durant la phase de préparation (car ainsi il n'y a aucun produit de formé, toute l'activité que tu verras par augmentation de l'absorbance sera du à des réaction se produisant à ce moment là), soit il y a d'autres enzymes ou inhibiteurs de ton enzyme dans l'échantillon qui pourrait dégrader ton enzyme d'intérêt.  [...]

[Biochimie] Enzymologie

Simple précision l'étape dit étape de catalyse c'est la formation du complexe Enzyme/Substrat.  [...] Oui la catalyse correspondant à une *accélération* d'une reaction chimique, ici l'intérêt de la catalysation via une enzyme est d'accélérer l'étape limitante, soit la formation du produit à partir du(des) substrat(s). Donc la catalysation correspond à la formation du(des) produit(s).  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunohistochimie/ Immunomarquage

De ce que je me rappelle les deux termes évoquent la même chose. Et le test ELISA en est un bel exemple. On peut mettre en évidence la présence d'une protéines, Ag, etc... d'intérêt à l'aide d'anticorps primaire, secondaire couplé à une enzyme dans le cas de l'ELISA.  [...] Pose de l'anticorps primaire,rincage, anticorps secondaire couplé à une enzyme, rincage. Ensuite, tu ajoutes le substrat et atteint que la réaction se fasse. Si ta molécule d'intérêt était présente et que tous les autres Ac ont réagi alors l'enzyme couplé au secondaire réagit avec le subtrat et ta solution devient jaune.  [...]

[Biologie Cellulaire] Anticorp anti-espece et Western Blot

Dans le western blotting, tu vas effectivement utiliser deux anticorps distincts. L'anticorps dit primaire (que tu as nommé AC1), et l'anticorps qui sera dirigé contre la protéine que tu souhaite mettre en evidence par le western blotting. Cetr anticorps aura été produit par immunisation d'un animal en utilisant la protéine d'intérêt comme antigène.  [...] L'anticorps secondaire (que tu as nommé AC2) est celui qui va te permettre de mettre en évidence la réaction AC1-protéine d'intérêt. cet anticorps (AC2) sera couplé à une molécule qui permettra la révélation (en général l'enzyme HRP, peroxydase de raifort).  [...]

biotechnologie

j'aimerais savoir l'interet de l'utilisation d'enzymes provenant de bacteries thermophiles, et comment expliquer la resistance de l'enzyme utilisee aux temperatures auxquelles elle est exposee dans les reacteurs.  [...] Je viens de déplacer cette discussion de la section Éthique des sciences à la section Biologie.   [...]

[Biologie Moléculaire] Combien d'enzymes différentes dans le vivant ?

Le rôle d'une enzyme étant de catalyser les réactions biochimiques, il me semble que caractériser les réactions plutôt que les enzymes elles-mêmes n'est pas dénué d'intérêt. Comme toi, j'ai évidemment lu ce passage.  [...] C'est ce qui m'intéressait le plus dans la recherche de cette estimation. On arrive aujourd'hui a un pallier en matière de rythme de nouvelles découvertes (aussi bien d'enzymes que de protéines). Dans le cas des enzymes, on découvre un peu près 140 à 150 nouvelles réactions (nombres EC), ou de nouvelles de manière de les catalyser (voir la définition de la nomenclature sur les enzymes) tous les ans.  [...]

[Biologie Moléculaire] co transfection??

Vous transfectez votre vecteur codant pour votre facteur de transcription avec un autre vecteur portant, lui, une séquence promotrice sur laquelle peut se fixer votre protéine d'intérêt et codant pour une protéine rapportrice dont vous quantifierez la présence de la manière qui vous semblera la plus appropriée (dosage d'activité enzymatique, ELISA, réaction colorée, etc...).  [...] une approche classique pour compléter piwi, mais c'est plus de l'étude de promoteur ou de l'interaction entre un FT et son promoteur.  [...]

[Biochimie] Manipulation de l'ADN: plasmide

L'avantage de ces enzymes est qu'ils coupent des séquences en acide aminés très spécifiques et forment (souvent) ce qu'on appelle des bouts collants (ils ne coupent pas les doubles-brins nets mais laisse dépasser un des deux brins). L'intérêt de ceci est qu'un bout collant généré par une enzyme de restriction aura tendance à s'attacher à un bout collant généré par la même enzyme.  [...] L'intérêt est de couper ET notre morceau d'ADN d'intérêt ET le plasmide avec le MÊME enzyme de restriction. Ainsi lorsqu'on les mets en présence l'un de l'autre, ils auront tendance à s'attacher et nous permettre de refermer le plasmide nouvellement constitué.  [...]