• Santé - ADN, Manipulation, Charge, Protéines

[Microbiologie] extraction d'ADN

j'ai fait l'extraction d'ADN au phénol chloroforme je me suis rendue compte à la fin de la manipulation que le culot est chargé également en protéines pourrais je me rattraper.  [...] pour extraire t adn t peux faire une chromatographie avec une hydorxyapatite avec la forme minerale de phosphate en partant au depart par une cncentration faible puis pr eluer tn adn au augmente la concentration mais bon ça depnde aussi de la charge des autre proteines.  [...]

[Microbiologie] extraction d'ADN

J'ai effectué une extraction d'ADN au phénol chloroforme après je m'aperçois que l'ADN n'est pas pur, autrement dit il y'a des restes des protéines et des lipides j'ai repris l'extraction à partir de phénol qui me permet de se débarrasser des protéines et le chloroforme pour éliminer les lipides, en mettant 2µL SUR GEL D'AGAROSE je n'ai pas obtenu de bande j'ai dilué le culot dans 50µl d'eau que dois je faire dois je prendre 6 µl de l'ADN sur gel ou bien dois je refaire la manipulation je n'ai pas envie de tout refaire je suis pressée mon encadreur m'a demandé de lui donner un compte rendu dans les plus brefs délais.  [...] J'ai pas très bien compris ton message, mais si tu doute que tu n'as pas assez d'ADN, donc tu ne vois rien sur gel, tu as 2 solutions, soit tu charge ton gel avec plus de volume (6µl ou même plus), sinon, tu peux aussi sécher ta suspension d'ADN au speedvac pour pouvoir concentrer ton echantillon.  [...]

[Biotechnologie] miniprep par lyse alcaline

Le forum n'est pas un tchat. Vous avez tout le temps d'écrire correctement. La première des corrections, surtout quand on cherche de l'aide, c'est de respecter les lecteurs et les règles du forum. Ecrire correctement en fait partie.   [...] je demande à ce qu'on me donne des conseils pour affiner ma manipulation.. j'utilise une miniprep maison par lyse alcaline. le protocole est optimisé au sein de l'unité de recherche où j'effectue mon projet. Mais j'arrive pas à obtenir de bons résultats.. j'ai toujours de bandes d'ADN génomique.  [...]

[Divers] Contenu "Matériels et méthodes" - rapport stage M1

Les extraits protéiques sont dénaturés à 95°C pendant 5 minutes en présence de LSB 1X final avant d'être déposés sur un gel de polyacrylamide dénaturant à 6%. Les immunoprécipitations sont dénaturées à 95°C pendant 5 minutes dans 25 µl de LSB 2,5X. Après migration électrophorétique, les protéines sont transférées en milieu liquide sur une membrane de nitrocellulose (HybondTM C Extra, Amersham Bioscience) pendant 1h30 dans un tampon de transfert (50 mM Tris base, 40 mM Glycine, 1,3 mM SDS et 10% éthanol).  [...] J'ai mis mes oligos dans un tableau avec les séquences et commentaires pour dire quel oligo apporte quoi dans l'histoire et j'ai fait un schéma où je les positionne sur les gènes. Le truc est que j'avais séparé mon M&M en 3. Souches bactériennes, plasmides, milieux de culture, Manipulation de l'ADN (tout ce qui est PCR), Construction des plasmides recombinants et je pensais ajouter une 4e partie Séquençage, mais là quand j'y pense, ça me paraît plus logique de le mettre dans Manipulation de l'ADN.  [...]

applications de la PCR

En effet, elle occupe une grosse part de l'activité des labos en virologie. On l'utilise en bactériologie (pour les bactéries à croissance lente, de culture fastidieuse, ainsi que pour faire des diagnostiques rapides). On la retrouve aussi en hématologie (recherche de réarrangements chromosomiques à l'origine de problèmes hémato, recherche de mutations responsables de problèmes de coagulation...) et en génétique.   [...] Note. la première méthode est ciblée car on sait à l'avance où se trouve la mutation (car on a générer les amorces à PCR soi-même), la 2ème est dirigéé mais l'on ne sait pas où se trouve la/les mutations, elle nécessite un screen fonctionnel.   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de PCR

On a fait amplifier de l'ADN de certains de nos échantillons et on faisant migrer les produits sur gel, il s'est avéré que y a eu contamination (révélation d'une bande sur gel correspondant au contrôle négatif).  [...] Après il est aussi possible que les contaminations observées ne proviennent pas d'un des réactifs mais simplement du fait de la manipulation de l'ADN a proximité du contrôle négatif. Ca peut expliquer pourquoi dans une PCR sans ADN tout soit blanc.  [...]

Cicatrices d'acné : le laser, traitement miracle | Dossier

Les cicatrices d'acné constituent la complication la plus fréquente après cette infection. Leur survenue est favorisée par la prise en charge thérapeutique tardive ou inadaptée ainsi que par la manipulation des lésions par les malades. On ne saurait trop insister sur l'intérêt de prévenir l'apparition de ces cicatrices car une fois installées, elles sont extrêmement difficiles et onéreuses à prendre en charge avec un résultat inconstant et incomplet.  [...] Les lasers erbium-YAG qui agissent par effet mécanique et thermique sur l' épiderme et le derme superficiel aboutissent à l'obtention d'un derme régénéré et permettent de retrouver une meilleure tension cutanée et un effet de relissage. Il faut savoir qu'il est généralement préférable de réaliser ce type de traitement en hiver, avec en plus une bonne protection solaire (écran solaire anti UVA et UVB à haut indice de protection 50 +) pour éviter et réduire au maximum le risque de cicatrices pigmentaires (taches brunâtres) qui peuvent être générées par ce type de traitement.   [...]

rats KO

Thibault un rat KO est un rat dit Knock-Out pour un gène donné ce qui signifie que ce gène est inactif sur ses 2 allèles et donc le rat n'exprime pas la protéine ou le marqueur ou le machin ou le bidule exprimé normalement par ce gène.  [...] Bon on peut faire du KO avec à peu près n'importe quel type d'organisme, mais les souris sont souvent les plus utilisées, et on a construits des centaines de lignées de souris KO, mutées pourun gène précis à chaque fois. Ca a permis d'étudier pas mal de pathologies et nottament l'artériosclérose (mais c'est loin d'être la seule).   [...]

Les traitements de l'épilepsie | Dossier

La stimulation vagale consiste à stimuler le nerf vague à l'aide d'un implant placé dans le thorax. Toutes les cinq minutes, ce pacemaker envoie une impulsion électrique. La stimulation vagale permet de réduire la fréquence des crises. La stimulation intracérébrale à l'aide d' électrodes est également possible.   [...] Celle-ci pose cependant des problèmes éthiques dans la mesure où cette technique peut apparaître comme une manipulation du cerveau du patient. Enfin, une prise en charge psychiatrique ou psychologique est parfois recommandée, notamment quand des facteurs psychologiques semblent à l'origine des crises.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mesure de pureté d'une préparation d'ADN aberrante?

J'avais pensé à une contamination par autre chose que des protéines, mais je vois mal ce qui a pu contaminer en absorbant à 260 pile, et ni à 280 ni à 320. Et surtout qu'est-ce qui peut contaminer mon ADN, à part des protéines Des restes de la lyse des hépatocytes Un truc de la solution tampon.  [...] C'est le premier TP où on prépare nous même de l'ADN, d'habitude il nous est donné tout prêt, donc une mauvaise manipulation est plus que probable en effet.  [...]