• Forum - Sens, Promoteur, Synthèse, Protéine

[Biologie Moléculaire] Vecteurs d'expression

l'intérêt de mettre le fragment d'ADN dans le même sens qu'un promoteur est très certainement de permettre une transcription/traduction dans le cas ou l'on souhaite produire une protéine.  [...] l'autre cas ou l'on met la séquence sans promoteur ou dans le sens inverse permet d'amplifier seulement le fragment d'ADN si l'on ne souhaite étudier que ça, ( la protéine pouvant être toxique pour l'organisme transformé).  [...]

Transfection et récupérer protéine

je pensais à transfecter une cellule CHO avec un plasmide contenant l'ADNc. La machinerie cellulaire va synthétiser la protéine mais ensuite comment isoler et purifier la protéine.  [...] Il faut faire attention lors de la synthèse, choisissez bien votre promoteur, cherchez dans la littérature il doit exister des constructions particulières pour les protéines membranaires. Faites également très attention au détergent que vous utiliserez lors de l'extraction pour essayer de la garder votre protéine la plus soluble possible.  [...]

Protéine recombinante, promoteurs du vecteur d'expression

2/ On choisit un promoteur inductible. Si j'ai bien compris son interet est de pouvoir réguler la synthèse de la protéine en fonction de l'activité de la bactérie. Par exemple si la protéine synthétisé est toxique pour la bactérie on va chercher à ne pas la produire lors de la phase de multiplication bactérienne et lancer la production lors de la phase stationnaire.  [...] Et même si ce n'est pas toxique, il vaut mieux induire à la fin, on a de meileurs rendements car la pousse n'est pas ralentie à cause d'une protéine surproduite et une meilleure gestion des nutriments.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène0 AOX1!!

Parmis les avantages de la production de protéines recombinantes chez Pichia pastoris, on cite souvent la présence d'un promoteur fort.AOX1...Comment peut on exploiter ce promoteur aprés l'avoir isolé de cette souche afin de produire des protéines recombinantes dans de grandes quantités.  [...] Lorsque méthanol est abscent les facteurs de transcription changent de configuration et bloquent l'opérateur du promoteur. La synthèse de la proteine n'a pas lieu. Car ARNpolymerase ne peut s'attacher au promoteur suite à la modification de configuration des proteines indispensable à l'initiation de la transcription.  [...]

[Biologie Cellulaire] Séquences régulatrices des gènes

Sinon pour les autres questions je ne pense pas qu'il soit bon de reporter de proche en proche les régulateurs des régulateurs.   [...] Vous avez une protéine A qui transactive un gène G. Evidemment, Vous pourriez dire que le promoteur du gène codant pour A serait un élément cisrégulateur de G. Cela n'a pas beaucoup de sens. Je pense que le caractère direct de l'interaction est prédominant.  [...]

La transcription d'un gène ?

Et ces 2 transcrits une fois traduit n'aboutiront pas du tout à la même protéine malgré que les bases azotées soient complémentaires et fassent parti pourtant d'un même gène.  [...] En revanche, il existe des cas où on trouve un deuxième promoteur dans le sens inverse. Dans ce cas il y a production de deux ARN complémentaires. Une des conséquences de cela est la destruction des ARN produits, il n'y a donc pas de protéine produite.  [...]

[Biologie Moléculaire] Promoteurs altérnatifs

OK merci Taz 79. Encore une petite chose. Lorsqu'un gène comporte plusieurs promoteurs, est-ce que tous ses promoteurs sont actifs ou seulement certains Cela dépend du type de protéine qu'on veut produire ou pas.  [...] Je pense que la concentration de la protéine peut jouer indirectement sur l'activation du promoteur et le choix du promoteur. Je m'explique. Par exemple, si ta protéine est synthétisée à un niveau basal dans la cellule et que soudainement il n'y en a plus.  [...]

Comment les protéines et l'ARN peuvent-ils agir sur les genes?

Certaines protéines appelées promoteurs peuvent venir se fixer sur l'ADN, sur certains secteurs spécifiques à proximité de gènes particuliers.  [...] Ce qu'on appelle promoteur, c'est une séquence d'ADN qui est à proximité de la séquence codante du gène (qui sera transcrite en ARNm, lui-même traduit en protéine). Les protéines venant se fixer sur le promoteur sont des facteurs de transcription qui permettent l'expression du gène, ou au contraire l'inhibition de son expression. Ca peut marcher dans les deux sens.  [...]

microbiologie (sens anti-sens)

après une recherche sans succès sur le forum futur-sciences, j'aurai besoin d'une petite aide, dans mon cours on fais souvent référence dans une cartographie de restriction a une orientation sens ou anti-sens par rapport au promoteur mais je ne comprend pas vraiment ce que cela signifie (sens et anti-sens, si quelqu'un veut bien m'éclairer.  [...] jai cru comprendre que sens c'était vers le sens des aiguilles d'une montre et anti-sens que c'etait l'inverse par rapport au promoteur si c'est ça comment peut on définir si c'est sens ou anti-sens a partir de fragment d'ADN dans une cartographie de restriction.  [...]

[Divers] aide révision questions diverses

Est-ce que l'acétylation des histones au niveau des nucléosomes qui contiennent le promoteur d'un gène peut faire que son expression soit réprimée En gros si y a pas de promoteur la synthèse ne commence jamais vu que il faut que le site promoteur se lie sur le ribosome.  [...] Le promoteur d'un gène est une partie de l'ADN située en amont de ce gène, qui sert à en réguler la transcription (et non la traduction, rien à voir avec les ribosomes donc). Sur le promoteur vont venir se fixer des protéines capables de reconnaitre spécifiquement la séquence d'une partie du promoteur et activer ou inhiber la synthèse de ce gène (en empêchant ou permettant à l'ARN polymérase de se fixer).  [...]