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[Biologie Cellulaire] Compter les passages

Bon en fait j'ai une lignée qui exprime une récepteur calcique transfecté avec un plasmide comprenant une résistance (G418) Donc à chaque passage, je dois avoir des cellules exprimant assurément le plasmide (autrement ils n'auraient pas la résistance et mourraient) et donc le récepteur en question.  [...] Voila quelques pistes d'études à creuser si tu veux comprendre le mécanismes, mais 20 passages, ca fait 1,5 à 2 mois, ce qui est quand même pas mal. Tu risques d'avoir une dérive de ta lignée d'autant plus rapide que ta dilution de cellule est forte lors des passages (donc que le temps de doublement est rapide).  [...]

[Biologie Cellulaire] "Lignée Cellulaire" c'est quoi ?

C'est une culture de cellules qui s'est développée à partir d'une unique cellule. En théorie, toutes les cellules d'une même lignée partagent le même patrimoine génétique. En pratique, certaines dérives peuvent être observées au fur et à mesure des passages successifs, mais disons que le phénotype reste globalement inchangé.  [...] La définition de TanguyE est exacte, mais il faut préciser que l'on parle de lignée pour définir des cellules immortelles, qui sont donc capables de proliférer indéfiniment. C'est le cas des cellules cancéreuses, c'est pour cette raison que les laboratoires de biologie cellulaire utilisent des lignées comme modèles pour travailler, puisqu'elles sont immortelles, plus simples à cultiver que des cellules saines.  [...]

Nombre de passage Caco-2

vous voulez connaitre le nombre maximum de passages que l'on peut faire avec cette lignée ou bien vous voulez savoir comment réaliser le passage (trypsination) des cellules caco pour pouvoir faire votre test dans de bonnes conditions.  [...] n'importe quelle lignée cellulaire ne doit pas subir de trop grand nombres de passages. a chaque fois que l'on effectue un passage, on s'expose a une dérive de la lignée.  [...]

[Biologie Cellulaire] production d'anti-corps à l'infini

Et pour cela, il faut créer une cellule hybride en faisant fusionner un lymphocyte produisant l'anticorps souhaité et une cellule transformée d'après mes informations...Or, d'après moi, une cellule transformée est une cellule immortelle qui après un certain nombre de passages, est devenue tumorale (et donc est devenue tumorale et immortelle).  [...] Or, d'après moi, une cellule transformée est une cellule immortelle qui après un certain nombre de passages, est devenue tumorale (et donc est devenue tumorale et immortelle)...Je ne vois pas l'interet, pourquoi ne pas prendre directement une cellule immortelle et non une transformée.  [...]

[Génétique] Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

Je viens de décongeler une lignée de cellules cancéreuse censée sur-exprimer une protéine donnée. Or, après qPCR, la protéine est normalement exprimée. Il y a un an, cette lignée sur-exprimait bien la protéine mais plus maintenant. J'ai re-testé mon couple d'amorces, ainsi que d'autres paramètres.  [...] Techniquement, la lignée a été congelée et décongelée peu de fois (2 à 3 fois maxi). Niveau repiquage j'étais à P6 (6 passages). On ne peut pas parler de lignée fraîche. Pourquoi le fait de décongeler ou repiquer aurait pu faire perdre l'expression de ma molécule à mes lignées.  [...]

[Biologie Cellulaire] Peut-on cultiver du cancer in vitro !

En effet elles sont immortelles et c'est tout l'interêt de cultiver des cellules cancéreuses, il est très faciles d'établir des lignées à partir de celles-ci sans besoin de les immortaliser, contrairement à des cellules normales qui, sans immortalisation, ne peuvent être gardées que quelques passages en culture in vitro.  [...] -S'il s'agit d'une lignée établie, les protocoles de culture (milieu, temps et ratios de passages etc...) peuvent être différents selon la lignée. Si tu veux des exemples va sur le site d'american type cell culture (un exemple en cliquant au hasard sur le site.  [...]

[Biologie Cellulaire] Nombre de passages

J'aurais une petite question concernant la culture cellulaire. Auparavant je n'avais fait que des cultures primaires de fibroblastes, et je devais faire attention au nombre de passages de mes cellules.  [...] Autrement dit on ne sait absolument pas à quel passage réel sont les lignées que l'on manipule. Pour autant, nous sommes nombreux à utiliser une notation de remise à zéro des passages après chaque décongélation simplement parce que c'est beaucoup plus simple.  [...]

Utilisation du micro-ondes info ou intox ?

De nouveaux composés sont formés, appelés composés radiolytiques, qui ne sont pas trouvés dans la nature. D'une manière intéressante, les micro-ondes sont actuellement utilisées dans les technologies modifiant les gènes pour délibérément briser les cellules et neutraliser leur force de vie pour qu'elles puissent être manipulées.  [...] Vu qu'il n'a pas mis en évidence une seule cellule cancéreuse, si tant est qu'il sache les reconnaitre, on peut sauter tous les passages y faisant allusion.  [...]

Conseils pour réaliser un film...

Depuis maintenant quelques années, je réalise de films (vraiment très courts) dans lesquels je m'amuse à réaliser des effets spéciaux en tout genre avec ou sans ordinateur.   [...] Tu peux faire des petits documentaires sur les oiseaux de ton jardin par exemple. les passages au nid (attention à ne pas les déranger. Je te recommande si celà t'intéresse de te documenter avant sur les risques de dérangement de la nichée.), les chants au matin, quelques comportements intéressants, etc.  [...]