• Santé - But, Cellules, Suspension

g et rpm incubateur

Cependant, dans le cas des incubateurs de cellules avec agitation, je le faisais à 200 rpm (ex. toute une nuit) mais je n'ai aucune idée de la marque de l'agitateur ou du rotor (impossible que je retourne au labo c'est trop loin... et sur internet je trouve que en rpm).  [...] Contrairement aux centrifugations, on ne parle pas en g pour les incubateurs, puisque le but n'est pas de culotter les cellules mais de les garder en suspension. C'est a peu près similaire entre toutes les machines.  [...]

Discussion | Dossier

Dans cet objectif, nous avons testé comme matériel cellulaire les granulocytes neutrophiles, une suspension composée de lymphocytes et de monocytes et enfin un modèle utilisant le sang total. Les expérimentations mises en oeuvre se sont faites avec différents temps d'incubation et avec des concentrations variables en activateur.  [...] Or, notre but est de séparer les deux modes d'activation pour être sûr de n'être en présence que de la COX-1 ou que de la COX-2, ces constituants sanguins sont donc des éléments parasites potentiels qu'il nous faut éliminer. Le meilleur choix cellulaire que nous pouvons faire est donc de prendre une suspension composée de lymphocytes et de monocytes en faisant varier les conditions d'incubation des cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] Suspension cellulaire

Je pense que c'est lorsque tes cellules sont en suspension dans un milieu, contrairement à celles qui sont attachées au fond de ta boite.  [...] Dans ce contexte ci, ca doit etre mettre des cellules en suspension pour les détacher les unes des autres afin de mieux pouvoir les observer au microscope alors. C'est ca.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Ensuite, le culot composé de globules rouges et de granulocytes neutrophiles est remis en suspension dans une solution de chlorure d'ammonium afin d'effectuer une hémolyse. Les cellules sont recueillies et lavées après centrifugation.  [...] Les cellules sont remises en suspension dans le tampon de lyse pour western blot (cf. annexe 2) à la concentration de 50.10 6 cellules /ml. Elles sont soniquées 6 fois 5 secondes, en prenant garde de bien refroidir les tubes entre chaque passage. Tous les échantillons sont dilués au tiers par une solution échantillon (cf.  [...]

[Biotechnologie] prolifération de cellules en suspension

Comment fait on pour faire proliférer des cellules en suspension dans un milieu liquide alors que la prolifération necessite que la cellule soit ancrée.  [...] ok merci beaucoup... Donc toutes les cellules n'ont pas forcement besoin d'être ancrées, et pour celles qui en ont besoin on ajoute des produits dans la suspension merci.  [...]

[Biologie Cellulaire] adaptation protocole confocal à cytométrie en flux

Mon problème est que dans tous ce que j'ai pu lire, pour la cytoflux l'incubation avec les Ac semble se faire sur cellules en suspension et pendant quelques minutes (30 minutes) seulement.  [...] il faut tester, des cellules en suspension n'auront peut être pas la meme sensibilité que des cellules adhérentes. A mon avis la meilleure méthode c'est de perméabiliser et de faire les marquages apres avoir détaché les cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] gros besoin d'aide: toutes mes cellules C2C12 sont mortes!

- Ensuite, j'ai décongelé mon ampoule que j'ai reprise dans 10 ml de milieu, et c'est sur cette suspension que j'ai fait mon test de viabilité. Donc avant même d'ensemencer mes cellules.  [...] - Ensuite, pour ce qui est de le densité d'ensemencement, c'est depuis mon ampoule de départ que j'ai fait mes flasks à 450 000 cellules. Si ça vient de la trop faible densité d'ensemencement, je ne comprends pas, sur ma cell line data sheet, il est marqué de les cultiver à 1-2 000 cell/cm². Vous me conseillez quelle densité du coup.  [...]

[Biologie Cellulaire] HEK et nitrogène

Je maintiens mes stocks à -80°C au lieu du liquid nitrogen, est-ce que ces conditions de stockage peuvent expliquer ces problèmes de pousse (les cellules décongelées ont l'air saines et nombreuses les premières heures de mise en culture puis elles restent en suspension et ne s'attachent que très difficilement à la boite... La majorité finit par mourir).  [...] .. Quelques heures après elles restent toujours en suspension et finissent par se nécroser - j'ai essayé avec 2 types de cellules (cellules natives HEK et cellules HEK transfectées), le résultat est le même. elles ont du mal à redémarrer. J'utilise du DMSO à 10% pour les congeler, est-ce que quelqu'un a eu un problème avec ce produit avant (c'est le seul point commun que je vois).  [...]

[Biologie Cellulaire] Aide pour une perfusion de cellules isolées

Je ne pense pas qu'il s'agisse de microinjecter des cellules puisqu'elles sont en suspension. On peut le faire sur des cellules posées sur lame grâce à des micro-aiguilles, mais là, on ne pourra pas. Le terme perfusion est dés lors assez mal choisi.  [...] La masse volumique dit que c'est en gros de l'eau. Cependant, si vous ne voulez pas voir mourir vos cellules se sera plutot du PBS ou du milieu de culture.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

annexe 1). Les cellules sont remises en suspension dans la même solution puis centrifugées dans les mêmes conditions que précédemment. Enfin, le surnageant est prélevé et les cellules remises en suspension dans 20 ml de Hanks'HEPES et conservées à 4°C (Cabanis A. et al., 1994).  [...] Les cellules sont remises en suspension dans le tampon de lyse pour western blot (cf. annexe 1) à la concentration de 50.10 6 cellules /ml. Elles sont soniquées 6 fois 5 secondes, en refroidissant les tubes entre chaque passage. Les milieux sont centrifugés à 8000 g pendant 5 minutes à 4°C pour éliminer les noyaux et les cellules non lysées.  [...]