• Santé - Bactérie, Expression, Cellules

[Biotechnologie] Une application biotechnologique de la transgénèse

2- on prelevant le gene codant pour cet hormone de chez l'homme organisme eucaryote tu va le faire exprimer dans une bacterie organisme procaryote donc tu doit faire une construction qui aide ton gene a s'exprimer dans cet organisme promoteur+gene d'interet+gene marqueur+terminateur+.  [...] 3-tu doit integrer ta construction dans la bacterie amplification de l'expression du gene puis selectionner les cellules qui on reçues la construction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage

Et ensuite de manière générale pour exprimer une grande quantité de protéine eucaryote on essai de voir si cela fonctionne dans une bactérie (quand ca marche c'est génial car c'est très facile à mettre en place, c'est pas cher et ca fonctionne très bien) malheureusement ca ne fonctionne pas souvent donc on passe dans des système d'expression eucaryote (levures, cellules d'insectes).  [...] Oui, ca parait une solution de riche mais effectivement les prix ont bien baisser et surtout c'est un gain de temps considérable. En plus ca permet de résoudre les problèmes des codons d'usage, en donnant à l'entreprise dans quel type de bactérie on souhaite travailler, elle va syntéthiser le gène avec les codons d'usage de la bactérie.  [...]

Mon stage de master 2

(ASE, chromatographie etc), parfois j'ai pas trop envie de continuer par ce que je pense à ma carrière professionnelle après puisque le stage de Master 2, c'est avant tout une phase d'initiation à la vie professionnelle mais avec un diplôme dans le domaine de l'écotoxicologie et une expérience en stage avec des outils de la chimie analytique je me.   [...] Pour te citer mon exemple, j'ai fait 2 stages avant ma thèse. le 1er sur l'expression protéique dans les cellules humaines, le 2d sur des gènes de pathogénicité d'une bactérie. Pour ma thèse je travaille sur les microARN chez un eucaryote. Certes, j'ai du apprendre les méthodes propres à ce sujet à mon arrivée, mais mes stages précédents m'avaient, à défaut, appris le fonctionnement d'un labo, la recherche biblio, le travail en équipe, l'utilisation de certains outils généraux.  [...]

Système d'expression d'une protéine !!

SVP. je veux savoir une définition exacte du système d'expression d'une protéine Il sert à quoi quelques exemples si possible.  [...] C'est fliou comme question. Un système d'expression d'une èrotéine sert à exprimer une protéine.. On a par exemple la bactérie E. coli, les cellules d'insectes infectées par un baculovirus, la levure,  [...]

[Biologie Cellulaire] Vecteur d’expression dans une bactérie

-Je voudrai savoir si lorsque l'on introduit un vecteur contenant l'adnc d'une protéine eucaryote dans une bactérie on est obligé de mettre une queux poly T sachant que les Arn procaryote non pas de queux poly A.  [...] Ce ne sont que des souvenirs de cours que je rapportais Ce que l'on nous a expliqué c'est qu'il semble y avoir un effet très lié entre les deux (et aussi entre le nombre de molécules de l'enzyme PMAB () qui ajoute les queues polyA et la dégradation. moins il y a d'enzyme, plus il y a de la dégradation), mais notre prof a parlé d' arguments très forts allant dans ce sens et pas de corrélation.   [...]

[Microbiologie] Adaptation et résistance des bactéries au stress

La résistance est un mode de survie parfois extrême. Meilleur exemple. les spores sont des structures qui restent en reliquat quand les formes végétatives meurent. Le double effet kiss-cool. ce qui tue les cellules végétatives a aussi pour effet d'activer les spores, permettant la re-germination de ces dernières en forme végétative une fois la crise passée.  [...] Mais si on me force a trouver une différence entre les deux, alors a mon avis, dire qu'une bactérie résiste á des températures élevées par exemple, cela veut dire qu'elle posséde naturellement la capacité de survivre dans ces conditions. Et dire qu'une bactérie s'adapte á une température veut dire qu'elle modifie une voie de régulation protéique lui permettant de survivre dans ces conditions, par exemple activer l'expression des génes de sporulation, renforcement de la paroi cellulaire...etc.  [...]

Du sang obtenu à partir de cellules de peau

La protéine correspondante OCT4 est un facteur de transcription connu pour être exprimé précocement dans les cellules embryonnaires. Suivant son niveau d'expression, il permet d'établir et de conserver une pluripotence, ce qui fait de lui un des acteurs majeurs dans la création de cellules souches pluripotentes induites.  [...] Dans le cas des fibroblastes reprogrammés en cellules sanguines, et grâce à une régulation fine de son expression, aucun signe de pluripotence n'a pu être mis en évidence. En revanche, les cellules ont commencé à exprimer les antigènes CD45, spécifiques des cellules hématopoiétiques progénitrices.  [...]

proteine

Synthèse in vivo, dans la cellule, donc la synthèse classique, où il peut y avoir beaucoup de variantes. synthèse dans organisme modèle, synthèse dans organisme d'origine (la plus normale ), synthèse dans bactérie,...à condition d'adapter les constructions des vecteurs d'expression lorsque ceci est nécessaire.  [...] Oui c'est exactement ça, c'est à dire comme la synthèse selon Merienfield. Une fois qu'on a compris ce principe, on comprend les autres principes de synthèse d'autres macromolécules. En effet, le fait de greffer le premier nucléotides en premier est très important pour les étapes de purification ultérieures.   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de detection de ma protéine par immunofluorescence

j'ai fixé mes cellules avec du méthanol pur froid (-20°C) 48 heures apres la transfection 10 min, à 4°C. J'ai lavé avec du PBS, incubé avec mon anticorps anti-V5 (dilué au 1/200ème) 1h à 37°C, relavé avec du PBS et incubé 1h à 37°C avec mon anticorps anti IgG de souris couplé au FITC.  [...] J'ai une question un peu bête mais as-tu vérifié que ta protéine de fusion NS3-V5 est bien exprimée dans tes cellules après transfection avec un simple SDS-PAGE Je n'ai jamais fait d'expression en cellules eucaryotes mais je suppose que c'est un peu comme pour les bactéries.  [...]

Une arme étonnante contre le mélanome : la dangereuse salmonelle

C'est là qu'intervient Salmonella typhimurium, une des bactéries responsables de la salmonellose (maladie entraînant des diarrhées et des fièvres parfois mortelles). En effet, des recherches menées à l' Istituto Europeo di Oncologia (IEO) à Milan montrent que l'injection de salmonelles dans des souris atteintes de mélanome rétablit l'adhésion et la communication des cellules cancéreuses grâce à l'augmentation de l'expression des Cx43.  [...] Quel est le mécanisme entrant en jeu L'expression des Cx43 permet aux mélanocytes de rétablir un lien avec les cellules dendritiques. Celles-ci appartiennent au système immunitaire et se comportent comme des cellules présentatrices d' antigènes. Bien qu'habituellement les antigènes exposés à leur surface proviennent de leur propre cytoplasme, certains antigènes peuvent provenir de cellules voisines via les jonctions communicantes.  [...]