• Santé - ADN, Intérêt, Infection

[Biotechnologie] vecteurs pGEMT -TOPO- Pbluescript - lambdaZAGII

j'ai compris que les vecteurs types pbluescript, pGEMt et Topo possèdent. les caractéristiques des plasmides (origines de réplications plasmidiques, 1 ou plusieurs gènes de sélection c'est à dire de résistances à un antibiotique, un gène marqueur l'opéron lactose qui lorsque l'ADN d'intérêt sera inséré ne permettra plus la synthèse de la beta galactosidase et donc la formation de colonies bleues sous l'action du Xgal et de l'IPTG) des caractéristiques phagiques comme une origine de réplication phagique F+ ou F- avec réplication dans le sens de l'opéron lactose ou dans le sens opposé ( lié au sens d'insertion de l'ADN d'intérêt ou bien aux caractéristiques du phage M13 de ne synthétisé qu'un brin d'ADN dans le cas ou l'infection est réalisée avec un phage helper ).  [...] Ensuite dans le cas du phagemide lambda zagII j'ai compris qu'en gros le vecteur est composé du bras gauche et droit du phage lambda et que la partie centrale a été remplacé par le pbluescript avec l'ADN d'intérêt et qu'apparemment la co-infection avec un phage helper permet ensuite son excision.  [...]

[Biotechnologie] vecteur de clonage et vecteur d'expression

donc si j'ai bien compris, le vecteur de clonage s'utilise in vitro alors que le vecteur d'expression est inséré dans une bactérie pour exprimer le gène d'intérêt.  [...] Un vecteur de clonage permet, comme son nom l'indique, de faire un clonage, c'est à dire de placer un insert dans le vecteur d'intérêt (ligation) puis après transfection/conjugaison/infection/... de multiplier la quantité d'ADN au cours des divisions bactériennes/des infections virales/... selon le type de vecteur utilisé.  [...]

arn messager : mise en evidence

dans mon cours, mon protocole (jacob/monod, ou volkin et astrachan) est pas clair du tout sur la mise en evidence de l'arn messager comme intermediaire entre adn et protéines. on me parle de phage T2, de phosphore, carbone et azote radioactif avant l'infection puis non marqué ensuite, mais je n'ai pas les resultats clair et les interpétations en decoulant.  [...] quelqu'un a t-il les idées (ou un cours) clairs sur le sujet.   [...]

Structure d'un phage

Mais ou se trouve la fameux site cos qui rend possible l' empaquetage de l'ADN dans la capside et à quoi sert t il dans le clonage.  [...] Le phage possède bien un ADN double brin linéaire et ses extrémités sont les séquences COS (séquences cohésives d'ADN simple brin qui font 12 bases). L'ADN du phage peut donc se circulariser grâce aux COS. On peut empaqueter in vitro de l'ADN exogène dans l'ADN phagique tout en conservant les régions COS, le phage encapside par reconnaissance des régions COS puis après infection sur des bactéries l'ADN se re-circularise dans son cytoplasme.  [...]

Technique Gateway

je pense que l'interet du vecteur donneur (qui devient vecteur d entrée après avoir récupéré le gène) est qu'il a tout les gènes permettant l'infection lambda et les gènes accompagnateurs de la recombinaison. Et le vecteur de destination (qui devient d'expression) a les gènes permettant la suexpression du gène d'intéret (promoteur inductible ou costitutif,...).  [...] Il n'ont pas pu mettre tout ces gènes (infection+recombinaison+suexp ression du gène d interet) dans le meme vecteur parceque ca prendrait trop de place est ce que c est ca.  [...]

[Divers] Prion et infection

On sait que l'infection est due à l'introduction d'acides nucléiques (ADN ou ARN) dans une cellule.  [...] En faite ta question sera, j'en suis désolé sans réponse, en effet pour l'instant on ne comprend pas grand chose à ce mécanisme pour le moins paticulier. Une théorie est que les protéines prions (qui ne sont rien d'autre que des protéines avec la même structure primaire que les protéines homologues normales mais ayant une conformation anormale) agissent sur leur homolgue normal comme des protéines chaperonines et changent donc leur structure.   [...]

La tactique du virus de l'herpès pour infecter le cerveau

Chez les personnes immunodéprimées, il peut également être responsable d'infections graves, voire mortelles, telles que des encéphalites.  [...] Pour comprendre, il faut en revenir aux caractéristiques du virus de l' herpès. Il appartient à la famille des herpesviridés qui contiennent de l' ADN double brins. Lors de l'infection d'une cellule, l'ADN viral entre dans le noyau et utilise la machinerie cellulaire présente.  [...]

applications de la PCR

La detection de fragments d'ADN par PCR est certes tres utile et novateur (enfin 20 ans quand meme) mais ne represente qu'une infime partie de ce que cette technique permet.  [...] Le problème des échantillons étudiés dans le médical est qu'on peut retrouver des inhibiteurs de PCR dans les prélevements. faux négatifs. D'où l'intérêt du développement de contrôles internes.  [...]

[zoologie] Pigeon coincé!

J'ai une question qui va peut-être paraître bête, parce que tu y sans doute pensé avant, mais n'y a-t-il aucun endroit de l'immeuble d'où il serait possible de l'atteindre plus facilement (autre appartement, grenier, combles...) As-tu un concierge, ou quelqu'un qui connaisse assez bien l'immeuble pour savoir si il n'est pas possible d'aller sous le toit de l'intérieur.  [...] Si jamais tu le récupères, tu as intérêt à très bien lui désinfecter ce qui lui reste de patte, car, s'il ne meurt pas d'épuisement, il risque de mourir d'infection.  [...]

Obtention d'un homozygote par transgénèse avec Agrobacterium Tumefaciens

Pour l'instant la seule procédure qui me vient à l'esprit serait de réaliser une double infection avec un premier T-plasmide porteur d'un marqueur de sélection et du gène d'intérêt, de sélectionner les recombinants puis de réaliser une deuxième infection avec un deuxième T-plasmide porteur d'un marqueur de sélection différent du premier et du même gène d'intérêt.  [...] Les individus homozygotes pour le gène d'intérêt transféré seraient alors ceux porteurs des DEUX marqueurs de sélection (par exemple résistence à la Kanamycine et une protéine de fluorescence).  [...]