• Santé - Cellules, Vecteur, Marqueur

[Biotechnologie] Fabrication d'une protéine d'intérêt ?

Il manque une étape entre la production du cDNA et la transfection dans les cellules. Le cDNA est inséré dans un vecteur d'expression qui contient outre les éléments classiques d'un vecteur (Ori, MCS, marqueur de sélection) un promoteur de transcription ainsi qu'un RBS (ribosome binding site) qui va permettre la traduction du transcrit.  [...] Ensuite vous faites votre transfection de bactéries ou de cellules eucaryotes. A noter que pour les cellules eucaryotes il existe deux types de transfection, stable (le vecteur s'insère dans le génome de la cellule) ou transitoire (le vecteur reste séparé du génome et finira par être éliminé).  [...]

Des fabriques de neurones à l'intérieur du cerveau

Une nouvelle étape capitale vient d'être franchie. En collaboration avec l'Unité de Virologie moléculaire et vectorologie dirigée à l'Institut Pasteur par Pierre Charneau, les mêmes chercheurs ont démontré que les cellules souches gliales se répartissent non seulement dans la zone de formation mise en évidence en 2003, mais aussi le long d'un tunnel par lequel migrent les nouveaux neurones tout comme dans le bulbe olfactif.  [...] Utilisant un marqueur fluorescent véhiculé par un vecteur viral capable de viser spécifiquement les cellules souches gliales et introduisant celui-ci d'abord dans la zone neurogénique déjà connue, puis dans de nouveaux territoires, ils ont démontré que de nombreuses régions du cerveau devenaient fluorescentes.  [...]

Le VIH, cheval de Troie de la lutte contre le cancer ?

Au cours de récents travaux publiés dans la revue Nature Medicine, des chercheurs de l'Université de Californie-Los Angeles (UCLA) ont choisi de tirer parti de ces caractéristiques pour fabriquer, à partir du VIH, un vecteur thérapeutique dirigé spécifiquement contre des cellules cancéreuses.  [...] Afin de tester l'efficacité de leur vecteur, les scientifiques l'ont injecté par intraveineuse à des souris atteintes de mélanome et ont suivi son parcours grâce à un marqueur fluorescent (la luciférase) initialement intégré. Ils ont ainsi pu constater que le virus se dirigeait vers les poumons où des cellules métastasées avaient migré.  [...]

rats KO

Enfin certes la recombinaison homologue est théoriquement possible chez tous les mammifères mais à condition que l'on puisse maintenir les cellules ES de l'espece en culture, ce qui n'est pas le cas chez le rat il me semble...(car on transfecte les cellules ES par un vecteur contenant le marqueur, on selectionne les cellules ES ayant intégré le vecteur et on les réinjecte dans un blastocyte que l'on implante chez une mère porteuse).  [...] Le vecteur contient des gènes de résistance aux antibios, ou alors des gènes permettant la prototrophie pour un élément (acides aminés essentiels en général). Mais lorsque l'on fait du KO chez la souris on utilise 2 marqueurs.  [...]

Cellules souches

De plus avec ta technique de 2eme colonne, tu ne sais pas si tu éluera que les cellules souches car d'autres types cellulaires ont peut etre le marqueur CD34 et absence du marqueur de purification de ta 2eme colonne, à moins de vraiment recenser les différents marqueurs cellulaires et de bien discriminer les marqueurs.  [...] Depuis peu, les cellules souches caractérisées par le marqueur antigénique CD34, peuvent être sélectionnées positivement par un anticorps monoclonal anti CD34 en utilisant une technique dimmunoabsorption biotine avidine.  [...]

Que ce qu une ligné d encapsidation?

Le but est de mettre cet ARN vecteur, porteur du gène thérapeutique, dans les particules vides pour ensuite se diriger vers la cellule cible. Parfois, est ajouté un autre gène servant de marqueur de sélection.  [...] Ce système est conçu pour empêcher toute propagation ultérieure. Le risque d'obtenir des ARN réplicatifs par recombinaison-complémentation, devient de plus en plus faible avec les nouvelles générations de cellules productrices de vecteurs.  [...]

[Immunologie] [Cyto"gramme"] abs & ordonnée?

Ainsi en fonction du marqueur que tu doses (grace à l'anticorp couplé au fluorochrome) tu peux discriminer des populations de cellules.  [...] Il me semble qu'il y a une confusion de votre part. les axes X et Y expriment des intensités pour le marqueur étudié et non pas un nombre de cellules. Par exemple la région G1 mesure en X une intensité de fluorescence (iodure de propidium). la population G1 tombe dans le canal 200.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marqueur pour cellules mortes dans une culture.

Lors d'un TP, nous avons mis des progenitors de cellules nerveuses en culture pendant une durée de 16H approximativement, avant de les analyser. Afin de ne pas biaiser les résultats nous aimerions différentier les cellules mortes, mais à ce stade, je doute que cela puisse se faire simplement d'après la morphologie des cellules.  [...] Existe-t-il un marqueur spécifiques des cellules mortes que nous pourrions utiliser (mais pas spécifique de l'apoptose comme ce que j'ai trouvé jusqu'à présent sur le net).  [...]

[Biologie Cellulaire] marquage de cellules cancereuses

Je souhaiterai verifier que mes cellules cultivées sont bien des cellules cancereuses. Est ce que vous savez quels marqueur on peut utilisés directement sur la culture pour permetre de le verifier.  [...] S'il y avait des marqueurs très spécifiques je pense que les chercheurs seraient heureux et cela permettrait de détecter les tumeurs plus précocement... Après il y a pour certains type cellulaire une augmentation de certains facteur de croissance ou d'autres protéines ça dépend du type cellulaire.  [...]

biologie moleculaire

voila j'ai une question qui conserne les vecteurs de clonage, on a étudié les plasmides, les phagemides, les bacteriophages et les cosmide (j'espere que je n'en ai pas oublié...) et le prof nous a demandé de lui construire un vecteur de clonage complet je ne sais pas s'il suffit juste d'additioner tous les elements qui, a mes yeux, sont interessants.  [...] - Un marqueur de sélection. un moyen de repérer facilement les organismes qui ont récupéré ton vecteur. gène de résistance, marqueur d'auxotrophie, etc. Le mieux est même de placer un système qui permet de repérer en plus les organismes qui ont récupérés un vecteur portant l'insert (criblage bleu/blanc, vecteur suicide, site particulier pour une amorce, etc.).  [...]