• Santé - Cellules, Fragments, ADN

[Biologie Cellulaire] Marquage à l'iodure de propidium pour suivi du cycle cellulaire

Si j'ai bien compris le principe de cette méthode, la perméabilisation des cellules entraîne la sortie des fragments d'ADN de 180 bp, ce qui fait que l'intensité de fluorescence des cellules en apoptose est inférieure à celle des autres cellules (puisque proportionnelle à la quantité d'ADN), d'où l'apparition d'un pic en subG1.  [...] Pour le marquage IP, comme tu l'as dit, les cellules en subG1 le sont surtout à cause d'une fuite des fragments d'ADN clivés hors de la cellule. Seulement, le clivage régulier de l'ADN internucléosomal est typique d'un processus apoptotique. Dans le cas des autres morts cellulaires, la dégradation de l'ADN peut intervenir plus tardivement dans le cas d'une mort cellulaire par autophagie et/ou est plus anarchique comme dans le cas d'une nécrose.  [...]

les vecteurs YAC et BAC

Les YAC (Yeast Artificial Chromosomes) sont des vecteurs pour cellules eucaryotes. Leur mise au point est due aux travaux de BURKE et al. (1987). Ils permettent de cloner de très grands fragments d'ADN (100 à 2000 kb) dans les cellules de la levure Saccharomyces cerevisiae.  [...] Les BAC (Chromosome Artificiel de Bactérie) sont des vecteurs servant à cloner de grands fragments d'ADN (100 à 300 kb) dans les cellules d'E.coli.  [...]

Analyse ADN : détecter les maladies dans une goutte de sang

Tout d'abord, les cellules en train de mourir libèrent des fragments d' ADN dans le sang dans lequel ils circulent pendant un court moment. Ce phénomène est connu depuis des décennies mais, dans la mesure où la signature génétique de toutes les cellules de l'organisme est identique, il n'était pas possible de déterminer le tissu d'origine de cet ADN.  [...] Nos travaux démontrent qu'il est possible d'identifier de quels tissus dans l'organisme proviennent les fragments d'ADN qui circulent dans le sang, souligne Ruth Shemer. Cela représente une nouvelle méthode pour détecter des cellules mourantes dans des tissus spécifiques et une approche très prometteuse pour diagnostiquer des maladies, ajoute-t-elle.  [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

Ta banque ne contient pas des cellules. tu te fiches des cellules en gros. Ta banque contient les fragments de ton ADN d'intérêt insérés dans des vecteurs (plasmides, cosmides, YACs, BACs,...). Donc, non, ta banque n'est pas détruite. les cellules portant les vecteurs sont détruites, mais tu le fais dans le but d'extraire ces vecteurs justement Donc, si tu veux utiliser l'ADN contenu, tu peux.  [...] Beh, tu introduis dans des bactéries pour obtenir une quantité de plasmides élevée et puis tu extraies cet ADN. Mais le truc est que ta banque n'est pas les cellules, ta banque est toutes les copies des fragments d'intérêt que tu souhaites (représenté chacun une 10aine de fois, je crois, pour être certain que tout le génome est couvert).  [...]

Les nouvelles pistes de chimiothérapie | Dossier

Les chercheurs de Giant entendent précisément s'attaquer à cette difficulté, en développant des vecteurs qui sauront apporter, au coeur des seules cellules cancéreuses, les fragments d'ADN codant pour des substances toxiques. Une variante de cette approche est également explorée par les équipes du projet Theradpox, qui vise à tirer parti de la propriété unique de certains virus de n'infecter que les seules cellules tumorales.  [...] Les ingénieurs génétiques du projet européen Giant travaillent sur la mise au point de vecteurs qui sauront apporter, au coeur des seules cellules cancéreuses, les fragments d'ADN codant pour des substances toxiques. Sur l'image de gauche, les traces de couleur jaune sur fond rouge correspondant à l'expression du traceur GFP montrent le succès d'une infection in vitro de cellules prostatiques cancéreuses humaines par un adenovirus de première génération, comparée à une nette faiblesse de résultats avec un baculovirus.  [...]

[Immunologie] Synthèse d'anticorps

Le lieu d'origine de la synthése d'anticorps est une cellule souche de la moelle osseusse n'est ce pas. Les lymphocytes B de la moelle osseusse vont effectuer un rearrangement de l'ADN du chromosome 14 (fragments d'adn supprimés, associés exct...). Ces réarrangements codent pour des protéines différentes selon le réarrangement.  [...] Dans l'organisme, les cellules souches )à l'origine des lymphocytes B sont constituées de fragments de génes (donc d'ADN). Les cellules souches portées à maturité vont effectuer un réarrangement de ces portions d'ADN afin qu'il y ait production d'anticorps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Rôle de PARP dans l'apoptose

Alors si j'ai bien compris, après un survol de ton article, je pense qu'il se produit une apoptose très importante pour les cellules PARP -/-, après soumission à des agents alkylants, ce qui se traduit par le relargage, au bout de 4h, d'une quantité massive de fragments d'ADN de tailles diverses, et au bout de 6h, d'encore plus de fragments de taille inférieure.  [...] C'est juste un bruit de fond, du au traitement alkylant que tu fais subir aux cellules. Même PARP +/+, certaines cellules ne résisteront pas à ce traitement. Toutefois, si tu compares l'intensité des bandes, on voit quand même qu'elle est nettement inférieure pour les cellules PARP+/+ que pour les PARP -/-.  [...]

Police scientifique : déterminer l'âge du criminel grâce à son sang ?

Chacun des lymphocytes T, ces cellules du système immunitaire, possède un récepteur TCR unique, de sorte que chaque antigène puisse être reconnu au moins par un lymphocyte. Pour parvenir à créer des cellules uniques, les lymphocytes subissent une maturation dans le thymus, au cours de laquelle des réarrangements génétiques aléatoires se font.  [...] Pendant ce processus, des fragments d'ADN sont excisés du génome et sont retrouvés sous forme circularisée dans les cellules. La présence de ces ADN circulaires est donc un marqueur de la maturation récente des lymphocytes, un phénomène qui décroît avec l'âge et la perte de fonction du thymus.  [...]

[Génétique] Production de souris transgéniques

Comme je l'ai dit, on utilise la recombinaison homologue pour de petits fragments d'ADN dans le cas de transfection de cellules ES, afin de cibler une intégration précise dans le génome.  [...] Une méthode d'injection de cellules ES a été publiée en 2007 dans Nature Biotechnology. L'injection se fait au stade 8 cellules, après avoir fait une ouverture dans la zone pellucide avec un laser. Cela permet d'avoir des souris homogènes en F0, contrairement à l'injection de cellules ES au stade blastocyte qui produit des souris chimères en F0, qu'il faut recroiser entre elles pour obtenir en F1 25% de souris homogènes. Si cela intéresse.  [...]

Ogm

Il n'y a aucune relation de cause a effet entre la technique utilisée pour faire rentrer de l'ADN dans une cellule et la facon dont cet ADN va s'intégrer. Ceci dit il est vrai que l'insertion dans les cellules vegetales est aleatoire. Si cela inactive un gene essentiel, alors la plante ne se developpera pas, tout simplement.  [...] edit. ah oui, par biolistiques vous entendez la projection à haute vitesse de fragments d'ADN sur des cellules (via air comprimé, ou inertie, on avait parlé de ca en cours) Si non, je veux bien un petit topo *^_^*.  [...]