• Santé - Cellules, Technique, Hybridation

selection de cellules par la technique de l'hybridation in situ

Je ne comprends pas tres bien la technique d'hybridation in situ, pour observer si un mRNA particulier est exprimé au sein d'un tissu ou d'une cellule, il faut bien faire éclater les cellules. Et parfois on nous dit que ça nous permet de voir quelles cellules ont intégré un transgène par exemple et de les sélectionner.  [...] L'hybridation in situ se fait effectivement sur des cellules mortes, sur lame, car il faut perméabiliser la membrane pour pouvoir faire rentrer les sondes... Les sondes sont des ARN complémentaires de ton ARN cible, couplées à un fluorophore par exemple, ou alors c'est des sondes chaudes (radioactives).  [...]

Trois bébés nés d'une FIV après contrôle des chromosomes

Les bébés nés par fécondation in vitro seront peut-être encore plus nombreux grâce à la technique d'hybridation génomique comparative (CGH) sur puce, effectuée sur les corps polaires. Andy Eick / Licence Creative Commons.  [...] La technique utilisée pour ces trois naissances consiste en une recherche des anomalies chromosomiques par hybridation génomique comparative (CGH) sur puce. Habituellement utilisée dans les laboratoires pour détecter des cellules cancéreuses, la technique s'applique très bien à la sélection des embryons les plus viables.  [...]

Le poisson-zèbre, un modèle d'étude pour le cancer

Pour aller plus loin sur la compréhension du cancer chez ce poisson, les chercheurs ont alors utilisé la technique de la puce d' hybridation génomique comparative. Elle consiste en la comparaison du nombre de chromosomes entre des cellules saines et des cellules cancéreuses et peut donc mettre en évidence une aneuploïdie.  [...] Grâce à l'hybridation de sondes fluorescentes, les couleurs de chaque région de chromosomes sont différentes en fonction du ratio. Si l' ADN est coloré en jaune, le ratio est égal à 1 et il n'y a donc pas d'aneuploïdie. Si l'ADN est coloré en vert ou en rouge, cela révèle soit une augmentation soit une diminution du nombre de chromosomes.  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

j'ai réalisé récemment une hybridation adn/adn par la technique de Southern blot. Lors de la digestion enzymatique, il à été utilisé de l'ADN provenant de phage lambda. Les différents tubes comportaient également de l'eau stérile, du tampon 10X, Ainsi que les enzymes de restriction, (EcoRI et/ou HindIII selon le tube).  [...] - contaminaton des échantillons (je précise que les cones n'ont pas été changés), mais je ne vois pas en quoi cela expliquerait la faible migration. A moins que dans ce cas là, la présence simultanée de plusieurs enzymes aurait engendré des fragments vraiments minuscules, ce qui expliquerait que ceux ci soit sortis du gel.   [...]

[Génétique] Technique d'hybridation du génome CGH array

Concernant une technique d'hybridation du génome. La méthode CGH -. quels en sont les limites.  [...] J'ai pensé aux séquences CNV, qui sont présentent sur l'ensemble du génome, qui limiterais l'utilisation de cette technique, mais je n'ai pas de réponse plus rigoureuse.  [...]

Aide pour l'écriture d'un roman : biologie et chimie végétale

techniques de fusion cellulaire (y compris la fusion de protoplastes) ou d'hybridation dans lesquelles des cellules vivantes présentant de nouvelles combinaisons de matériel génétique héréditaire sont constituées par la fusion de deux cellules ou davantage au moyen de méthodes qui ne sont pas mises en oeuvre de façon naturelle.  [...] Ça me plaît bien ça. Effectivement, c'est un roman. Même si les techniques sont expérimentales ou balbutiantes, le but est d'avoir une base crédible, même si elle est inexploitable aujourd'hui. Le tout étant de partir sur des bases ou des hypothèses scientifiques sur ce bleuissement, histoire que le lecteur se dise ça pourrait arriver.  [...]

Isoler une région d'un génome à partir d'un BAC

Ah bien vu Yoyo, une hybridation sur colonies pour limiter le nombre de BAC ( Je connais cette technique, mais pourquoi n'ai je pas penser à l'utiliser grmbl ).  [...] une hybridation sur colonies pour limiter le nombre de BAC ( Je connais cette technique, mais pourquoi n'ai je pas penser à l'utiliser grmbl ).  [...]

Expression de gène

L'hybridation in situ apporte en plus la localisation de l'expression des gènes sur une coupe histologique (tissu cellulaire). Non seulement on sait si le gène est exprimé et à quelle intensité il l'est mais on sait aussi quelles sont les cellules du tissu qui les expriment (toute les cellules d'un organisme ont le même génome mais pas le même transcriptome).  [...] Autre différence de taille. la puce à ADN est une technique a grande échelle, c'est à dire qu'lle permet de mesurer l'expression absolue ou différentielle d'une grande quantité de gènes en même temps (plusieurs milliers) alors que l'hybridation in situ est ciblée.  [...]

[Génétique] Production ARN polymérase et retour dans le noyau

la différence entre l'ADN et l'ARN mis a part la double hélice, est la thymine quui n'est qu'une uracile méthylée ( il me semble) et les ADN et les ARN peuvent quand meme s'hybrider ( cf technique d'hybridation pour la PCR) ainsi il aurait suffit à une cellulle de se tromper entre une thymine et une uracile pour creer un ARN, qui est moins stable que l'adn et ainsi mieux réguler ses voies métaboliques.  [...] Je me demandais en fait si l'ADN viral (qui vient de l'extérieur et donc ne devrait pas envoir cette protéine spécifique) force son entrée dans le noyaux ou possède une protéine nuclaire qui est commune à toutes les cellules ou bien trouve cette protéine dans le cytosole de la cellule hote.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique d'hybridation

Quel est le nom svp de la technique qui utilise l'hybridation d'une sonde d'ADN monocaténaire sur des ARNm séparés par électrophorèse.  [...] je pense que cette technique est le northern blot c'est à dire le transfert d'ARN sur membrane de nitrocelluloseou nylon à partir d'un gel d agarose, par capillarité suivie d'une étape d'hybridation à ADN complémentaire et c'est là qu'intervient la reverse transcriptase car c'est une enzyme qui permet à partir d'un ARN d'obtenir un ADN complémentaire.  [...]