• Forum - Volume, éthanol, Concentré, Concentration

[Biologie Moléculaire] travaux pratiques, isolation plasmide

L'éthanol 70% permet de faire précipiter l'ADN. On utilise d'abord de l'éthanol 96% (ou plus concentré) car on le rajoute en général à un volume de solution aqueuse qui contient l'ADN (souvent après une étape de phénol-chloroforme) et qui va diluer un peu l'éthanol.  [...] On rajoute un volume suffisant d'éthanol concentré pour obtenir une concentration finale à environ 70%. On centrifuge alors pour faire tomber l'ADN au fond du tube, on enlève le surnageant et on mets ensuite de l'éthanol à 70% directement, car il n'y a plus de solution aqueuse pour diluer l'éthanol.  [...]

[Biochimie] floculation des protéines dans EtOH

- la deuxième consiste à faire floculer les protéines, en rajoutant à notre oeuf brisé une solution très concentrée d'éthanol, ce qui a pour effet de faire précipiter les protéines. On dose ensuite par la même méthode, la quantité d'eau dans l'oeuf.  [...] J'ai ensuite placé mon mélange dans une étuve à 105 °C, et j'ai attendu que l'éthanol et l'eau soient totalement évaporés pour repeser mon oeuf (matière seche).  [...]

[Biologie Moléculaire] dilution

ok, c'est juste un exemple le Nacl courant, j'utilise un composant qui pose problème à forte concentration d'où la nécéssité de le mettre en solution, je vais essayer comme ça, merci.  [...] quel que soit le volume ajouté, le milieu sera dilué. D'ou l'intérêt de faire une concentration mère le plus concentré possible.  [...]

[Biochimie] Résultats de purification de lysozymes

je vous mettrai le gel aussi (voir plus bas). Comme en F5 et F6 (vu la perte en lysozyme) il y avait une faible concentration on a du utiliser des tubes à concentré, avec les fractions de nos collègues, on a placé dans le tube et mis à concentré, ok je suis d'accord avec ça.  [...] .. (vous comprenez ce que je veux dire) Alors pour ça on utilise une tube à concentré. On a un volume initiale de solution après centrifugation, les 3/4 du liquide sont dessendu dans le fond tube on prélève le filtrat, onlit un volume appelé volume final. On calcul le facteur de concentration Volume final/ volume initial.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN

petite précision, l'ADN absorbe les UV a 260 nm, donc je suis sur de la longueur d'onde que j'ai choisi pour la lecture de la densité optique.De plus je trouve que l'expression de la concentration se fait par microlitre indépendamment du volume final du moment que chaque ul contient une quantité donné d'ADN.  [...] pour toute utilisation ultérieur (PCR) par exemple,on nous demande de prendre 2ul d'ADN concentré à 10ng/ul c'est pour cela je vous dit que le plus important c'est la concentration dans un volume donné (1ul).  [...]

[Biochimie] osmolarité

Il faut peut être () regarder quelle est la concentration en eau de chaque côté (moles/unité de volume) et il sera possible de justifier le mouvement de l'eau ( du plus concentré au moins concentré ).  [...] il fauit calculer les concentrations osmotiques de part et d'autre de la membrane...comme elle est imperméable aux ions et au glucose, l'eau va diffuser du compartiment le moins concentré vers le plus concentré pour tenter d'équilibrer les concentrations.  [...]

[Biochimie] Extraction Périplasmique

Le culot bactérien est resuspendu in cold PBS at a 20 fold concentration (ce qui a été décrit dans l'article) ce que j'ai compris c'est la resuspension du culot dans un volume de PBS froid concentré 20X qui est très très riche en sel.  [...] j'ai fait le dialyse contre TRIS-HCl/EDTA mais je ne sais pas si cava influencer sur la stabilité, la conformation,.. de ma protéine j'ai pas encore vu sur gel.   [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation Solution Tris-HCl

Utilise de la soude très concentré (5 ou 10N) de sorte que le volume de soude que tu auras à ajouter sera négligeable et ne modifiera pas ta concentration final en Tris-HCl. Le pKA du Tris est de 8,3 donc tu ne devrais pas être loin du pH que tu désires au final.  [...] Donc en fait soit je dois rajouter qu'un tout peit volume de soude, ne changeant pas énormément mon volume finale donc ma concentration. Soit je dissout ma poudre Tris-Hcl dans dans 10mL d'H2O contenant déjà la soude mais la ce n est pas pratique pour connaitre le pH a l avance.  [...]

Stérilisation grand volume milieu de culture

Si ton saccharose est pure et que tu utilises de l'eau milliQ, ça ne devrait pas caraméliser. Fais l'essais avec la même concentration mais dans un volume moindre (100mL par exemple).  [...] Perso c'est ce que je fais lorsque je dois mettre une concentration élevée en saccharose dans un milieu. Je prépare mon milieu sans sucre (avec un volume moindre). Et parallèlement je prépare ma solution de saccharose très concentré (= seule = pas de caramel ^^) que j'ajoute ensuite (sous hotte si besoin d'être relativement stérile) à la préparation initiale.  [...]

Physio Rénale (gradient cortico-médullaire/papillaire)

Le résultat, c'est que quand l'urine, très diluée (volume d'eau presque pareil, concentration en sel bien moindre), arrive dans le tube collecteur, elle se retrouvera, quand elle descendra de la partie corticale vers la partie médullaire, en face d'un interstitium très, très riche en sel, et si les cellules du TC ouvrent les vannes (inclusion d'aquaporines dans leurs membranes), elles peuvent réabsorber l'eau libre, ce qui concentre l'urine.  [...] La régénération permanente du gradient permet même de surconcentrer les urines au-delà de la concentration du plasma (mais pas beaucoup. les urines peuvent être au maximum deux fois plus concentrées que le plasma, alors qu'en sens inverse elles peuvent être dix fois moins concentrées).  [...]