• Forum - Séparation, Analyse, Acides aminés

[Biochimie] Chromatographie à contre courant.

Voila, je suis en train de revoir mes cours de biochimie, et dans la partie décrivant les méthodes de séparation et d'analyse des acides aminés, mon prof a parlé de Séparation à contre courant mais j'ai pas très bien suivi à quoi ça correspond (le principe/protocole, en quoi il peut être utilisé pour les acides aminés etc.).  [...] En cherchant sur le net j'ai juste appris que c'était également appelé Chromatographie à contre-courant ou Chromatographie de partage centrifuge mais rien d'autre qui puissent me faire comprendre.   [...]

dosage d'acides aminés et de vitamines

j'ai besoin de votre aide, j'aimerais bien avoir une méthode de séparation et de caractérisation des acides amines et des vitamines dans les viandes, sachant que je dispose d'une HPLC C8 et C18 colonne zorbax.  [...] j'aimerais bien aussi avoir la méthode de l'extraction qui précède l'analyses.  [...]

Identification des acides aminés d'une plante

Pour une première vérification et séparation, je te conseille une chromatographie sur couche mince (simple à faire, facile à comprendre,peu cher et les protocoles se trouve très facilement sur internet). Une fois migrer tu colores à la Ninhydrine (un coup de pinceau puis séchage), elle colore tous les acides aminés en violet, sauf la proline qui est colorée en jaune.  [...] Point II.4. Je ne suis pas sur que replacer à pH 7 soit crucial... Autant le volume d'HCl à ajouter pour faire une solution à HCl 6 M est simple a calculé que replacé à pH 7 est plus compliqué... Il faut un pH-mètre (risque de contamination) car les acides aminés peuvent jouer un rôle dans le pH.  [...]

[Biologie Moléculaire] Page sds

Je profite de ce topic autour du page-sds pour vous demander un éclairage de ma lanterne s'il vous plaît. Nous avons évoqué cette technique de séparation des protéines selon leur masse dans le cadre de mon master 2, mais les protéines étant de composition en acides aminés différente, avec ce que ces derniers peuvent avoir de fonctions acides ou basiques différentes, je n'arrive pas à comprendre comme la charge globale d'une protéine dénaturée au page sds peut être la même entre deux protéines différentes.  [...] La différence en poids moléculaire (et donc longueur et/ou complexité) entre protéines est énorme. Mais la dénaturation est là pour simplifier leur structure (il n'est censé resté que la structure primaire), et le SDS va camoufler les acides aminés de la protéine et en profiter pour uniformiser la charge.  [...]

[Biologie Moléculaire] Solution Q du kit Qiagen

effectivement Marie_Eve a raison. il ne faut pas oublier la précipitation des acides nucléiques avec de l'alcool (à 70 % je crois). Mea Culpa.  [...] -les tampons RLT et RW1 contiennent du guanidium isothiocyanate. C'est un sel chaotropique qui en milieu acide et alcoolique attire les molécules d'eau permettant une réaction d'adsorption des acides nucléiques sur la silice. Ici, les particules de silice sont disposées sur colonne et la séparation s'effectue par centrifugation.  [...]

[Biochimie] Chromatographie de partage

D'après ce que j'ai compris la chromatographie de partage est une technique de séparation des composant selon leur hydrophilicités ou leurs hydrophobicités. On a deux phase une stationnaire (fixe) et l'autre mobile. Mais quelle phase est hydrophile et la quelle et hydrophobe et lorsque en utilise un milieu acide qu'est ce que sa change Car au cours de ma révision j'ai rencontrer un exercice dans lequel ils me demande de classer des acides aminé (Val, Tyr, Lys et l'Asp) soumis a une chromatographie de partage dans un milieu acide.  [...] Ma répons était Asp. Lys. Tyr. Val si la phase fixe était hydrophobe, en se basant sur un tableau de dans lequel les acides aminé était classer selon leur hydrophobicités. Mais est ce que le milieu acide utiliser vas influencer la migration de ces élément.  [...]

[Biochimie] ccm des acides gras d'un huile d'olive

J'aimerais bien savoir pourquoi lors de la séparation des acides gras d'un huile d'olive par ccm les triglycérides migrent plus que les acides gras liquides,les diglycérides et les monglycéride sur la plaque.  [...] En d'autres termes les triglycérides sont plus apolaires que les acides gras, les diglycérides et les monoglycérides, donc les triglycérides migrent plus.  [...]

[Biochimie] spectre d'absorption et ADN

En fait comme tu as la même concentration dans les 2 échantillons, il y a autant de molécules. Cependant l'ARN comporte deux fois moins de paires de bases que l'ADN.   [...] une électrophorèse en gel d'agarose permet la séparation des acides nucléiques chargés négativement suivant un champs électrique.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'électrophorèse

La technique de l'électrophorèse en gel d'agarose est basée sur la séparation des acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique. Cette séparation s'effectue à travers la matrice du gel d'agarose. les molécules de plus petites tailles se déplacent plus rapidement et migreront plus loin que les molécules de tailles supérieures.  [...] En ce qui concerne wiki je dois avouer que c'est une source d'information assez pertinente et surtout traite des données trop bien détaillées et je le redis pour cette raison que je me suis dirigée vers ce Forum pour avoir des réponses résumées et convenable, n'empêche que l'effort personnel était absent dans ce cas là.s.   [...]

[Biochimie] Dosage spectrophotométrique des protéines

Vous avez aussi le dosage par Warburg et Christian. Il permet la séparation des acides nucléiques et protéines selon un ratio propre à la méthode.  [...] J'ajoute que Warburg et Christian nécessite deux spectros. une à 260 et une à 280 nm. (question de domaine d'absorbance des acides nucléiques à 260 et des a.a aromatiques à 280.).  [...]