• Santé - ARNm, Sonde, ADN

Northern Blot

Sachant qu'au départ j'ai une sonde ADN complémentaire à l'ARNm étudié.  [...] Pour le northern-blot, tu fais directement migrer tes ARN purifiés ou non (soit des ARNtotaux, soit des ARN polyA+) sur gel d'agarose. Tu transfert sur une membrane et tu hybrides avec ta sonde.  [...]

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN !

Quelle est la différence entre une puce à ADN et sonde à ADN.  [...] Re. Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...]

Sequence 5' pour un ADNc en Southern Blot

Voici ma question. Compte tenu du fait que l'ADNc ne contient que des exons comment se fait il que la sonde extremité 5' detecte quelque chose car il me semble que dans L'ARN mature ( qui permet d'obtenir l'adn c par RTPCR ), la sequence 5' n'est pas transcrite.  [...] salut, je ne suis pas sure mais le probleme me parrait beaucoup plus simple que ca. quoique c'est pas trés clair..quand tu dit une sonde 5'.qui s'hybride avec l'extrémité 5' de l'adn c ou g...ou bien tu parle de sonde marqué à son extrémité 5'...parceque si c'est le cas ca change tout.  [...]

gel shift : hhhheeeeelllp !!!!!!!

je suis en thèse et je travaille sur une proteine dont on voudrait confirmer l'interaction avec un promoteur d'un géne... je dois faire du gel shift mais dans mon labo on ne peut pas utiliser de radioactivité... j'ai vu qu'il existe des kits qui ne necessitent pas de radioactivité, il y en a même un ou il n'y a meme pas besoin de marquer la sonde d'ADN, il suffit de colorer le gel apres migration avec du SYbr green et du Sypro, cela a l'air tres pratique.  [...] g qd même encore une petite question...je sais qu'il faut faire des expériences de compétition sonde chaude/sonde froide pour tester la spécificité de l'interaction ADN/prot... s'il y a des aspécificités, est-ce dû au marquage de la sonde.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercices important!!

j'ai besion d'aide car j'ai un partiel de biologie cellulaire ce vendredi et je n'arrive pas a répondre a des exercices d'annales j'y comprend vraiment rien.   [...] ce fragement est utilisé comme sonde ds une expérience de southern blot sur l'ADN génomique totale a partir duquel cette sonde avait été générée.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN.  [...] parce que selon les conditions le signal que l'on cherche a détecter est très très faible.   [...]

[Biotechnologie] Tp rt-pcr

J'allé dire la même chose, on peut fabriquer de l'ADNc en vu de faire une sonde, ou alors on utilise la RT-PCR en vu de séparer les l'ARNm des autres ARN en synthétisant de l'ADNc en appareillant un fragment dT(qui est complémentaire a la queue poly A de l'ARNm) qui sert d'amorce a la RT.  [...] b'en le problème c'est que je n'ai pas de lignée cellulaire ni de bactérie, donc je pars un peu de zéro. tout ce dont j'aurai besoin devra être chiné à gauche et à droite dans les labos autour du notre (laboratoire de formation pour adulte)...c'est pour ça je pense que j'ai du mal à trouver un sujet de départ.   [...]

[Biologie Moléculaire] Ribosonde

Pouvez vous m'expliquer simplement la façon dont on crée une ribosonde Je ne comprends pas en effet ce que contient le vecteur au départ (de l'ARN ou de l'ADN), pourquoi on l'appelle ribosonde et pas sonde tout court. D'ailleurs, c'est de l'ARN la ribosonde Bref, merci beaucoup d'avance.  [...] Une ribosonde est tout simplement une sonde d'ARN. Comme elle est composée de RIBOnucléotides, on ajoute ribo devant sonde pour la différencier des sondes d'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

Par ailleurs, ne peut-on pas imaginer que lorsque l'on utilise des sondes courtes, on puisse trouver aussi des séquences exactement complémentaire de la sonde avec une probabilité élevée.  [...] le but de la sonde est de detecter l'adn d'interet, alors pourquoi la préhybridation vu qu'elle va s'hybrider avec notre adn recherché.  [...]

Etudier l'expression d'ARN non codants

En ce qui concerne les ARNm il est facile de répondre le western blot puisqu'il y aura une protéine. Ou bien la RT-PCR avec une sonde poly-T puisqu'ils ont une queue poly-A (pour la plupart).  [...] Mais en ce qui concerne les ARN sans queue poly-A, par exemple les ARNm d'histone ou bien des longs ARN non codants comment faire au niveau de la RT-PCR Pas de sonde poly-T possible du coup.  [...]