• Forum - Sang, Extraction, ADN

Extraction de l'ADN

bonjour, j'aurais voulue savoir s'il existé un autre protocole pour faire une extraction de l'ADN dans le sang qui n'utilise pas de phenol-chloroforme merci.  [...] Il existe des kits tout pret pour extraire l'ADN du sang directement, ils sont produits par Qiagen, par contre je ne me souviens plus du tout de la référence, ça doit être un truc du genre dneasy tissue extraction.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN DE SANG

Je suis à la recherche d'un protocole simple d'extraction d'ADN de sang sans utilisation de proteinase. du prelevement du sang à l'obtention de l'ADN.  [...] L'utilisatin de protéase irait Je connais que le kit Qiagen. QIemp DNA Blood Midi Kit pour extraire l'ADN à partir de sang, après il y en a d'autre.  [...]

Problème d'extraction d'ADN

Je me permet de vous solliciter pour un problème d'extraction d'ADN que j'ai rencontrer. J'utilise la méthode d'extraction sur colonne de gel de silice à partir de prélèvement de sang total congelé. Le hic, c'est en voulant décongeler mes prélèvement trop vite, j'ai accidentellement coagulé le sang total.  [...] La coagulation étant due à l'albumine je suppose(70°C). Ma question est la suivante. Y'a-t-il un moyen de sauver mes prélèvements Y'at-til un traimtement que je peux leur faire subir pour pouvoir quand même en extraire de l'ADN ( le principal problème du sang coagulé c'est que ça bouche la colonne, ce qui rend la séparation du lysat par centrifugation impossible).  [...]

[Biologie Moléculaire] osmose hématies et leucocytes

Dans le but de faire une extraction d'ADN à partir de sang, j'ai recherché des protocoles m'indiquant qu'il fallait faire éclater les hématies par choc osmotique...J'imagine donc qu'il faut ajouter une solution mois concentré (comme de l'eau distillée je pense) mais comment faire pour que seul les hématies éclatent et non pas les leucocytes.  [...] Je ne vais pas travailler avec du sang humain mais le résultat serait le même. Effectivement les hématies n'ont pas ne noyau donc peut d'ADN c'est pour cela que je veux les faire éclater. Je vais donc garder les leucocytes intacts pour les récupérer après centrifugation ce qui me permettras une fois les leucocytes récupérés de faire une extraction efficace.  [...]

[Biochimie] Extraction ADN

Salut, le détergent sert à fractionner les membranes des cellules. Le phénol et le chloroforme servent à séparer l'ADN des protéines qui se retrouvent ainsi dans deux phases différentes. Le phénol a une action inhibitrice sur les enzymes d'une manière générale, ce qui évite la dégradation de l'ADN par les DNases (spécialisées dans la destruction de l'ADN).  [...] En ce qui concerne le détergent sais-tu qu'elle réaction a lieu lors de la destruction de la membrane si c'est bien de cela qu'il s'agit.   [...]

comment extraire l'ADN foetal?

Est ce que quelqu'un a une idée concernant l'extraction de l'ADN foetale a partir du sang de la maman au premiers mois de grossesse.  [...] Ensuite il faut savoir pourquoi tu veux extraire cet ADN. Si tu veux l'amplifier en PCR après il y aura quelques étapes supplémentaires.  [...]

extraction phenol chloroforme

je veux savoir est ce que je peus faire un extraction phenol chloroforme de l'ADN viral à partir du sérum et non pas du sang total.  [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme centrifugation

Je bloque actuellement sur un protocole d'extraction d'ADN a partir de sang ou les valeurs liées a la centrifugation ne sont pas exprimées en tour par minutes,mais en en x g.  [...] Plus sérieusement, il ne faut pas sous estimer la vétusté des équipements de certains labos ou salles de TP. Il doit encore tourner un nombre significatif de vieux tromblons de l'an 2. Savoir faire la conversion est toujours bon à prendre.   [...]

[Biologie Moléculaire] les résultats de migration sur gel d'agarose

On amplifie une séquence d'ADN (exon 7), qui est la responsable de la maladie de l'amyotrophie spinale,l'extraction de l'adn se fait à partir du sang et nous attendons à voir la présence ou non de l'exon dite.Pour plus de compréhension veuillez voir Van der stege et al 1995.  [...] Autres questions s'il vous plait comment calculer le volume de la BET à ajouter dans le gèle d'agarose à 1%(je veux la relation générale s'il vous plait ), sachant que les informations notées sur le tube de stock sont les suivants. 10 ml (10Mg/ml) (Invitrogen) et quelle la méthode la plus pratique est ce que j'ajoute le BET directement dans le gel ou après la migration et la coloration(après la migration sur gèle),et comment calculer le volume du bleu de bromophénol (le colorant) à ajouter pour suivre la migration de l'échantillon de l'ADN.  [...]

[Génétique] Amorce universelle M13 ?

Excusez-moi pour cette question naïve, mais je ne trouve pas d'info me permettant de comprendre sur internet. Je travaille dans un labo de biologie moléculaire qui fait essentiellement de séquençage et qui utilise des amorces M13. Je n'ai jamais vu cela en cours, est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer.   [...] Je suis désolé mais je n'ai pas très bien compris. En fait, au laboratoire de biologie moléculaire où je travaille actuellement, on fait du séquençage de gènes d'intérêt clinique (hémochromatose, tumeurs endocrines, cytochromes...) donc dans un premier temps, après extraction de l'ADN sur des échantillons de sang, les PCR sont faites.  [...]