• Forum - Unité, Enzyme, Restriction

alpha amylase

Une unité (U) d'enzyme correspond à la quantité de cette enzyme nécessaire pour digérer une certaine quantité de substrat pendant un certain temps et dans certaines conditions (température, volume...).  [...] Par exemple, la définition de l'unité est différente pour une enzyme de restriction comme BamHI (qu'on utilise en biologie moléculaire) et pour l' alpha-amylase.  [...]

[Biologie Moléculaire] travaux pratiques, isolation plasmide

on utilise une enzyme de restriction Pst I 1ul et 0,75 ug DNA est ce que la quantite denzyme sufisante pour couper DNAsi non combien t a besoin pour couper cette quantite de DNAet pour combien de temps.  [...] 1 µL d'enzyme ça ne veut pas dire grand chose... Il faudrait connaître la concentration de PstI et elle est écrite sur le tube normalement. La concentration des enzymes de restriction est souvent de 10 ou 20 (parfois 50) U/µL. U est l'abréviation pour unité (d'enzyme) et par définition, une unité permet de digérer 1 µg d'ADN en 1 heure à 37°C et dans un volume final de 50 µL.  [...]

[Biologie Moléculaire] Calcul d'unités enzymatiques

Je dois calculer la quantité théorique d'enzyme de restriction Bam HI et Hind III a utiliser pour digérer 1 microgramme de plasmide pSK et 1microgramme de plasmide pCR-gai ds les conditions standards.  [...] Je connais la définition d une unité d'enzyme de restriction mais je ne comprends pas comment interpréter 1microgramme d'ADN du phage lambda alors qu'on nous donne 50kpb... Y a t il une conversion a faire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Site de restriction

1- ecrit un site de restriction sur le papier enzyme regarde ou l'enzyme va couper, et essaye de trouver tous les moyens de couper. tu vas vite t'appercevoir qu'il y a deux grandes familles de coupures.  [...] Chaque outil de découpe représente une enzyme de restriction différente et chaque endroit où la coupure est plus facile devrait représenter le site de restriction spécifique à l'enzyme.  [...]

[Divers] clonage et maths

Le problème avec le clonage d'un fragment d'ADN c'est que le matériel n'est pas classiquement présent dans un lycée (pas de bactérie, pas de plasmide, pas d'enzyme de restriction). Vous pourriez éventuellement tenter de trouver un labo qui veuille bien vous accueillir 3 demies journées pour vous faire faire un clonage (il serait bien sympa ce labo).  [...] On retrouve aussi des math au moment où l'on s'intéresse à combien d'enzyme on met (restriction, ligase) et combien on a de sites, de restriction, de ligation, combien de temps on veut prendre etc... Jusque là c'est finalement que des changements d'unités, des règles de trois.  [...]

[Biologie Moléculaire] comment crée un site de restriction pour une enzyme

[Biologie Moléculaire] comment crée un site de restriction pour une enzyme.  [...] s'il vous plait aidez moi à crée un site de restriction de l'enzyme DraI qui coupe dans la région palindromique TTTAAA.  [...]

[Biologie Moléculaire] rendre un plasmide linéaire

Effectivement tu utilise une enzyme de restriction à un seul site de restriction.  [...] Je n'ai pas d'exemple là, mais en bref c'est comme si tu coupe un élastique avec des ciseaux. Tu coupe une fois et ton élastique devient linéaire.   [...]

[Biologie Moléculaire] vecteur

j ai une serie 6 enzyme de restriction et on me demande comment faut il preparer le plasmide,par que enzyme de restriction parmi les 6(bsrDIBSALASELECORIBAMHI PSTI),et en fait j aimerai savoir comment voit on quand il y a incompatibilite entre les extremite cohesive d un fragment digéré par une enzyme (dans mon cas c est NDei)et un plasmide ouvert.  [...] L'insertion d'une séquence d'ADN bicaténaire dans un plasmide nécessite un traitement préalable par une enzyme de restriction. On choisit une enzyme qui a un site unique dans la séquence plasmidique. Après action de l'enzyme de restiction, le plasmide circulaire est linéarisé.  [...]

[bio mol] hélicase

moi je pensais sinon fabriquer un ADN double brin linéaire. contenant non loint de l'origine de replication un site de reconnaissance d'une enzyme de restriction.  [...] l'experience consiste a mettre l'hélicase et l'enzyme de restriction et on ne devrait plus avoir qu'une bande (car l'enzyme ne peut pas coupé de facon simple brin).  [...]

[Biotechnologie] An efficient TALEN mutagenesis system in rice

5. Excise the restriction enzyme-insensitive fragments of the same size as the undigested DNA fragment, and purify them with a DNA gel Extraction kit as described by AXYGEN.  [...] 4. Miniprep the plasmids and confirm the correct colonies by repeating the restriction enzyme digestion, but the digestion time can be shortened to 510 min.  [...]