• Santé - ADN, Coupe, Site

Enzyme de restriction

Et est ce qu'elle coupe l'ADN etrangé avec son site de restriction = son propre ADN.  [...] Je crois qu'il y a confusion. Comment vois-tu une enzyme de restriction Quelle action de l'enzyme de restriction regardes-t-on lorsqu'on effectue la carte de restriction d'un plasmide Pour information, ce qui est représenté sur une carte de restriction ce sont les sites de coupure par des enzymes de restriction, et non pas les enzymes de restriction elles-mêmes.  [...]

[Biologie Moléculaire] marqueurs moleculaires

De l'ADN est coupé en fragments par une enzyme de restriction, cette dernière coupant l'ADN au niveau d'une séquence qui lui est spécifique (site de restriction). Les fragments d'ADN ainsi obtenus, nommés fragments de restriction, sont ensuite séparés selon leur longueur par électrophorèse sur gel d'agarose, on obtient un profil.  [...] Ce profil varie selon les individus ce qui traduit bien un polymorphisme. Ces différences entre profils sont causées par des variations dans les séquences de nucléotides, ce qui va créer ou faire disparaître des sites de restriction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Choisir le bon vecteur?

il faut couper le vecteurs par un enzyme de restriction ensuite il faut inserer les meme sites de restriction autour de la sequence d'adn qu'on veut afin qu'on integre la sequence dans le vecteur.  [...] 1- ma sequence d'adn doit etre coupe des 2 bords par la meme enzyme. Or je retrouve pas le meme site de restriction 2 fois dans ma sequence.  [...]

Southern blot et séquençage - Interprétation

Donc on peut en déduire que cette mutation a coupé au niveau de ce site le fragment d'ADN de l'individu 2, ce qui explique le mauvais fonctionnement de son activité enzymatique.  [...] J'ai également besoin d'aide sur cet exercice, pourquoi avoir utilisé le brin matrice pour apres repérer le site de coupure de l'enzyme de restriction, n'est il pas possible de le faire avec le brin neosynthétiser.  [...]

Enzyme de restriction: petite difficulté avec sa définition

D'après mon cour, une exonucléase détache des nucléotides terminaux, une endonucléase coupe les liaisons à l'intérieur de la chaine. Toujours d'après mon cour, une enzyme de restriction est une endonucléase... C'est ce que je ne comprends pas. cette enzyme de restriction semble couper la séquence de nucléotides aux extrémités, comme le fait une exonucléase.  [...] une enzyme de restriction reconnait un site (=une séquence) spécifique sur l'ADN et coupe de chaque coté de ce site. Si le site est à l'extrémité d'un brin d'ADN linéaire, alors elle peut couper.  [...]

[Microbiologie] Hybridation

Le site de reconnaissance est super long (je trouve que 27-28 nucléotides de détection, non dégénéré, c'est long - à comparer avec les 6-10 normalement), ce qui signifie une fréquence de coupe de l'ADN faible (donc de plus gros fragments).  [...] Non, cette enzyme a tendance à rester accrocher à son site de coupure. Le SDS va dénaturer l'enzyme, qui va donc se décrocher. Il faut donc l'ajouter après la digestion et avant la migration de l'ADN.  [...]

microbiologie (sens anti-sens)

Par convention les brins d'ADN sont toujours écrit de gauche à droite du 5' vers le 3' (sens), l'anti-sens étant donc l'opposé 3' vers 5'.  [...] .) qui va coupé a des site bien précis, on aura plusieurs fragment d'ADN, on met les fragment dans un gel d'agarose par exemple et on laisse les fragment migré(cartographie de restriction)===. au final au aura la taille (base) de chaque fragment.  [...]

[Biologie Moléculaire] La carte de restriction

Si ton ADN est linéaire et que la digestion par une enzyme (exemple Bam HI) génère deux fragments (de 14 et 1 kpb), ça veut dire qu'il n'y a qu'un seul site pour cette enzyme =) comme un fil qu'on coupe en deux une seule fois. on se retrouve avec deux morceaux.  [...] La coupure EcoRI permet d'obtenir deux fragments, donc il y a un seul site EcoRI. C'est concordant avec coupure par deux enzymes qui génère 3 fragments (un site de restriction pour chaque enzyme).  [...]

[Biologie Moléculaire] Polymorphisme de restriction

Ce que vous appelez marqueur c'est simplement une mutation dans un site de restriction qui va faire qu'un fragment d'ADN, obtenu à partir d'un gène donné, va être coupé, ou non, par une enzyme de restriction, selon que le gène est sous la forme d'un allèle, ou d'un autre.  [...] En gros quand la mutation est présente l'enzyme de restriction est incapable de reconnaître son site de restriction et ne va pas le couper.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage

On a coupé l'ADNg avec BamHI et le sous fragment BamHI-BamHI qui confere la thermoresistance a des levures Ts ura- a été sous-cloné au site unique BamHI du vecteur YIp(sans origine de replication) qui contient le gene URA+ comme marqueur de selection.On recupere deux transformants URA3+,Tr1 et TR2,dont on extrait l'ADN.  [...] Cet ADN est digéré par BglII(le plasmide YIp ne contient pas le site BglII et le sousfragment BamHI-BamHI contient un site BglII).L'ADN digéré est analysé par Southern en utilisant comme sonde radioactive le fragment BanHI-BamHI d'une part et le plasmide YIp sans insert d'autre part.Voila les resultats de l'autoradiographie.  [...]