• Santé - Concentration, Protéine, échantillon

[Biochimie] Calcul de concentration de la protéine dans un échantillon (Exo L1)

La question b) découle de la concentration massique que tu auras au préalable trouvée. Il te suffit de faire un simple produit en croix (=règle de 3).  [...] concernant la dernière question, je pense que tu devrais prendre en compte la formule liant le pH au concentration d'acide de base et de protons.  [...]

Test ELISA

J'ai réalisé un test ELISA en TP afin de déterminer la concentration d'une protéine dans un échantillon. Afin que ce test soit quantitatif, j'ai réalisé une gamme de concentration. Après mesure de l'absorbance, j'obtiens des résultats aberrants qui ne sont pas interprétables (à la fois pour ma gamme de concentration et pour mon échantillon).  [...] C'est difficile de dire ça à priori pour les échantillons que tu testes vu que t'es pas sensé connaître la concentration, mais si ta gamme à foirée il y a un souci technique, qui peut venir de plein de choses différentes. coating mal réalisé, dilution ratées (en général pour la gamme on fait des dilutions 1/2 en cascade donc pour se planter faut quand même y mettre du sien.  [...]

spectrophotométrie

Donc, si tu sais que ton échantillon est de la protéine pure, et que tu a le coeficient d'absorption des protéines à 280nm tu en déduis la concentration de ton échantillon en protéines (enfin, l'ordinateur la calcule pour toi, en l'occurence).  [...] Attention si tu as dans ton échantillon des produits qui absorbent aussi la lumière à 280 nm ta mesure en sera faussée, tu sur-estimera la concentration, car le spectrophotomètre ne différencie pas les produits entre eux, c'est juste une mesure globale.  [...]

[Biotechnologie] Protéome, spectrométrie de masse

Selon ce que j`ai trouvé, un seuil acceptable est de 0,5 M d`urée approximativement, si vous avez une plus grande concentration il serait sage de diluer votre échantillon si la concentration en protéine est suffisante ou laver la matrice avec de l`eau ultrapur et 0,1% de TFA ce dernier n`interfère pas.  [...] Merci beaucoup pour vos réponses. Je pense que je ne vais pas atteindre ces concentrations puisque je ferai une HPLC juste avant de passer en spectro. je vais donc diluer mon échantillon (ça vaut mieux car je n'ai pas une quantité énorme en peptides).  [...]

[Biochimie] fonctionnement d'un stacking gel

Vu que le front d'arrière-garde avance plus lentement que le front pilote, les deux fronts vont être de plus en plus éloignés l'un de l'autre non en quoi ça participe à la concentration de l'échantillon Et qu'est-ce que la quantité de protéine-SDS vient faire là dedans.  [...] On ne peut pas parler de séparation des différentes espèces chimiques. Elles ont juste le temps de s'organiser en trois bandes très proches, sous la forme d'un empilement. C'est pour cette raison que ce phénomène physico-chimique participe à la concentration de la bande protéine-SDS.  [...]

[Génétique] Western blot

en fait il est très souvent difficile de réaliser exactement le même dépôt, d'où ces variations. De plus, suivant la méthode utilisée pour doser la concentration en protéine on est +/- précis. C'est pourquoi normalement pour toute quantification on utilise un rapporteur interne qui normalement ne varie pas dans les conditions testées (souvent l'actine ou la tubuline) et on rapporte le signal obtenu pour notre échantillon au signal obtenu pour le rapporteur (une division quoi ^^).  [...] Le dosage protéique a été effectué correctement. Je dois soumettre mes échantillons a différentes conditions (avec et sans inhibiteur) pour voir l'abondance d'expression des mes protéines selon la condition adéquate, donc il est impératif que la tubuline soit intacte pour tout mes puits pour que je puisse quantifier.  [...]

[Biochimie] Question protéine

L'absorbance mesurée par spectrophotométrie à la longueur d'onde adéquat permet de déterminer la concentration de protéines dans un échantillon donnée.  [...] Qu'avez vous répondue à la 1ère question Car une question sur la valeur biologique d'une protéine ne peut amener une réponse simple, vu que les terme valeur biologique est on ne peut plus vague. Cela ressemble à pourquoi les protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] difference de detection

Pour tes problèmes de détection, il faut savoir si ton échantillon induit et ton échantillon contrôle ont été traités de la même manière. Il faut concentrer la protéine. culotter les bactéries puis les reprendre dans du laemmli (je fais 1ml de culture, centri, reprise dans 200ul laemmli 1X, centri, dépôt de 10-20ul).  [...] EN FAITE AU COUR DE L'expérience notre concentration de protéine total était de 5,97 ug/ul (mesure realisé au nanotrop).ON VEUT OBTENIR DANS 15 ul 35 ug.PAR CALCUL CiVi=CfVF.ON A DEDUIT QUIL FALLAIT AJOUTER 33,5ul de nos proteine purifier et ensuite complété avec notre solution tampons de lyse pour avoir un volume final de 40 ul.  [...]

[Biochimie] Dosage de protéines par Bradford

J'ai effectué le dosage de protéine du lait. Pour l'extraction des protéines, j'ai peser 4g de l'échantillon et ajouter 20 mL de méthanol. Après centrifugation le volume extrait de surnageant est de 21 mL avec une absorbance de 0.050 nm. La courbe d'étalonnage du BSA en fonction de l'absorbance est. y= 0.0078x.  [...] Non, je répète. vous aviez 4 g d'échantillon dans vos 21 mL, au final vous avez 6.4 µg protéine BSA dans 100µL qui représente 0,019 g donc.  [...]

Pb avec l'intensité des bandes colorées en électrophorèse

Pour chaque méthode je dois calculer la quantité de protéine voulue obtenue et les pertes survenues au cours de la purif (sachant que je connais la quantité initiale).  [...] mais si tu as deposé 1mg sur ton gel et que ta proteine represente 86% des proteines totales de ton echantillon alors tu as déposé 0,86mg de ta proteine pas 86mg.  [...]