• Forum - Techniques, Visualisation, Cellules

Visualisation d'une cellule apoptotique....

Mais, il va nous falloir visualiser quelles cellules sont en apoptose et quelles cellules ne le sont pas (nécrose,...). Cette visualisation ne poserait pas de problèmeparticulier si on se foutait du sort des cellules après la visualisation, mais le problème (j'y arrive enfin ), c'est que l'on doit maintenir nos cellules vivantes pour pouvoir les patcher (Patch-clamp).  [...] Or, toutes les techniques de visualisation par fluorescence (que nous aurions aimé utilisé) necessitent de perméabiliser la membrane (pour faire rentrer le fluorochrome) ou de fixer les cellules. Donc dans les 2 cas on tue la cellule. J'aurais voulu utiliser des techniques classiques comme le DAPI, le TUNEL ou le iodure de propydium couplé à l'acridine orange, mais je pense qu'il faut perméabiliser pour ces 3 techniques.  [...]

[Biotechnologie] microscopie sur cellule transparente

Tu peux utiliser la fluorescence naturelle des cellules qui te permettra de visualiser les membranes cellulaires et pour l'ADN, j'ai utilisé le DAPI (Di Aminido Phenyl lndol) qui permet de très bien visualiser les mitoses par exemple (coloration spécifique de l'ADN).  [...] Connaissez vous encore d'autres techniques de colorations Car mon projet consiste à trouver et exploiter un maximum de techniques de visualisation des cellules transparentes.  [...]

[Biochimie] Immunoblotting, anticorps

l'immunoblotting est juste une des techniques utilisées pour arriver à ces conclusions (par visualisation de l'intensité sur SDS PAGE ), donc à priori je ne vois pas le lien avec une protéine endogène.  [...] d' ou ma question. connais tu une technique pour vérifier que la cysteine est bien proche du site actif, sachant qu on connait La séquence de la protéine mais pas sa structure 3D.  [...]

[Biochimie] Analyse de résultats de FACS

il étudie un anticorps (MORab_009) et veuille savoir si il reconnait A431-K5 uniquement et verifier qu'il ne reconnait pas les cellules A431.  [...] Le P2 ça doit correspondre à une stratégie de gating, c'est à dire à la visualisation d'une population particulière, sélectionnée auparavant, par exemple, les cellules vivantes.  [...]

[Biotechnologie] Technique de mesure de l'apoptose

Un truc pas cher et qui permet d'observer une caractéristique marquée de l'apoptose, c'est un marquage de cellules fixées sur une lamelle avec du DAPI et visualisation au microscope. Les cellules dont le noyau est condensé et/ou fragmenté sont en apoptose.  [...] Tu peux très bien utiliser le Bleu Trypan en indiquant ensuite dans ta discussion le biais ainsi ajouté par cette technique en expliquant le coût supplémentaire qu'aurait nécessité l'utilisation d'une méthode plus sélective. C'est un petit jeu auquel on joue souvent dans les labos.  [...]

[Biologie Cellulaire] Cytometrie et compensation!!

Si vous analysez un tube de cellules positives en CD45 et négative en CD105 avec un marquage CD45-FITC(+) et CD105-PE(-), vous devriez obtenir toute votre population positive en FL1 et négative en FL2 (visualisation en Dot Plot.). Il arrive parfois que vous ayez des cellules positives en FL2, ceci signifie que votre FL1 bave sur votre FL2.  [...] Pour remédier à cela, il vous faut compenser, c'est à dire rentrer les réglages afin que les cellules positives en FL2 deviennent négatives en FL2.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 4

Bien en voilà une autre, à vous de dire son petit nom (ça ne devrait as être trop dur je pense) et la technique de visualisation.  [...] Spontannément je me suis dis que ca pouvait être un embryon à une cellule en train de faire sa premère division de segmentation. M'enfin c'est pas ca j'en suis certain.  [...]

technique de cryofracture et cryodécapage

Petite question technique en ce qui concerne les méthodes d'observation des menbranes (plasmique surtout). dans la technique du cryodécapage j'ai pas compris l'intéret de projetter de la platine sur l'échantillon.  [...] Concernant le cryodécapage, ce dont je me souviens, c'est qu'il s'agit d'une technique intervenant dans la cryofracture. Elle permet une meilleure visualisation de ton cryodécapage. Sans cette technique, tu ne visaliserai rien (ou du moins, pas grand chose).  [...]

Quel avenir pour la biologie cellulaire ?

Vu sa petite taille, la quantité d'ADN qu'il peut transporter d'une cellule à l'autre dans sa capside (ultra-résistante) est toute petite. environ 4500 nucléotides (simple brin, cela prends moins de place). Cet ADN a été séquencé très rapidement, et deux gènes codants pour 7 protéines (merci l'épissage) ont été identifiés, puis confirmé par visualisation de ces protéines.  [...] Aujourd'hui on peut visualiser les cellules (et des protéines marquées) en temps réel, les filmer, pas seulement in vitro, mais également au sein d'un tissu, voire d'un organisme. Quand on s'intéresse à de la migration cellulaire, des déplacements de protéines, de la réorganisation de cytosquelette, c'est essentiel.  [...]

moyen mémotechnique ?

Il parait qu'il y a dans ce site une rubrique consacrée aux moyens mémotechniques pour PCEM1. Je n'ai pas réussi a trouver, si vous savez ou je peux cliquer ça m'aiderait.  [...] Au dela de se conseille une technique par la visualisation existe. Par exemple tu dois te rappeler une procerdure X ou Y de médecine ou mécanique peu importe. Donc tu imagine un chemin que tu connais (ex. de chez toi vers la fac) ensuite tu te bloque des endroits par rapport à ce que tu dois retenir (ex.  [...]