• Santé - Dosage, Puits, Produits

Ramener concentration d'un dosage cytokine à la quantité réel de cellules.

J'ai effectuer un dosage d'une cytokine sur différents puits traités avec différents produits et je me suis aperçu que en fonction des produits utilisés, ma quantité de cellules n'étaient pas la même.  [...] Je m'explique. j'ai ensemencé 4 puits à la même concentration en cellules et je traite mes puits avec différents produits et lorsque je compte la quantité de cellules dans les puits après 24h de traitement, il s'avère que pour un des puits la quantité est très faible comme si il n'y avait pas eu de prolifération cellulaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de migration électrophorèse (produits bloqués dans les puits)

Je dispose de protiste et les amplifications se déroulent correctement sauf ma dernière PCR où, après migration des produits par électrophorèse (gel agarose 1%, 100V, 1h) j'ai eu comme résultats, de nombreux produits apparemment coincés dans mes puits (voir photo jointe).  [...] J'ai lu divers avis sur ce problème et certains explique ce blocage des produits par une sur-concentration d'ADN dans les puits.  [...]

[Immunologie] Test sur cellule Wehi

j'aurai aimé savoir pourquoi on ajoute de l'actinomycine D aux puits de cellules Wehi utilisées pour le dosage de TNF.  [...] L'actinomycine D va inhiber la transcription des ARN messagers. Ainsi il n'y aura pas davantage de TNF produit pendant que tu fera ton dosage. Je pense que ça sert à ça.  [...]

[Microbiologie] transformation

je dois cloner les produits de digestion de la mutagenèse (insert ADN) dans le vecteur PGEX4T1 en transformant les bactéries compétentes DH5± J'ai trouvé des clones sur un milieu 2YT/AMP j'ai fait une miniprep pour extraire le plasmide recombinant simplement sur le gel les produits sont piégés dans le puits j'ai refait la manip à plusieurs reprises je trouve toujours le même résultat avec un smear Aidez moi que devrais je faire.  [...] ce que j'ai mis sur gel 0.7% est le produit de miniprep il s'agit d'un clonage classique ce qui m'étonne c'est que les produits sont toujours piégés dans le puits il n'y a rien en dessous juste un smear.  [...]

[Biochimie] Bsa

Si c'est pour faire un dosage par ELISA par exemple, la BSA sert à saturer les sites non occupés par la protéine à doser. Ca évite que les anticorps se fixent de manière non spécifique sur les parois du puits.  [...] Immunochimiluminescence est un terme qu'on utilise pas très souvent (souvent pour faire joli ^^). Lorsqu'on fait un western blot ou un ELISA en utilisant des anticorps couplés à la peroxydase, c'est de l'immunochimiluminescence. Immuno parce qu'on utilise des anticorps, et chimiluminescence parce que l'anticorps est couplé à une enzyme (généralement une peroxydase) qui va transformer son substrat en une molécule qui va produire de la lumière.  [...]

[Génétique] Western blot

Je fais 2 gel en même temps donc je dépose 20µl du même échantillon dans deux puit, un de chaque gel ) et bien évidemment le dosage protéique à bien été effectué et les calculs ont bien été effectués, comme je l'ai dit plus haut, je dépose 30µg donc je divise 30 par la valeur obtenue suite au dosage de l'échantillon protéique.  [...] Le dosage protéique a été effectué correctement. Je dois soumettre mes échantillons a différentes conditions (avec et sans inhibiteur) pour voir l'abondance d'expression des mes protéines selon la condition adéquate, donc il est impératif que la tubuline soit intacte pour tout mes puits pour que je puisse quantifier.  [...]

Cherche le nom d'un appareil de biologie

Je suis chimiste et commercial dans une boite qui délivre sur commande des produits et appareils d'analyse. Dans une dernière commande, j'ai une reçu une demande. Machine pour l'incubation et la détection rapide des souches bactériennes, à 96 puits avec ordinateur, logiciel et imprimante.  [...] c'est un peu vague comme description. On ne sait pas si c'est un automate de culture ou de criblage... Quand vous dites couteau pour microtome, vous pensez a la lame.   [...]

Dramatique épidémie de choléra au Zimbabwe

Cette mesure a entraîné l' effondrement de milliers de fermes autrefois prospères, mettant des millions de personnes au bord de la famine et provoquant une crise économique sans précédent. L'hyperinflation atteignait en juillet dernier le taux apocalyptique de 231 millions de pourcents tandis que le chômage frappait 80 % de la population active.   [...] Diverses sanctions économiques frappant le pays entraînent aussi une carence en produits de première nécessité, notamment de sulfate d' aluminium fourni par l'Afrique du Sud destiné à éclaircir et purifier l'eau de distribution. Déjà Harare, la capitale du pays, n'est plus approvisionnée depuis le 30 novembre, et en conséquence, de nombreux habitants prélèvent de l'eau polluée ou creusent des puits à proximité de leurs habitations, contribuant encore à répandre l' épidémie.  [...]

Les besoins vitaux

Certaines eaux de puits doivent être potables, les eaux de source aussi. Il y a plusieurs années, les gens à la campagne buvaient l'eau du puits. Evidemment, depuis, les normes sont devenues plus draconiennes. Tu peux également traiter ton eau mais cela nécessite d'acheter des produits.  [...] Pourquoi une pompe J'habite un hameau qui possède un puits et autant que je sache, avant que l'eau courante ne soit installée, tous les gens du hameau buvaient cette eau. Nul besoin de pompe, une chaîne et un seau suffisent. Il y a quand même un hic. il fait 34 mètres de profondeur, ce qui a dû susciter un gros travail de construction.  [...]

problème d'analyse de gel de migration

j'expose mon probleme. apres une rt pcr, je fais migrer mes adn. un couple d'amorce par puits, donc normalement un seul trait visible sur le gel si la rt pcr a marché ou alors rien... mais là, j'obtiens plusieur bandes distinctes pour el meme puit. les amorces ne pouvant s'hybrider qu'a un seul endroit sur le genome, je ne comprend pas comment on peut obtenir plusieurs produits pcr avec un seul couple d'amorce.  [...] SI ton ARN initial est extrait d'un tissu, ne peux-tu pas avoir des variants d'épissage, tout bêtement Dans ce cas tu aurais plusieurs ADNc suite à la RT.   [...]