• Forum - Technique, Amplification, ADN

[Biologie Moléculaire] les enzymes

Cette enzyme, une ADN-polymérase d'origine bactérienne a en effet permis l'élaboration d'une technique révolutionnaire d'amplification de l'ADN. La PCR(réaction de polymérisation en chaîne.).  [...] bonjour pour ta réponse à la question 2 la discussion peut porter sur le fait que la PCR en recopiant l'adn peut également multiplier les mutations (même s'il est dit que c'est plutôt fiable plus on copie plus il peut il y avoir des erreurs) il suffit que la mutation ne soit pas silencieuse elle aura alors un impact plus ou moins grand par la suite.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage/ synthèse ARN/ ADN

une autre à laquelle j'ai pensé, la technique PCR qui permet l'amplification d'une séquence d'ADN.  [...] Il est possible de faire une transcription in vitro, mais encore une fois quel est le but.   [...]

[Divers] La série "Dr House"

C'est une bonne idée. Voilà un bon sujet pour tordre le cou aux messages et préjugés véhiculés par les séries sur les sciences... Je serais curieux effectivement de voir jusqu'à quel point ces séries sont empreintes de professionnalisme technique... (Et pas de la prestation des acteurs dont le rôle du Docteur House est excellent. C'est trop tard, je l'ai dit, c'est fini).  [...] Après, en pratique, je doute que le nombre de bactéries présentes sur la cuillère permette de réaliser ce test, même s'il est vrai que le principe même de la technique est d'amplifier les séquences, car la technique a très probablement un seuil de sensibilité.  [...]

[Biologie Moléculaire] Rapd

Est ce que quelqu'un peut me renseigner sur la technique de la RAPD. l'amplification aléatoire des ADN polymorphes. je n'arrive pas à bien assimiler le principe de la technique. pourquoi faut-il deux amorces orientées l'un à l'opposé de l'autre, avec une distance donnée pour que la séquence flanquée entre les deux soit amplifiée.  [...] et si c'est possible des liens ou autres choses qui expliquent comment étudier les gènes polymorphes par le biais de cette technique.  [...]

[Biologie Moléculaire] inverse PCR

le PCR temps réelle est une technique qui permet d'intégrer un dosage et donc un aspect quantitatif au processus d'amplification.  [...] et Real-time PCR c'est encore autre chose... C'est une technique de quantification que l'on peut réaliser pour mesurer l'amplification de l'ADN... Cette technique peut être utilisée sur la plupart des PCR.  [...]

[Biochimie] Lac IQ et Tac promoteur

J'ai compris l'histoire du promoteur, de l'expression dans une bactérie,mais là je te parle du test NASBA,test de détection des ARN rétroviraux qui utilise la T7pol comme aplificatuer.Mais comment se fait-il qu'une T7pol de bactériophage puisse amplifier des ARN de virus comme HIV.   [...] Pour le système NASBA, l'avantage en synthétisant de l'ADN à partir d'ARN puis de l'ARN à partir de l'ADN est qu'on a une boucle qui permet ainsi l'amplification du matériel initial. Je ne me suis pas penché sur la technique en profondeur et il se peut qu'il y ait d'autres avantages de l'utilisation de la T7 RNA polymérase.  [...]

sonde chaude et electrophorèse

j'ai lu que pour retrouver un gene, on utilise une sonde chaude et après on fait une electrophorese. pourriez vous m'expliquer le principe et comment ca permet de retrouver le gene,   [...] Je pense qu'il faut aussi que tu recherches des infos sr la PCR (technique d'amplification de l'ADN) parce qu'on en fait svt avt l'électrophorèse pr avoir le fragment en quantité suffisante pour qu'il soit visible.  [...]

SYBR green et BET (ou la non compréhension de la PCR en temps réel)

Dans la PCR classique, le BET n'est ajouté que lors du gel (directement dans le gel ou via un bain contenant du BET), il s'intercale dans les molecules d'ADN et fluoresce sous UV. Il permet une semi quantification car en général on revele en fin de reaction donc il s'agit d'une quantité finale.  [...] La différence est que la PCR en soi n'est qu'une technique amplifiant une section d'ADN, il faut ensuite pouvoir l'identifier le plus souvent en faisant une migration sur gel d'agarose coloré au BET (et encore, on peut très bien se servir du Sybr Green). A la fin de la PCR Temps Réel, on a les courbes d'amplification et de fusion Melt Curve, qui permet de vérifier que l'amplification est bien du bon fragment, donc on gagne du temps et du matériel.  [...]

création de bactéries artificielles

mais des infos concernant la technique de modofication du génome bactérien m'intéressent aussi (j'ai lu récement que des chercheurs Américains avaient inséré un gène à E.coli afin de dégrader le mercure présent dans l'eau ainsi qu'un autre pour produire une molécule qui éviterai que le mercure soit toxique pour cette souche).  [...] Moi j'ai simplement entendu parler de la fabrication artificielle d'un virus par une nouvelle technique d'amplification et de lagation des fragments d'ADN. Une fois synthétisé ce génome virale etait injecté dans une cellule et il a permi la synthèse de nouveaux virions. C'etait aussi craig venter.  [...]

la taq polymérase????

En 1990 1 enzyme appelée taq-polymérase fut élue molécule de l'année.Cette enzyme, une ADN-polymérase d'origine bactérienne a en effet permis l'élaboration d'une technique révolutionnaire d'amplification de l'ADN. La PCR(réaction de polymérisation en chaîne.).  [...] cette méthode, la PCR est également appelée amplification de fragment d'ADN, car elle permet d'obtenir après plusieurs cycles à température variablement hautes, à cause de dénaturation succééssives, un grand nombre de fragments identiques à celui de départ, ce qui revient au résultat d'un clonage avec moins d'inconvénients.  [...]